सेल सेल इंटरेक्शन चालाकी के लिए सिलिकॉन माइक्रोचिप्स
Summary
यह लेख एक सुक्ष्ममापी पैमाने पर पक्षपाती कोशिकाओं के बीच सेल सेल बातचीत गतिशील विनियमन के लिए एक प्रायोगिक दृष्टिकोण का वर्णन करता है. Hepatocytes और stromal सेल के बीच कहनेवाला संचार के हेरफेर का प्रदर्शन है. विकसित मंच विकास और रोगजनन सहित जैविक प्रक्रियाओं की एक किस्म में सेल सेल बातचीत की जांच के लिए सक्षम बनाता है.
Abstract
सेलुलर microenvironment के विकास से लगभग घातक परिवर्तन करने के लिए सभी स्तनधारी ऊतकों में सेल भाग्य और समारोह का निर्धारण करने में महत्वपूर्ण भूमिका के रूप में मान्यता प्राप्त है. विशेष रूप से, पड़ोसी stroma के साथ बातचीत जैविक घटना के एक बहुतायत में फंसाया गया है, तथापि, पारंपरिक तकनीक ऐसी बातचीत के स्थानिक और गतिशील तत्व पूछताछ करने की क्षमता की सीमा.
(आर सी) के micromechanical reconfigurable संस्कृति में, हम भागों चलती गतिशील यांत्रिक repositioning के माध्यम से सेल सेल बातचीत नियंत्रण के साथ एक micromachined सिलिकॉन सब्सट्रेट को रोजगार. इससे पहले, इस पद्धति hepatocytes और गैर parenchymal कोशिकाओं के सह संस्कृतियों में कहनेवाला संचार की जांच, समय पर निर्भर बातचीत और घुलनशील एक संकेत के लिए एक सीमित रेंज का प्रदर्शन करने के लिए लागू किया गया है.
यहाँ, हम विस्तार से तैयारी और आर सी प्रणाली के उपयोग का वर्णन. हम डिवाइस चिमटी, अंतर और संपर्क विन्यास के बीच actuating सहित का उपयोग कर हिस्से के प्रदर्शन से निपटने के द्वारा शुरू (सेल आबादी 80 सुक्ष्ममापी एक संकरी खाई से अलग है, या सीधे घनिष्ठ संपर्क में है). अगला, संस्कृति substrates के लिए तैयारी की प्रक्रिया के विस्तार, हम और बहु कदम सेल बोने प्रक्रिया मिला हुआ सेल monolayers प्राप्त करने के लिए आवश्यक है. जीना माइक्रोस्कोपी का उपयोग करना, हम तो अलग संभव प्रायोगिक विन्यास के बीच कोशिकाओं के वास्तविक समय हेरफेर वर्णन. टोल्यूनि और पिरान्हा सफाई, polystyrene, कोटिंग, और ऑक्सीजन प्लाज्मा उपचार: अंत में, हम क्रम में आवश्यक कदम करने के लिए पुनः प्रयोग के लिए युक्ति सतह पुनर्जन्म का प्रदर्शन.
Protocol
Discussion
इस प्रणाली अनूठी है कि यह ऊतक के स्थानिक संगठन को गतिशील रूप से सेलुलर स्तर पर चालाकी से किया जा के लिए सक्षम बनाता है. नतीजतन, इस डिवाइस उपन्यास जैविक प्रयोगों की एक संख्या के लिए सक्षम है, कहनेवाला संकेत गतिशी?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखक इस डिवाइस डिजाइन की प्रक्रिया के दौरान उपयोगी विचार – विमर्श के लिए सलमान Khetani, Jared एलन, क्रिस Flaim, और ऑस्टिन Derfus धन्यवाद. यह काम राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन संकाय जल्दी कैरियर विकास कार्यक्रम, स्वास्थ्य / नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ मधुमेह और पाचन और गुर्दा रोग के राष्ट्रीय संस्थानों, और दाऊद और Lucile Packard फाउंडेशन द्वारा समर्थित किया गया था. EEH एक रुथ एल Kirschstein राष्ट्रीय अनुसंधान सेवा पुरस्कार के द्वारा समर्थित किया गया था.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Silicon Comb Substrates | Tool | N/A | N/A | Parts are available for collaborative research projects. Please contact Elliot Hui (eehui @ alum . mit . edu) or Sangeeta Bhatia (sbhatia @ mit . edu). |
References
- Hui, E. E., Bhatia, S. N. Micromechanical control of cell-cell interactions. Proceedings of the National Academy of Sciences. 104, 5722-5726 (2007).
- Bhatia, S. N., Balis, U. J., Yarmush, M. L., Toner, M. Effect of cell-cell interactions in preservation of cellular phenotype: cocultivation of hepatocytes and nonparenchymal cells. The FASEB Journal. 13, 1883-1900 (1999).
- El-Ali, J., Sorger, P. K., Jensen, K. F. Cells on Chips. Nature. 442, 403-411 (2006).
