تشريح العين ماوس لجبل الجامعة للصبغات الظهارة الشبكية
Summary
مظاهرة رسمية للتشريح العين الماوس ، مما أدى إلى تحميل كامل من الظهارة الصبغية الشبكية.
Abstract
الظهارة الصبغية الشبكية (RPE) وتقع في الجزء الخلفي من العين الثدييات ، فقط تحت الشبكية العصبية ، والتي تحتوي على المستقبلات الضوئية (قضبان ومخاريط). وRPE هو أحادي الطبقة من الخلايا الصباغية مكعبية وبشكل وثيق مع شركاء العصبية في الشبكية فقط فوقه. هذا الارتباط يجعل من RPE اهتماما كبيرا للباحثين الذين يدرسون أمراض الشبكية. وRPE هو أيضا موقع لفحص في الجسم الحي من التماثل الموجه إصلاح الحمض النووي ، ومقايسة للأمم المتحدة ع. العين الماوس صعبة للغاية لتشريح بسبب حجمها الصغير (حوالي 3.5mm في القطر) وشكلها كروي. هذه المقالة يوضح بالتفصيل عن إجراء تشريح للعين مما يؤدي إلى تحميل كامل RPE. في هذا الإجراء ، وتبين لنا كيفية العمل معها ، وليس ضد ، والهيكل الكروي للعين. باختصار ، تتم إزالة النسيج الضام والعضلات ، والعصب البصري من الجزء الخلفي من العين. ثم ، يتم إزالة القرنية والعدسة. المقبل ، يتم إجراء تخفيضات الاستراتيجية التي تؤدي إلى تسطيح كبير من الأنسجة المتبقية. أخيرا ، رفع بلطف العصبية في الشبكية الخروج ، كشفت عن RPE سليمة ، والتي لا تزال تعلق على المشيمية الكامنة والصلبة. ويمكن استخدام هذا كله جبل لتنفيذ مقايسة للامم المتحدة لتقييم p أو المناعية أو مناعي من النسيج RPE.
Protocol
Discussion
وRPE هو موقع للامم المتحدة مقايسة ع ، وهي مقايسة في الجسم الحي للإصلاح ، تناظر الموجهة. وقد استخدمت الأمم المتحدة للمقايسة p لدراسة آثار أضرار الحمض النووي DNA ومختلف 1،2 يشير الضرر وإصلاح الجينات 3،4،5 على وتيرة الإصلاح ، ت?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد هذا العمل من قبل المعهد الوطني لعلوم الصحة البيئية [K22ES012264 لAJRB] وجمعية السرطان الأمريكية InstitutionalResearch غرانت [ACS – IRG – 00 – 173-04] projectaward التجريبية [لAJRB]. ونشكر أيضا أعضاء في مختبر المطران لقراءة نقدية للمخطوطة والتعليقات على الفيديو وآدم براون على وجه الخصوص ، لمثال على ما لا يجب فعله. نشكر الدكتور دونالد مكوين من Greehey سرطان الأطفال في معهد بحوث على السماح لنا استخدام نطاق له تشريح / كاميرا الفيديو الموضوعة للتصوير الفيديو تشريح. نشكر دارون براون في لشحذ الأدوات كورت وتصليح الأدوات microdissection لدينا.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| straight forceps | Roboz | RS-4903 | tip: .08 x .04 mm material: INOX | |
| 45° forceps | Roboz | RS-5005 | tip: .05 x.01 mm material: INOX | |
| 15° “up” forceps | Roboz | RS-5045A | tip: .1 x.06 mm material: INOX | |
| spring scissors | Roboz | RS-5604 | comb. tip width 0.3mm cutting edge length 3mm material: stainless steel | |
| binocular dissecting microscope | Ziess | Discovery V.8 | use reflected light source | |
| phalloidin | Invitrogen | A22283 | Alexa Fluor 546 |
References
- Bishop, A. J., Kosaras, B., Sidman, R. L., Scheistl, R. H. Benzo(a)pyrene andX-rays induce reversions of the pink-eyed unstable mutation in the retinal pigmentepithelium of mice. Mutat. Res.. 457, 31-31 (2000).
- Reliene, R. H. l. a. v. a. c. o. v. e., Mahadevan, A., Baird, B., M, W., Schiestl, R. H. Diesel exhaust particles cause increased levels of DNA deletions after transplacental exposure in mice. Mutat. Res. 570, 245-2452 (2005).
- Bishop, A. J., Barlow, C., Wynshaw-Boris, A. J., Scheistl, R. H. Atm deficiency causes increased frequency of intrachromosomal homologous recombination in mice. Cancer Res. 60, 395-399 (2000).
- Brown, A. D., Claybon, A. B., Bishop, A. J. Mouse WRN helicase domain is not required for spontaneous homologous recombination-mediated DNA deletion. J. Nucleic Acids. , (2010).
- Claybon, A., Karia, B., Bruce, C., Bishop, A. J. PARP1 suppresses homologous recombination events in mice in vivo. Nucleic Acids Res. , (2010).
- Bishop, A. J. p53-, and Gadd45a-deficient mice show an increased frequency ofhomologous recombination at different stages during development. Cancer Res. 63, 5335-5343 (2003).
- Bodenstein, L., Sidman, R. L. Growth and development of the mouse retinalpigment epithelium. Part I. Cell and tissue morphometrics and topography of mitoticactivity. Dev Biol. 121, 192-204 (1987).
- Burke, J. M. Epithelial phenotype and the RPE: is the answer blowing in the Wnt?. Prog Retin. Eye Res. 27, 579-595 (2008).
