Summary

Упрощенный метод получения ишемической модели ран

Published: May 02, 2012
doi:

Summary

Мы разработали минимально инвазивной техники для создания кролик ишемической модели рана уха путем деления центральных артерий и нервов и черепные пучка сосудисто-нервный. Туннель подкожной то режет все подкожные ткани. Эта процедура вызывает минимальные нарушения кожи и может безопасно использоваться в диабетических животных.

Abstract

Одним из основных препятствий в текущем диабетических исследований рана отсутствия ишемической модель раны, которые можно безопасно использовать в диабетических животных. Лекарства, которые хорошо работают в неишемической раны не может работать в человеческих ран диабетической потому васкулопатия является одним из серьезных факторов, которые препятствуют заживлению этих ран. Мы опубликовали статью в 2007 году, описывает уха кролика ишемической модель раны создана минимально инвазивной хирургической техники. С тех пор мы еще более упростил процедуру для удобства эксплуатации. В одно ухо, три маленьких разреза кожи были сделаны по сосудистой ножки, 1-2 см от основания уха. Центральной артерии лигировали и нарезать вместе с нервом. Весь черепной пучка был сокращен и лигировали, оставив только хвостовой филиал нетронутыми. Окружной тоннель подкожной было сделано через разрезы, сократить подкожную клетчатку, мышцы, нервы и мелкие сосуды. Другой слух был использован в качестве неишемической управления. Четыре раны были сделаны на вентральной стороне ое каждом ухе. Эта техника производит 4 ишемической раны и 4 неишемической ран у одного животного для парных сравнений. После операции, ишемическая ухо было прохладно и синюшная, а также показали снижение движения и отсутствие импульса в ухо артерии. Температура кожи в ухе был ишемический 1-10 ° C ниже, чем на нормальные слух и эта разница сохранялась в течение более одного месяца. Ухо ткани высоких энергий содержанием фосфатов были ниже в ишемический ухо, чем в контрольной уха. Заживление ран раз было больше в ишемизированных ухо, чем в неишемической уху при такой же режим был использован. Техники в настоящее время используется на более чем 80 кроликов, у которых 23 были диабетом (диабет время от 2 недель до 2 лет). Ни один кролик разработаны любые хирургические осложнения, такие как кровотечение, инфекция, или разрыва в коже надрезы. Эта модель имеет много преимуществ, таких как маленькие нарушения кожи, больше ишемии, а также высокий показатель успеха, когда по сравнению со многими другими моделями. Это приблизительнон безопасно использоваться у животных с пониженным сопротивлением, а также может быть изменен, чтобы удовлетворить различные требования тестирования.

Protocol

1. Анатомические основы Уха кролика была излюбленным материалом для исследования ран с начала 20-го века. Ухо подается на три сосудистые пучки (центральная, черепных и хвостовой); центрального пучка является крупнейшим, а сосуды черепа и хвостового пучки различаются …

Discussion

Диабет влияет на 23600000 человек в США, 2,3 и 15-20% из этих пациентов развивается на ногах язв в своей жизни, в 4,5 годовой стоимости лечения более 25 миллиардов долларов. 3,6 Однако даже лучшие доступной лечение достичь только 50% процент исцелений, и это часто временные, 7 с ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Это исследование было частично поддержана грантами NIH 1RO1DK74566 и 1RO1AM52984. Авторы хотели бы поблагодарить г-жа Жаклин Маккарти в RRC за помощь во время операции, Др. Jianpu Ван и Harshini Сароджини за помощь в операции и послеоперационный уход некоторых кроликов, д-р Ван Жун ее гистологической работы, и г-жа Ming Li для ее измерения HPLC высокоэнергетических фосфатов.

Materials

For monitoring during surgery

  1. A heating pad to maintain normal temperature.
  2. A transcutaneous oxygen monitor.
  3. A temperature monitor.

For surgery

  1. A #3 knife with #15 blade.
  2. Two pairs of forceps (one for skin and another for other soft tissues).
  3. 2-3 pairs of small clamps.
  4. One or two pairs of micro scissors (for tissue cutting).
  5. One pair of small scissors (for cutting sutures).
  6. A needle holder.
  7. A few stainless steel punches (for making wounds).

