Summary

En Forenklet teknikk for produksjon av en iskemisk sår modell

Published: May 02, 2012
doi:

Summary

Vi har utviklet en minimalt invasiv teknikk for å skape en kanin iskemisk øret såret modell ved å dele den sentrale arterie og nerve, og kraniale nevrovaskulære bunten. En subkutan tunnel kutter så alle subkutane vev. Denne prosedyren fører til minimal hud avbrudd og kan trygt brukes i diabetiske dyr.

Abstract

En stor hindring i dagens diabetiker såret forskning er en mangel på en iskemisk sår modell som trygt kan brukes i diabetiske dyr. Legemidler som fungerer godt i ikke-iskemiske sår kan ikke fungere i menneskelige diabetiske sår fordi vaskulopati er en viktig faktor som hindrer helbredelse av disse sårene. Vi publiserte en artikkel i 2007 beskriver en kanin øret iskemiske sår modell skapt av en minimal invasiv kirurgisk teknikk. Siden da har vi ytterligere forenklet prosedyre for enklere bruk. På det ene øret, ble tre små huden incisions gjort på de vaskulære pedicles, 1-2 cm fra øret base. Den sentrale arterie ble ligated og kuttet sammen med nerve. Hele kranial bundle ble kuttet og ligated, slik at bare kaudal grenen intakt. En omkrets subkutan tunnel ble gjort gjennom snittene, å kutte subkutane vev, muskler, nerver, og små fartøy. Den andre øret ble brukt som en ikke-iskemisk kontroll. Fire sår ble gjort på ventrale siden of hvert øre. Denne teknikken gir 4 iskemiske sår og 4 ikke-iskemiske sår i en dyr for parede sammenlikninger. Etter operasjonen var iskemisk øret kjølig og cyanotisk, og viste redusert bevegelse og manglende puls i øret arterien. Hudtemperatur av iskemisk øret var 1-10 ° C lavere enn på normale øret og denne forskjellen ble opprettholdt i mer enn én måned. Ear vev høyenergi fosfat innholdet var lavere i iskemisk øret enn kontroll øret. Sårheling ganger var lengre i iskemiske øret enn i ikke-iskemisk øret når samme behandling ble brukt. Teknikken har nå blitt brukt på mer enn 80 kaniner der 23 var diabetiker (diabetes tid spenner fra 2 uker til 2 år). Ingen enkelt kanin har utviklet noen kirurgiske komplikasjoner som blødning, infeksjon, eller brudd i huden snittene. Modellen har mange fordeler, for eksempel lite hud forstyrrelser, lengre iskemisk tid, og høyere suksessrate, sammenlignet med mange andre modeller. Det can trygt brukes i dyr med redusert motstand, og kan også bli modifisert for å møte ulike testkrav.

Protocol

1. Anatomisk Basis Kaninen øret har vært et yndet studie materiale for sårbehandling siden tidlig 20. århundre. Øret leveres med tre vaskulære bunter (sentral, kranial og kaudal), den sentrale bunt er den største, mens fartøy i kranie og kaudale bunter varierer i størrelse. Noen ganger kan kaudal arterien være fraværende. 1 Alle disse skipene er lett gjenkjennelig på dorsal side etter øret er barbert (Fig. 1). På ventrale siden, ikke distale…

Discussion

Diabetes påvirker 23,6 millioner mennesker i USA, 2,3 og 15-20% av disse pasientene utvikler fotsår i sin levetid, 4,5 på en årlig behandling kostnad på mer enn $ 25 milliarder kroner. 3,6 Men selv de beste tilgjengelige behandlinger oppnå bare en 50% healing rate og dette er ofte midlertidig, 7 med tilbakefall priser så høyt som 66% hos diabetikere. 3,6 Når sår oppstår hos diabetespasienter, store komplikasjoner som infeksjon og amputasjon øker dramatis…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Denne studien ble støttet delvis av NIH tilskudd 1RO1DK74566 og 1RO1AM52984. Forfatterne ønsker å takke Ms Jacqueline McCarty i RRC for hennes hjelp under operasjonen, legene. Jianpu Wang og Harshini Sarojini for deres hjelp i kirurgi og postoperativ pleie av noen kaniner, Dr. Rong Wan for henne histologi arbeid, og Ms Ming Li for hennes HPLC målinger av høyenergetiske fosfater.

