Präsynaptische Dynamics in striatalen Hirnschnitten mit Fast-Scan-Cyclovoltammetrie
Summary
Mit Fast-Scan-Cyclovoltammetrie zu elektrisch evozierten präsynaptischen Dopamin-Dynamik in striatalen Hirnschnitten zu messen.
Abstract
Umfangreiche Forschung hat sich auf den Neurotransmitter Dopamin wegen ihrer Bedeutung in der Wirkmechanismus von Drogen (zB Kokain und Amphetamin), seine Rolle in psychiatrischen Erkrankungen (zB Schizophrenie und Aufmerksamkeits-Defizit-Syndrom mit Hyperaktivität), und seine Einbindung in degenerative konzentriert Erkrankungen wie Parkinson und Chorea Huntington. Unter normalen physiologischen Bedingungen wird Dopamin bekannt, Bewegungsaktivität, Kognition, Lernen, emotionale Auswirkungen, und neuroendokrinen Sekretion regulieren. Eines der größten Dichten von Dopamin-Neuronen innerhalb des Striatum, die in zwei unterschiedlichen neuroanatomischen Regionen wie der Nucleus accumbens und die caudate-Putamen bekannt aufgeteilt werden kann. Ziel ist es, ein allgemeines Protokoll für Stück Fast-Scan-Cyclovoltammetrie (FSCV) in der Maus Striatum zu illustrieren. FSCV ist eine gut definierte elektrochemische Technik bietet die Möglichkeit, die Freisetzung von Dopamin und Aufnahme zu messen und in Echtzeit in discrete Hirnregionen. Kohlefaser Mikroelektroden (Durchmesser von ca. 7 um) sind in FSCV zur Dopamin-Oxidation zu erkennen. Die analytische Vorteil der Verwendung FSCV zu Dopamin zu erkennen ist die erweiterte zeitliche Auflösung von 100 Millisekunden und räumlichen Auflösung von weniger als zehn Mikrometer, das ergänzende Informationen zur In-vivo-Mikrodialyse.
Protocol
Discussion
Das Protokoll hier vorgestellten demonstriert, wie die Vorbereitung und Verwendung der Maus koronalen Hirnschnitten für FSCV Experimente. 11 – Diese Methode ist zwar spezifisch für den Erhalt und die Messung Dopamin Dynamik, andere Neurotransmitter wie Adenosin, haben Wasserstoffperoxid, Noradrenalin und Serotonin in vivo oder in vitro mit FSCV 3, 8 überwacht. FSCV können verwendet werden, um einige dieser anderen neurochemicals durch einfache Modifikationen der Wellenform ang…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Die Förderung des National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism (NIAAA; AA-016967 und AA016967-01S1; TAM), Start der Wayne State University von Fonds und der Wayne State University Research Grant Program. Der Inhalt ist ausschließlich in der Verantwortung der Autoren und repräsentieren nicht die offiziellen Ansichten der NIAAA oder den National Institutes of Health.
Materials
| Name | Company | CAS number |
Reagent |
||
Potassium Chloride |
Fisher | 7447407 |
Sodium chloride |
EMD Chemicals | 7647145 |
Magnesium chloride |
Fisher |
7791186 |
Calcium chloride |
Fisher |
10035048 |
Sodium bicarbonate |
EMD Chemicals |
144558 |
Sodium phosphate,Dibasic |
EMD Chemicals |
7558794 |
D-glucose |
Fisher |
50997 |
Ascorbic acid |
Fisher |
50817 |
Sucrose |
Fisher |
57501 |
|
|
|
Materials |
Vendor |
Catalogue number |
Carbon fiber |
Goodfellow Oakdale, PA | |
Glass capillary |
A-M Systems Carlsborg WA. | 602000 |
Silver wire |
A-M Systems Carlsborg WA. | 787000 |
Tungsten stimulating electrode |
Plastics One, Roanoke, VA | |
Platinum wire |
||
Lead wire |
Squires Electronics, Cornelius, OR | |
Loctite 404 instant adhesive |
Hankal Corp. Rocky Hill CT. |
|
Razor blade |
World precision Instruments Inc. FL. | |
BD Spinal needle |
BD Medical systems, Franlin Lake, NJ |
REF 405234 |
Surgical Blade |
Feather Safety razor Co. LTD. Japan | |
|
||
Software |
Vendor |
Catalogue number |
TH software |
ESA Inc.,Chelmsford, MA | |
Instrument |
Vendor |
Catalogue number |
Submersion recording chamber |
Custom Scientific, Denver, CO | |
Neorolog stimulus isolator |
Digitmeter, Hertfordshire, England | |
Automatic temperature controller |
Warner Instrument Corporation | |
Microscope (SZX7) |
Olympus | |
Microscope |
Fisher | |
Vibratome 3000 sectioning system |
St. Louis , MO. | |
Perfusion pump |
Watson Marlow Limited, Falmouth Cornwall – England | H110708 |
Micropipette puller |
Narishige, Tokyo, Japan | |
ChemClamp potentiostat |
Dagan Corporations, Minneapolis, MN. |
References
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