Klinisk Test og fjernelse af rygmarv i en musemodel for Amyotrofisk Lateral Sclerose (ALS)
Summary
En musemodel for amyotrofisk lateral sklerose (ALS) undersøges klinisk og adfærdsmæssigt. Som en forudsætning for en ledsagende immunhistologisk analyse udarbejdelsen af rygmarven er afbildet i detaljer.
Abstract
Amyotrofisk lateral sklerose (ALS) er en fatal neurodegenerativ lidelse resulterer i progressiv degeneration af motoneuroner. Peak debut er omkring 60 år for sporadisk sygdom og omkring 50 år for familiær sygdommen. På grund af sin progressivt forløb, 50% af patienterne dør inden for 30 måneder fra symptomdebut. For at evaluere hidtil ukendte behandlingsmuligheder for denne sygdom, har genetiske musemodeller for ALS er genereret ud fra human familiær mutationer i SOD-genet, såsom SOD1 (G93A) mutation. De fleste vigtige aspekter, der skal evalueres i modellen er samlet overlevelse, kliniske forløb og motorisk funktion. Her vil vi demonstrere den kliniske evaluering, viser ledning af to adfærdsmæssige motoriske tests og give kvantitative pointsystemer for alle parametre. Fordi en dybtgående analyse af ALS musemodel normalt kræver en immunhistokemisk undersøgelse af rygmarven, vi demonstrere sin forberedelse i detaljer anvende gøreRsaI laminektomi metode. Eksempler på histologiske fund er påvist. Den omfattende anvendelse af de afbildede eksamen metoder i undersøgelser af musemodel af ALS vil gøre det muligt for forskeren at pålideligt teste fremtidige terapeutiske muligheder, der kan danne grundlag for senere humane kliniske forsøg.
Protocol
Discussion
Den SOD1 (G93A) genetisk musemodellen er et værdifuldt dyremodel til undersøgelse af sygdommens forløb fremadskridende motoneuron tab sammenlignes med human amyotrofisk lateral sklerose 8. En række forskellige behandlingsgrupper paradigmer er blevet evalueret i denne model og udgør grundlaget for senere teste i humane kliniske undersøgelser 8-10. For at være i stand til at detektere signifikante forskelle i en eksperimentel behandling undersøgelse i disse mus, er det yderst vigtigt at indbe…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
LT har modtaget tilskud fra den Forschungsförderungsprogramm af universitetet Medicine Göttingen. PL og MB blev støttet af DFG Research Center for Molekylær Fysiologi af hjernen (CMPB), Göttingen. Forfatterne takker Dr. Lars Tatenhorst for hjælp med videography og Birgit Liebau om hjælp med lyd og video redigering.
Materials
| Manufacturer | Ordering Information | |
| Behavioral testing | ||
| Rota-Rod for Mice | Ugo Basile, Comerio, Italy | # 47600 |
| Hanging wire device | Custom-made | |
| Spinal Cord Preparation | ||
| Operation Table Operation lamp Protective gloves |
||
| “Iris” Scissors, angled to side | Fine Science Tools, Heidelberg, Germany | 14063-09 |
| Cohan-Vannas Spring Scissors, straight | Fine Science Tools, Heidelberg, Germany | 15000-10 |
| Micro forceps | Hammacher, Solingen, Germany | HWC 111-10 |
| Scalpel “präzisa plus” | Dahlhausen, Köln, Germany | 11.000.00.510, FIG 10 |
References
- Gurney, M. E. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu, Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
- Weydt, P. Assessing disease onset and progression in the SOD1 mouse model of ALS. Neuroreport. 14 (7), 1051-1054 (2003).
- Crawley, J. N. Behavioral phenotyping strategies for mutant mice. Neuron. 57 (6), 809-818 (2008).
- Miana-Mena, F. J. Optimal methods to characterize the G93A mouse model of ALS. Amyotroph. Lateral Scler. Other Motor Neuron Disord. 6 (1), 55-62 (2005).
- Zhong, Z. Activated protein C therapy slows ALS-like disease in mice by transcriptionally inhibiting SOD1 in motor neurons and microglia cells. J. Clin. Invest. 119 (11), 3437-3449 (2009).
- Pitzer, C. Granulocyte-colony stimulating factor improves outcome in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Brain. 131 (Pt. 12), 3335-3347 (2008).
- Gowing, G. Ablation of proliferating microglia does not affect motor neuron degeneration in amyotrophic lateral sclerosis caused by mutant superoxide dismutase. J. Neurosci. 28 (41), 10234-10244 (2008).
- Scott, S. interpretation of studies in the standard murine model of ALS. Amyotroph Lateral Scler. 9 (1), 4-15 (2008).
- Turner, B. J., Talbot, K. Transgenics, toxicity and therapeutics in rodent models of mutant SOD1-mediated familial ALS. Prog Neurobiol. 85 (1), 94-134 (2008).
- Corse, A. M. Preclinical testing of neuroprotective neurotrophic factors in a model of chronic motor neuron degeneration. Neurobiol Dis. 6 (5), 335-346 (1999).
- Knippenberg, S. Significance of behavioural tests in a transgenic mouse model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). Behav Brain Res. 213 (1), 82-87 (2010).
- Burgess, R. W., Cox, G. A., Seburn, K. L. Neuromuscular disease models and analysis. Methods Mol. Biol. 602, 347-393 (2010).
- Hayworth, C. R., Gonzalez-Lima, F. Pre-symptomatic detection of chronic motor deficits and genotype prediction in congenic B6.SOD1(G93A) ALS mouse model. Neuroscience. 164 (3), 975-985 (2009).
- Ludolph, A. C. Guidelines for preclinical animal research in ALS/MND: A consensus meeting. Amyotroph Lateral Scler. 11 (1-2), 38-45 (2010).
- Boillee, S. Onset and progression in inherited ALS determined by motor neurons and microglia. Science. 5778 (3), 1389-1392 (2006).