Materials

For monitoring during surgery

  1. A heating pad to maintain normal temperature.
  2. A transcutaneous oxygen monitor.
  3. A temperature monitor.

For surgery

  1. A #3 knife with #15 blade.
  2. Two pairs of forceps (one for skin and another for other soft tissues).
  3. 2-3 pairs of small clamps.
  4. One or two pairs of micro scissors (for tissue cutting).
  5. One pair of small scissors (for cutting sutures).
  6. A needle holder.
  7. A few stainless steel punches (for making wounds).

References

  1. Ninomiya, H. The vascular bed in the rabbit ear: microangiography and scanning electron microscopy of vascular corrosion casts. Anat. Histol. Embryol. 29, 301-305 (2000).
  2. Sen, C. K., Gordillo, G. M., Roy, S., Kirsner, R., Lambert, L., Hunt, T. K., Gottrup, F., Gurtner, G. C., Longaker, M. T. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair. 17, 763-771 (2009).
  3. Boulton, A. J., Vileikyte, L., Ragnarson-Tennvall, G., Apelqvist, J. The global burden of diabetic foot disease. Lancet. 366, 1719-1724 (2005).
  4. Edwards, J., Stapley, S. Debridement of diabetic foot ulcers. Cochrane Database Syst. Rev. 1, 1-40 (2010).
  5. Werdin, F., Tennenhaus, M., Schaller, H. E., Rennekampff, H. O. Evidence-based Management Strategies for Treatment of Chronic Wounds. Eplasty. 9, 169-179 (2009).
  6. Wu, Y., Chen, L., Scott, P. G., Tredget, E. E. Mesenchymal stem cells enhance wound healing through differentiation and angiogenesis. Stem Cells. 25, 2648-2659 (2007).
  7. Bennett, J. P., Matthews, R., Faulk, W. P. Treatment of chronic ulceration of the legs with human amnion. Lancet. 1, 1153-1156 (1980).
  8. Gottrup, F., Agren, M. S., Karlsmark, T. Models for use in wound healing research: a survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue. Wound Repair. 8, 83-96 (2000).
  9. Lindblad, W. J. Animal models in wound healing research: do we need more. Wound Repair. 8, 81-82 (2000).
  10. LoGerfo, F. W., Gibbons, G. W. Vascular disease of the lower extremities in diabetes mellitus. Endocrinol. Metab. Clin. North Am. 25, 439-445 (1996).
  11. Gottrup, F. Oxygen, wound healing and the development of infection. Present status. Eur. J. Surg. 168, 260-263 (2002).
  12. Niinikoski, J. The effect of blood and oxygen supply on the biochemistry of repair. , 56-71 (2002).
  13. Schaffer, M., Witte, M., Becker, H. D. Models to study ischemia in chronic wounds. Int. J. Low Extrem. Wounds. 1, 104-111 (2002).
  14. Niinikoski, J., Gottrup, F., Hunt, T. K. The role of oxygen in wound repair. , 165-174 (1991).
  15. Harding, K. G., Morris, H. L., Patel, G. K. Science, medicine and the future: healing chronic wounds. BMJ. 324, 160-163 (2002).
  16. Lindblad, W. J. Editorial: How should one study wound healing. Wound Repair. 14, 515-515 (2007).
  17. Chien, S. Ischemic rabbit ear model created by minimally invasive surgery. Wound Repair Regen. 15, 928-935 (2007).
  18. Joseph, J., Townsend, F. J. The healing of defects in immobile skin in rabbits. Br. J. Surg. 48, 557-564 (1961).
  19. James, G. A., Swogger, E., Wolcott, R., Pulcini, E., Secor, P., Sestrich, J., Costerton, J. W., Stewart, P. S. Biofilms in chronic wounds. Wound Repair Regen. 16, 37-44 (2008).
  20. Niitsuma, J., Yano, H., Togawa, T. Experimental study of decubitus ulcer formation in the rabbit ear lobe. J. Rehabil. Res. Dev. 40, (2003).
  21. Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in pressure ulcer research. J. Spinal Cord Med. 30, 107-116 (2007).
check_url/3341?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Chien, S., Wilhelmi, B. J. A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model. J. Vis. Exp. (63), e3341, doi:10.3791/3341 (2012).

View Video