सकल सामंजस्य के ऊतक भूतल Tensiometry द्वारा मापन
Summary
हम 3 डी ऊतक की तरह समुच्चय के भीतर कोशिकाओं के बीच बंधन ऊर्जा, ऊतक सतह तनाव के रूप में व्याख्या योग्य को मापने की एक विधि का वर्णन करता है. ऊतक सतह तनाव में अंतर करने के लिए फेफड़ों, मांसपेशियों और मस्तिष्क ट्यूमर के invasiveness के साथ सहसंबंधी प्रदर्शन किया गया है, और विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं के बीच स्थानिक संबंधों की स्थापना की मौलिक निर्धारक हैं.
Abstract
कहनेवाला बंधन ऊर्जा के कठोर माप केवल प्रणालियों में thermodynamic के सिद्धांतों में संतुलन पर आधारित विधियों का उपयोग किया जा सकता है. हम ऊतक सतह tensiometry (TST) विशेष रूप से सतह कोशिकाओं के बीच बातचीत से मुक्त ऊर्जा को मापने के लिए विकसित किया है. biophysical TST अंतर्निहित अवधारणाओं के पहले विस्तार 1,2 में वर्णित किया गया है . विधि प्रेक्षण है कि पारस्परिक रूप से एकजुट कोशिकाओं, अगर संस्कृति मिलाते में बनाए रखा है, अनायास समूहों में इकट्ठा करेंगे पर आधारित है. समय के साथ, इन समूहों के दौर क्षेत्रों फार्म का होगा. यह व्यवहार गोलाई तरल सिस्टम के व्यवहार विशेषता mimics. कहनेवाला बाध्यकारी ऊर्जा कस्टम डिजाइन एक ऊतक सतह tensiometer में समानांतर प्लेटों के बीच गोलाकार समुच्चय compressing द्वारा मापा जाता है. एक ही गणितीय समीकरण के लिए एक तरल छोटी बूंद के सतह तनाव को मापने के लिए इस्तेमाल किया 3D ऊतक की तरह गोलाकार समुच्चय के सतह तनाव को मापने के लिए प्रयोग किया जाता है. तरल सतह तनाव के सेलुलर बराबर कहनेवाला बंधन ऊर्जा, या अधिक आम तौर पर, ऊतक cohesivity है. हमारी प्रयोगशाला से पिछले अध्ययनों से पता चला है कि ऊतक सतह तनाव (1) भविष्यवाणी की है कि भ्रूण कोशिकाओं के दो समूहों को एक 1-5 दूसरे के साथ बातचीत, (2) दृढ़ता से ऊतकों की क्षमता 6 biomaterials के साथ बातचीत को प्रभावित कर सकते हैं (3) cadherin आधारित कहनेवाला 7 सामंजस्य की प्रत्यक्ष हेरफेर के माध्यम से न केवल, लेकिन यह भी 8-11 FN और 4 के रूप में महत्वपूर्ण ECM अणुओं) में हेरफेर के द्वारा बदल फेफड़ों के कैंसर के 12, 13 fibrosarcoma, मस्तिष्क 14 ट्यूमर और प्रोस्टेट ट्यूमर के आक्रामक क्षमता के साथ संबद्ध सेल लाइनों 15. इस अनुच्छेद में हम तंत्र, विस्तार spheroids उत्पन्न करने के लिए आवश्यक कदम, tensiometer कक्ष में spheroids लोड, समग्र संपीड़न आरंभ करने के लिए, और विश्लेषण और ऊतक सतह तनाव उत्पन्न माप मान्य वर्णन करेंगे.
Protocol
Discussion
TST द्वारा कुल सामंजस्य माप अपेक्षाकृत सरल है. वहाँ रहे हैं, तथापि, महत्वपूर्ण कदम है कि आदेश में महारत हासिल useable TST डेटा उत्पन्न होना चाहिए;) 1 समुच्चय "" स्वस्थ होना चाहिए. यह सुनिश्चित करना है कि कुल गठन ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
- water bath/shaker (New Brunswick Scientific, Edison, NJ)
- 10 ml round-bottom flasks (Belco, Vineland, NJ)
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