Preparando Modelo de rebaixo de epileptogênese Pós-Traumático em Roedores
Summary
Córtex parcialmente isolado ("minar") é um modelo animal eficiente de epileptogênese pós-traumático. Aqui demonstramos como fazer um novo dispositivo cirúrgico e usá-lo para fazer lesões mais precisas e consistentes para gerar este modelo.
Abstract
Córtex parcialmente isolado ("minar") é um modelo animal de epileptogênese pós-traumático. O procedimento cirúrgico envolve o corte através do córtex sensório-motor e por baixo da substância branca (minar) para que uma região específica do córtex cerebral é em grande parte isolado do córtex e regiões vizinhas subcortical 1-3. Após uma latência de duas ou mais semanas após a cirurgia, descargas epileptiformes podem ser gravados em fatias de cérebro de roedores 1; e convulsões elétricas ou comportamento pode ser observado in vivo a partir de outras espécies como gato e macaco 4-6. Este modelo animal bem estabelecido é eficiente para gerar e imita diversas características importantes da lesão cerebral traumática. No entanto, é tecnicamente desafiador tentar fazer precisas lesões corticais no cérebro de pequenos roedores com uma mão livre. Com base no procedimento estabelecido inicialmente no laboratório do Dr. David Príncipe na Universidade Stanford 1, aqui apresentamos uma técnica aprimorada para realizar uma cirurgia para a elaboração deste modelo em camundongos e ratos. Demonstramos como fazer um dispositivo cirúrgico simples e usá-lo para obter um melhor controle da profundidade de corte e ângulo de gerar resultados mais precisos e consistentes. O dispositivo é fácil de fazer, eo procedimento é rápido para aprender. A geração deste modelo animal fornece um sistema eficiente para o estudo sobre os mecanismos de epileptogênese pós-traumático.
Protocol
Discussion
Minar o modelo é um sistema altamente eficiente para o estudo da epileptogênese pós-traumático. A cirurgia típica leva apenas cerca de 20-30 minutos para terminar, e evocou ou atividade epileptiforme espontânea pode ser gravado em fatias de a maioria dos animais de duas semanas após a cirurgia 1-2. Mais importante, este modelo imita os aspectos de alterações após uma lesão cerebral traumática, tais como hemorragia, inflamação, edema axotomia e morte neuronal 7. Não só tem atividade …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi financiado pelo NIH / NINDS conceder 4R00 NS 057940, e SCBI conceder 200-12 da medula espinhal e financiar Brain Research Lesão do Estado de Indiana Department of Health.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number |
| Foredom micromotor kit | equipment | Foredom | K.1070 |
| 1.5 inch 22-gauge syringe needle | material | BD company | 305156 |
| 1.5 inch 25-gauge syringe needle | material | BD company | 305127 |
| Cyanoacrylate glue | material | Ted Pella | 14450 |
References
- Hoffman, S. N., Salin, P. A., Prince, D. A. Chronic neocortical epileptogenesis in vitro. J Neurophysiol. 71, 1762-1773 (1994).
- Topolnik, L., Steriade, M., Timofeev, I. Hyperexcitability of intact neurons underlies acute development of trauma-related electrographic seizures in cats in vivo. Eur J Neurosci. 18, 486-496 (2003).
- Graber, K., Prince, D. A. . Models of Seizures and Epilepsy. , 477-493 (2005).
- Nita, D. A., Cisse, Y., Timofeev, I., Steriade, M. Increased propensity to seizures after chronic cortical deafferentation in vivo. J Neurophysiol. 95, 902-913 (2006).
- Sharpless, S. K., Halpern, L. M. The electrical excitability of chronically isolated cortex studied by means of permanently implanted electrodes. Electroencephalogr Clin Neurophysiol. 14, 244-255 (1962).
- Echlin, F. A., Battista, A. Epileptiform Seizures from Chronic Isolated Cortex. Arch Neurol. 9, 154-170 (1963).
- Prince, D. A. Epileptogenic neurons and circuits. Adv Neurol. 79, 665-684 (1999).
- Marin-Padilla, M. Developmental neuropathology and impact of perinatal brain damage. II: white matter lesions of the neocortex. J Neuropathol Exp Neurol. 56, 219-235 (1997).
- Jin, X., Prince, D. A., Huguenard, J. R. Enhanced excitatory synaptic connectivity in layer v pyramidal neurons of chronically injured epileptogenic neocortex in rats. J Neurosci. 26, 4891-4900 (2006).
- Li, H., Prince, D. A. Synaptic activity in chronically injured, epileptogenic sensory-motor neocortex. J Neurophysiol. 88, 2-12 (2002).
- Salin, P., Tseng, G. F., Hoffman, S., Parada, I., Prince, D. A. Axonal sprouting in layer V pyramidal neurons of chronically injured cerebral cortex. J Neurosci. 15, 8234-8245 (1995).
- Avramescu, S., Nita, D. A., Timofeev, I. Neocortical post-traumatic epileptogenesis is associated with loss of GABAergic neurons. J Neurotrauma. 26, 799-812 (2009).
- Avramescu, S., Timofeev, I. Synaptic strength modulation after cortical trauma: a role in epileptogenesis. J Neurosci. 28, 6760-6772 (2008).