References

  1. Ninomiya, H. The vascular bed in the rabbit ear: microangiography and scanning electron microscopy of vascular corrosion casts. Anat. Histol. Embryol. 29, 301-305 (2000).
  2. Sen, C. K., Gordillo, G. M., Roy, S., Kirsner, R., Lambert, L., Hunt, T. K., Gottrup, F., Gurtner, G. C., Longaker, M. T. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair. 17, 763-771 (2009).
  3. Boulton, A. J., Vileikyte, L., Ragnarson-Tennvall, G., Apelqvist, J. The global burden of diabetic foot disease. Lancet. 366, 1719-1724 (2005).
  4. Edwards, J., Stapley, S. Debridement of diabetic foot ulcers. Cochrane Database Syst. Rev. 1, 1-40 (2010).
  5. Werdin, F., Tennenhaus, M., Schaller, H. E., Rennekampff, H. O. Evidence-based Management Strategies for Treatment of Chronic Wounds. Eplasty. 9, 169-179 (2009).
  6. Wu, Y., Chen, L., Scott, P. G., Tredget, E. E. Mesenchymal stem cells enhance wound healing through differentiation and angiogenesis. Stem Cells. 25, 2648-2659 (2007).
  7. Bennett, J. P., Matthews, R., Faulk, W. P. Treatment of chronic ulceration of the legs with human amnion. Lancet. 1, 1153-1156 (1980).
  8. Gottrup, F., Agren, M. S., Karlsmark, T. Models for use in wound healing research: a survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue. Wound Repair. 8, 83-96 (2000).
  9. Lindblad, W. J. Animal models in wound healing research: do we need more. Wound Repair. 8, 81-82 (2000).
  10. LoGerfo, F. W., Gibbons, G. W. Vascular disease of the lower extremities in diabetes mellitus. Endocrinol. Metab. Clin. North Am. 25, 439-445 (1996).
  11. Gottrup, F. Oxygen, wound healing and the development of infection. Present status. Eur. J. Surg. 168, 260-263 (2002).
  12. Niinikoski, J. The effect of blood and oxygen supply on the biochemistry of repair. , 56-71 (2002).
  13. Schaffer, M., Witte, M., Becker, H. D. Models to study ischemia in chronic wounds. Int. J. Low Extrem. Wounds. 1, 104-111 (2002).
  14. Niinikoski, J., Gottrup, F., Hunt, T. K. The role of oxygen in wound repair. , 165-174 (1991).
  15. Harding, K. G., Morris, H. L., Patel, G. K. Science, medicine and the future: healing chronic wounds. BMJ. 324, 160-163 (2002).
  16. Lindblad, W. J. Editorial: How should one study wound healing. Wound Repair. 14, 515-515 (2007).
  17. Chien, S. Ischemic rabbit ear model created by minimally invasive surgery. Wound Repair Regen. 15, 928-935 (2007).
  18. Joseph, J., Townsend, F. J. The healing of defects in immobile skin in rabbits. Br. J. Surg. 48, 557-564 (1961).
  19. James, G. A., Swogger, E., Wolcott, R., Pulcini, E., Secor, P., Sestrich, J., Costerton, J. W., Stewart, P. S. Biofilms in chronic wounds. Wound Repair Regen. 16, 37-44 (2008).
  20. Niitsuma, J., Yano, H., Togawa, T. Experimental study of decubitus ulcer formation in the rabbit ear lobe. J. Rehabil. Res. Dev. 40, (2003).
  21. Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in pressure ulcer research. J. Spinal Cord Med. 30, 107-116 (2007).
check_url/3341?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Chien, S., Wilhelmi, B. J. A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model. J. Vis. Exp. (63), e3341, doi:10.3791/3341 (2012).

View Video