Testes clínicos e Remoção da Medula Espinhal em um modelo do rato para a Esclerose Lateral Amiotrófica (ELA)

Summary

Um modelo do rato para a esclerose lateral amiotrófica (ELA) é examinado clinicamente e comportamentalmente. Como um pré-requisito para uma análise imuno acompanha a preparação da medula espinal é descrito em detalhe.

Abstract

Esclerose lateral amiotrófica (ELA) é uma desordem neurodegenerativa fatal resultando em degeneração progressiva dos motoneurónios. Pico de início é em torno de 60 anos para a doença esporádica e em torno de 50 anos para a doença familiar. Devido ao seu curso progressivo, 50% dos pacientes morrem dentro de 30 meses de início dos sintomas. A fim de avaliar as opções de novo tratamento para esta doença, os modelos murinos genéticos de ALS foram gerados com base em humanos mutações da família no gene SOD, tais como a mutação SOD1 (G93A). Aspectos mais importantes que têm de ser avaliados no modelo são em geral curso de sobrevivência, clínica e da função motora. Aqui, demonstramos a avaliação clínica, mostram a realização de dois testes motores comportamentais e fornecer sistemas de pontuação para todos os parâmetros quantitativos. Porque uma análise em profundidade do modelo de mouse ALS normalmente exige um exame imunohistoquímico da medula espinhal, que demonstram a sua preparação em detalhe a aplicação do fazermétodo laminectomia Rsal. Exemplares achados histológicos são demonstrados. A aplicação integral dos métodos de exame descritas em estudos sobre o modelo do rato de ALS permitirá ao pesquisador confiável testar futuras opções terapêuticas que podem fornecer uma base para mais tarde ensaios clínicos humanos.

Protocol

Os animais foram adquiridos a Jackson Laboratory (# 002,726) 1. Eles são clinicamente marcados e submetidos a um teste de função motora (rotarod teste) e da força muscular (pendurado teste do fio). Todos estes ensaios ea morte dos animais mais tarde, a fim de preparar a medula espinal foram realizados em conformidade muito perto das orientações locais para a conduta apropriada de experiências com animais. 1. Pontuação clínica Para além da aval…

Discussion

A SOD1 (G93A) modelo do rato genético é um valioso modelo animal para estudar o curso da doença de perda progressiva dos motoneurônios comparável à esclerose amiotrófica lateral, humano ^8. Uma variedade de paradigmas de tratamento diferentes foram avaliados neste modelo e representam uma base para posterior teste em humanos ^8-10 estudos clínicos. A fim de ser capaz de detectar diferenças significativas em um estudo de tratamento experimental nestes ratinhos, é de importância primordial p…

Materials

	Manufacturer	Ordering Information
Behavioral testing
Rota-Rod for Mice	Ugo Basile, Comerio, Italy	# 47600
Hanging wire device	Custom-made
Spinal Cord Preparation
Operation Table Operation lamp Protective gloves
“Iris” Scissors, angled to side	Fine Science Tools, Heidelberg, Germany	14063-09
Cohan-Vannas Spring Scissors, straight	Fine Science Tools, Heidelberg, Germany	15000-10
Micro forceps	Hammacher, Solingen, Germany	HWC 111-10
Scalpel “präzisa plus”	Dahlhausen, Köln, Germany	11.000.00.510, FIG 10