Voorbereiden Undercut Model van Posttraumatische epileptogenese in Knaagdieren

Summary

Gedeeltelijk geïsoleerd cortex ("ondermijnen") is een efficiënte diermodel van posttraumatische epileptogenese. Hier laten we zien hoe je een roman chirurgisch apparaat te maken en het gebruiken om meer nauwkeurige en consistente letsels aan te brengen in dit model te genereren.

Abstract

Gedeeltelijk geïsoleerd cortex ("ondermijnen") is een diermodel van posttraumatische epileptogenese. De chirurgische procedure heeft betrekking op het doorsnijden van de sensomotorische cortex en de daaronder witte stof (te onderbieden) zodat een specifieke regio van de cerebrale cortex grotendeels geïsoleerd is van de naburige cortex en subcorticale regio's ^1-3. Na een vertraging van twee of meer weken na de operatie, kan epileptiforme ontladingen worden opgenomen in de hersenen plakjes van knaagdieren ^een en elektrische of het gedrag van epileptische aanvallen kan worden waargenomen in vivo van andere soorten zoals kat en aap ^4-6. Dit gevestigde diermodel is efficiënt te genereren en bootst een aantal belangrijke kenmerken van traumatisch hersenletsel. Het is echter technisch uitdagende poging om nauwkeurige corticale laesies te maken in de kleine knaagdieren hersenen met een vrije hand. Gebaseerd op de procedure in eerste instantie opgericht in het labo van dr. David Prins aan de Stanford University ^een, hier presenteren wij een verbeterde techniek om een operatie uit te voeren voor de voorbereiding van dit model bij muizen en ratten. We laten zien hoe je een eenvoudige chirurgische apparaat te maken en het gebruiken om een ​​betere controle van de zaagdiepte en de hoek om meer nauwkeurige en consistente resultaten te genereren te krijgen. Het apparaat is makkelijk te maken, en de procedure is snel te leren. De generatie van dit dier model biedt een efficiënt systeem voor het onderzoek naar de mechanismen van posttraumatische epileptogenese.

Protocol

1. Het maken van een simpel apparaat voor ondersnijding chirurgie De undercut apparaat dat we geschapen bestaat uit drie delen (fig. 1): (1) een ondersteunende plaat van roestvrij staal of kunststof die bevestiging van een leidende buis en een naald toelaat, en zit over de hele schedel raam tijdens een operatie, (2) een leidende buis die een naald houdt in stand en vergunningen naald rotatie, en (3) een naald die is 90 graden gebogen op ~ 3 mm van de tip, en is beweegbaar door rotatie en inbrengen. …

Discussion

Het ondersnijding model is een zeer efficiënt systeem voor het bestuderen van posttraumatische epileptogenese. Een typische ingreep duurt slechts ongeveer 20-30 minuten afwerking aan, en riepen of spontane epileptische activiteit kan worden opgenomen in de segmenten van de meeste dieren twee weken na de operatie ^1-2. Nog belangrijker, dit model bootst aspecten van de veranderingen na traumatisch hersenletsel, zoals bloeden, ontsteking, oedeem, axotomy en neuronale dood ^7. Niet alleen is epileptisc…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number
Foredom micromotor kit	equipment	Foredom	K.1070
1.5 inch 22-gauge syringe needle	material	BD company	305156
1.5 inch 25-gauge syringe needle	material	BD company	305127
Cyanoacrylate glue	material	Ted Pella	14450