一个小鼠模型角膜血管生成研究掌上含量
Summary
角膜是独特的，因为它没有血管组织。然而，强大的血管的生长和生存，可以在角膜上，通过强有力的血管生成因子诱导。因此，角膜可以与我们提供一个有价值的工具，对血管生成的研究。此协议演示了如何执行角膜口袋检测，以及如何评估使用这个模型的血管生成因子诱导的血管生成的小鼠模型。
Abstract
一个正常的角膜是明确的血管组织。然而，血管可诱发，在强有力的血管生成因子1的角膜成长和生存。这种独特的角膜口袋检测最常用的血管生成研究模型之一。角膜细胞组成的多层次。因此，可以嵌入颗粒含有的血管生成因子在角膜上，探讨其血管生成作用 2,3利益。在这里，我们提供了一步一步示范如何（一）产生血管生成因子含颗粒（二）嵌入到角膜颗粒（三）分析利益的血管生成因子诱导的血管生成。由于碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）是已知的最有力的血管生成因子之一，它是用来诱发角膜新生血管形成。
Protocol
所有的设备和试剂使用无菌。批准该协议是由动物护理和使用聂/ NIH委员会（ACUC）（动物研究协议NEI – 553），并根据美国国立卫生研究院的准则和法规执行。 1。产生血管生成因子含有颗粒在这一部分中，包含利益的血管生成因子的颗粒准备。 设为10％（W / V），硫糖铝，用PBS液。贮存在室温下。 设为12％（W / V）聚甲基丙烯酸羟乙酯用…
Discussion
鼠标角膜口袋检测模型是在1979年首次描述Muthukkaruppan VR和奥尔巴赫R 6。 2,3,7,8不同的实验室已经公布了详细的协议。我们的实验室已修改和 4多年来，在我们的研究使用这种方法。鼠标角膜口袋里的分析是一个很大的重复性相对简单的模型。这种模式的另一个优点是，由于角膜通常缺乏血管在这个实验中，有背景的最低金额。因此，这种模式通常用于研究不同的因素和分子的血管?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们的研究是由美国国立卫生研究院，国家眼科研究所院内研究计划的支持。
Materials
| Equipment | Company | Catalog number |
|---|---|---|
| Dissecting microscope | World Precision Instruments | PZMIV-BS |
| Von Graefe cataract knife (1.5x25mm blade, flat) | Ambler Surgical | 3401E |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11252-50 |
| Slit lamp | Zeiss | 30 SL-M |
Table 1. Equipments
| Reagent | Company | Catalog# | Comments |
|---|---|---|---|
| bFGF (basic fibroblast growth factor) | PEPROTECH INC. | 100-18B | |
| Sucralfate (Sucrose octasulfate–aluminum complex) | Sigma | S0652 | 10% in PBS |
| poly-HEMA (Poly(2-hydroxyethyl methacrylate)) | Sigma | P3932 | 12% in Ethanol |
Table 2. Reagents and materials
References
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Cite This Article
Tang, Z., Zhang, F., Li, Y., Arjunan, P., Kumar, A., Lee, C., Li, X. A Mouse Model of the Cornea Pocket Assay for Angiogenesis Study. J. Vis. Exp. (54), e3077, doi:10.3791/3077 (2011).