Contraction artère mésentérique et des études de relaxation utilisant myographie fil automatisé
Summary
Une méthode automatisée pour myographie mesures de force dans les artères mésentériques isolées est décrite. Elle emploie un myographe Mulvany-Halpern Auto fil double 510A pour déterminer les réponses à la phényléphrine et le calcium extracellulaire. La méthode permet la détermination constante de réponses isométriques aux agonistes dans les petits vaisseaux de diamètres de 60 – 300 pm, de manière indépendante.
Abstract
Vaisseaux de résistance proximal, comme les artères mésentériques, contribuer sensiblement à la résistance périphérique. Ces petits vaisseaux entre 100-400 um de diamètre en fonction principalement de diriger le flux sanguin vers différents organes en fonction de l'ensemble des besoins du corps. L'artère mésentérique de rat a un diamètre supérieur à 100 um. La technique myographie, d'abord décrit par Mulvay et Halpern 1, était basé sur la méthode proposée par Bevan et Osher 2. La technique fournit des informations sur de petits navires dans des conditions isométriques, où le raccourcissement substantiel de la préparation musculaire est empêchée. Depuis la production de force et de sensibilité des vaisseaux aux différents agonistes dépend de la mesure d'étirement, d'après les tensions actifs longueur relation, il est essentiel de mener des études de contraction isométrique dans des conditions pour empêcher le respect des fils de montage. Fils d'acier inoxydable sont préférables à des fils de tungstène en raison de l'oxydation de ce dernier, ce qui affecte les réponses enregistrées 3. La technique permet la comparaison des agonistes induit des contractions des vaisseaux montés pour obtenir des preuves pour la fonction normale de la lisse vasculaire récepteurs des cellules musculaires.
Nous avons montré dans plusieurs études qui artères mésentériques isolées qui sont contractés avec phenylyephrine détendre lors de l'addition des concentrations cumulées de calcium extracellulaire (Ca 2 + e). Les résultats nous ont amenés à conclure que les nerfs sensoriels périvasculaire, qui expriment les protéines G couplées Ca 2 +-récepteur sensible (RCA), la médiation de cette réponse vasorelaxation. En utilisant une méthode automatisée de fil myographie, nous montrons ici que d'artères mésentériques Wistar, Dahl sensibles au sel (DS) et Dahl résistant au sel (DR) des rats réagissent différemment à Ca 2 + e. Les tissus de rats Wistar ont montré supérieur Ca 2 +-sensibilité, par rapport à ceux de DR et DS. Réduction d'expression CaR dans les artères mésentériques de rats DS est en corrélation avec réduction de Ca 2 + e-relaxation induite par des isolés, pré-contractés artères. Les données suggèrent que la voiture est nécessaire pour la relaxation des artères mésentériques dans ton adrénergique accrue, comme c'est le cas dans l'hypertension, et d'indiquer un défaut inhérent à la voie de signalisation dans CaR animaux Dahl, qui est beaucoup plus sévère dans DS.
La méthode est utile pour déterminer la réactivité vasculaire ex vivo dans les artères de résistance mésentériques et semblables petits vaisseaux sanguins et des comparaisons entre les différents agonistes et / ou antagonistes peuvent être facilement et systématiquement évalués côte à côte 6,7,8.
Protocol
Discussion
L'hypertension est une cause majeure de morbidité cardio-vasculaires, cérébrales et rénales / mortalité. La survenue d'une hypertension est élevé dans la population et sensibles au sel hypertension est particulièrement élevée dans la population vieillissante, et plus répandu chez les Noirs que les Blancs. Ceci est considérée comme étant due à la tendance des noirs à retenir de sodium dans leurs reins 9. La sensibilité au sel est un facteur majeur contribuant à la maladie rénale et e…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Le projet décrit a été soutenu par un nombre Award R01 HL064761, R25 HL059868, 1SC1 HL099139 et P20 MD000175 forme National Institutes of Health. Le contenu est uniquement la responsabilité de leurs auteurs et ne représentent pas nécessairement les vues officielles de l'Institut National de la Santé.
Materials
| Name of equipment/ reagent | Company | Catalogue number | Comments(optional) |
|---|---|---|---|
| Auto Dual Wire Myograph System-510A DMT-USA, Inc. | Atlanta, GA. | 100151 | |
| PowerLab/4SP Data Acquisition System | ADInstruments, Colorado Springs, CO. | ML750 | New models with 4-16 input channels are available. |
| Dell Dimension XPS Gen 4 Computer | Dell | ||
| Stemi SV II (Apo) Dissection Microscope with Ocular | Carl Zeiss International. | ||
| Wistar, Dahl salt-sensitive, Dahl salt-resistant rats | Harlan Sprague Dawley, Indianapolis, IN. | ||
| Rodent chow | Harland Tekland, Madison, WI. | ||
| Phenylephrine | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO. | ||
| Other chemicals | All chemicals used were of the purest grades available commercially. |
References
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