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Medicine

자궁의 자동 이식하여 수술 유발 Endometriosis의 마우스 모델

Published: January 06, 2012
doi:
10.3791/3396
, ,
1Obstetrics, Gynecology and Women’s Health and Division of Biological Sciences,University of Missouri, 2Obstetrics, Gynecology and Women’s Health and Animal Sciences,University of Missouri

Summary

장 장간막의 동맥 계단식으로 자궁 조직의 자동 이식에 의한 마우스 및 쥐에 endometriosis의 수술 유도의 설명입니다.

Abstract

Endometriosis 누구의 병인 알려지지 않은 남아 만성, 고통스러운 질병입니다. 또한, endometriosis의 치료 복강경 병변의 제거, 및 / 또는 통증과 불임 현상 만성 제약 관리를 요구할 수 있습니다. endometriosis와 관련된 비용은 미국 1 연간 22,000,000,000 달러로 추산되었습니다. 이 수수께끼의 질병을 기본 메커니즘에 대한 우리의 이해를 더하기 위해 동물 모델은 고용되었습니다. 영장류는 자발적으로 endometriosis를 개발하기 때문에 영장류 모델은 가장 밀접하게 여성 질환과 유사. 설치류 모델은, 그러나, 효과적인 비용과 2 쉽게 사용할 수 있습니다. 우리가 여기서 설명하는 모델은 장의 장간막 (그림 1) 자궁 조직의 autologous 전송을 포함하고 먼저 쥐 3 개발하고 나중에 마우스 4 전송되었습니다. 수술 유도 endometriosis의 autologous 설치류 모델의 목적은 모방하는 것입니다여성의 질병. 우리와 다른 이전에 변경 유전자 발현 패턴이 마우스 또는 질병 5,6있는 여성에서 관찰 쥐의 미러에서 endometriotic 병변에서 관찰하는 것으로 나타났습니다. 마우스에서 수술을 집도할 중 하나 장점은 가능한 유전자 변형 마우스 종자의 풍부한은 설치 및 endometriosis의 성장에 중요한 특정 구성 요소의 역할을 결정하는 연구자 도움 수있다는 것입니다. excised 인간 자궁 내막 조각이 immunocompromised 생쥐의 복막을 소개하는 대안 모델도 널리 사용되고 있지만 endometriosis 2,7에서 중요한 것으로 생각되는 정상적인 면역 체계의 부족에 의해 제한됩니다. 중요한 것은 수술 유도 endometriosis의 마우스 모델은 면역 체계 8, 9,10 호르몬과 환경 요인 11,12가 fert에 endometriosis뿐만 아니라 endometriosis의 효과에 미치는 영향 연구하는 데 사용되었습니다 다재 다능한 모델입니다ility 13 고통 14.

Protocol

1. 라이브 – 동물 수술 계획 적절한 승인이 실험실 동물에서 작동하도록 수신되었는지 확인하십시오. 주문 마우스 및 새로운 환경에 acclimation 중 하나 이상 주 수 있습니다. 남성 페로몬에 노출의 부재에 보관되어 여성 쥐가 자전거를 막을 수 현상이 Whitten 효과 15,16이라고도합니다. 쥐 자전거 전송 소변 – 절어 남성 침구 여성 케이지마다 오일 유지합니다. 또한, 오픈…

Discussion

생쥐에서 endometriosis의 수술 유도를 수행하는 동안 주목한다 몇 가지 중요한 매개 변수가 있습니다. 첫째, endometriosis는 에스 트로겐에 의존 질병 등이 수술로 손상 동물이나 또는 estrogens에 20 보충 ovariectomized 동물 수행해야합니다. 둘째, 동맥 폭포로 자궁 biopsies를 suturing 것은 극도의주의 수행해야합니다. 우리는 하나 두 비교적 느슨한 매듭을 사용하면 변의와 후속 조직 괴사 및 동물 죽음…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

최적화에서 지원 크리스 Kassotis이 원고의 중요한 검토 오드리 베일리와 박사 스콧 Korte, 요셉 Beeman, 앨리슨 Curfman, 폴 Kimball, 브리짓 Neibreggue, 야곱 Redel, 에이미 Schroder, Maija 스테인 버그, 그리고 스테이시 Winkeler 특별 감사 우리 연구실이 모델. 자금은 임상 Biodetectives 교육 그랜트 (NIH T90) (KEP), 미주리 생명 과학 대학 학부 연구 기회 프로그램, MU 연구위원회, 연구위원회 MU 부여와 NIH R21HD056441 (SCN)에 의해 제공되었다.

Materials

Name of the reagent/equipment Company Catalogue number
Wax pencil Fisher NC9954135
Glass slide Fisher 12-550-433
Eyedropper Fisher S79383
Standard light microscope for evaluating vaginal cytology smears    
Buprenorphine HCL c3 (CARJET) 10X1ml Butler Animal Health Supply 022891
Sterile phosphate buffered saline (PBS) Gibco 14040-117
10,000U/ml Penicillin, 10,000μg/ml Streptomycin in 0.85% NaCl Hyclone SV30010
Isoflurane Abbott Animal Health 05260-05
Isoflurane non-rebreathing anesthetic system    
Recirculating hot water heating pad    
30 ml syringe sheath Fisher 14-823-16G
Powder free sterile gloves Fisherbrand 19020558
Ophthalmic ointment Major Pharmaceuticals 10033691
Small electrical clippers Wahl 9861-600
Chlorhexidine scrub Fisher NC9863042
70% Ethanol    
Polylined sterile field Busse Hospital Disposables 696
Size 3 scalpel Fisher 22-079-657
Number 10 scalpel blades Fisher 22-079-681
Small surgical scissors Roboz RS-5850
Small serrated semi-curved forceps Roboz RS-5135
5-0 black braided silk suture Ethicon K870H
Sterilized pyrex glass Petri dishes Corning 70160-101
2 mm biopsy punch Miltex 33-31
Sterile gauze Kendall 1806
6-0 black monofilament ethilon nylon suture Ethicon 697G
Needle drivers (optional) World Precision Instruments 500023
5-0 undyed braided coated vicryl suture Ethicon J490G
9mm Autoclip wound clips Becton Dickinson 427631
Autoclip applier & remover Becton Dickinson 427630
23G needle Becton Dickinson 305193
1cc syringe Becton Dickson 301025
5X magnifying glass stand (optional) Fisher 14-648-23
10% Buffered formalin Fisher SF100-4
Calipers Roboz RS-6466
Processing/embedding cassettes Fisher 15-197-700A
Biopsy foam pads Fisher 22-038-222
RNAqueous RNA isolation kit Ambion AM1912
Liquid nitrogen    
Snap cap microcentrifuge flat top tube Fisher 02-681-240
Ketamine (optional) Simga K4138
Domitor (medetomidine hydrochloride) (optional) Tocris 2023
Antisedan (atipamezole) (optional) Sigma A9611

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References

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Pelch, K. E., Sharpe-Timms, K. L., Nagel, S. C. Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue. J. Vis. Exp. (59), e3396, doi:10.3791/3396 (2012).
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