可植入大脑中闭塞小鼠模型中,本文提出的。脑梗塞的程度进行评估,神经行为学评分和甲酚紫染色,染色,TTC替代,提供了巨大的优势,以测试在并行的兴趣标记。
中风是第三大死亡原因和在世界上的残疾的首要原因。缺血性中风占所有中风的约80%。然而,溶栓组织型纤溶酶原激活剂(tPA)治疗急性缺血性中风的存在是唯一的。这使研究人员开发了几个缺血性中风模型,在不同的物种。两种主要类型的啮齿类动物模型已经开发全脑缺血或局灶性脑缺血模型。为了模拟缺血性中风的患者中,约80%的人在血栓形成或栓塞性中风发生在大脑中动脉(MCA),管腔内的大脑中动脉闭塞(MCAO)模型是非常相关的中风研究的领土。此模型的大鼠Koizumi 等人首先开发于1986年1。由于在小鼠体内的遗传操作的容易性,这些模型也被开发在这一物种2-3。
内容“>在这里,我们提出在C57/BL6小鼠大脑中动脉闭塞的瞬态过程。以前的研究报告的封堵器的物理特性,如齿顶圆直径,长度,形状和灵活性是至关重要的重现性梗死体积的4。这里,一个商业硅涂覆的单丝(Doccol公司)已被使用。另一个很大的优点是,这种单丝诱导蛛网膜下腔出血的风险降低。使用蔡司立体显微镜STEMI 2000,硅涂布的单丝导入颈内动脉(ICA)的外颈动脉(ECA),直到单丝通过一个切割阻塞MCA的基础上恢复血流量,1小时后除去的单丝,以模仿裂解后的血栓栓塞血块中的血流恢复人类。脑梗塞的程度,可以首先计算由神经系统的得分和所测量的梗死体积。因此,分析他们的神经行为学评分在再灌注后不同时间缺血小鼠。为了评估梗死体积,2,3,5 – 氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,通常执行。在此,我们用甲酚紫染色,因为它提供了一个机会来测试许多重要的标志物免疫组化。在这段视频中,我们报道了MCAO程序;神经甲酚紫染色的梗死体积分数和评价。不同的行程模型已经发展到模仿患者中风的后果。中风模型的选择取决于对生物的问题。管腔内的MCAO模型模仿患者缺血性脑卒中的最常见的类型之一是微创和更一致的比田村模型4,7。这是一个非常有趣的神经保护作用,neurorepair和细胞死亡的分析模型。腔内模型的成功取决于许多因素,如动物的性别,年龄和体重,温度,麻醉和手术的时间,以进行控制的。封堵器(尖端直径,长度,形状和fexibility)的物理礼模型4的一致性的关键。在此,我们使用12毫米长的6-0单丝上涂有硅Doccol公司从9-10毫米。这种单丝的巨大优势是减少蛛网膜下腔出血,因为它的长度覆盖了所有的ICA长,残留的血流量,其中来自威利斯和PPA圈的前,后交通动脉,防止梗死体积减小的变化(在我们手中15%的变异)。 CCA的缝合线也降低了变异的心肌梗死卷9。
可以通过不同的方式评估脑损伤的程度tMCAO。如前面提到的,可以测量神经功能缺损。然而,这是难以通过这种方式,有一个有效的措施。 TTC染色程度的心肌梗死是常见的表现。最近,磁共振技术也用于神经保护治疗的一个特别有趣的技术。要了解参与行程,如neurorepair,细胞死亡或细胞增殖的细胞机制的基础,不同的标志物免疫组化的研究是至关重要的,内容非常丰富。因此,我们的协议传输醇的脑切片的准备工作,让这些分析具有很大的优势,并最大限度地减少了所用的小鼠。此外,Tureyen 等 10报道,有良好的相关性,间甲酚紫染色法和TTC。
The authors have nothing to disclose.
这项研究是由82946一个CIHR队授予#CTP,CIHR授予的#MOP 102741,以及一个加拿大的椅子#216684和施特劳斯基金会的支持。 ER得到了从加拿大心脏及中风基金会的奖学金。
Description | Company | Catalogue number |
Stereo microscope | Zeiss | Stemi 2000 |
Fiber-Light High Intensity Illuminator | Dolan-Jenner Industries Inc. | |
Anesthesia system for isoflurane | ||
Isoflurane | CDMV | 108737 |
Heating blanket | Gaymar Medsearch | TP22G |
Infrared heating lamp | ||
Ultra fine tweezers, style 5 | Electron Microscopy Sciences | 78320-5TI |
Vannas Scissors 3 mm Cutting Edge, Straight | Electron Microscopy Sciences | 72932-01 |
Style LA-1 and MPF-1 All smooth blades | Electron Microscopy Sciences | 77926-5S |
Negative action tweezers, style KOPINC 5 | Electron Microscopy Sciences | 72850-F |
Dissecting scissors 5 1/2″ Straight | Cedarlane | 72960 |
Autoclip starter set | Harvard apparatus | 34-0557 |
BD Autoclip Wound Closing Syst., 9mm long,100/pk | Fisher | 01-804-5 |
5-0 suture | Harvard apparatus | 517763 |
Suture material PDS II monofilament violet, 5-0, RB-1; Z303H | CDMV | 6167 |
12 mm-long 6-0 silicon-coated monofilament suture | Doccol Corporation | 60SPRePK5 |
Seringes 1ml | Fisher | 14-823-2F |
Needles 26G1/2 | Fisher | BD-305111 |
C57BL/6 mice | IRCM |