Modelado Hemorragia intracerebral en ratones: La inyección de sangre autóloga o colagenasa bacteriana

Summary

Modelos animales clínicamente relevante de hemorragia intracerebral (HIC) son necesarios para profundizar en el conocimiento de accidente cerebrovascular hemorrágico y examinar nuevas estrategias terapéuticas. En este estudio, se describe y evaluar dos modelos que implementan ICH inyecciones unilaterales de sangre autóloga o bien total o colagenasa bacteriana en los ganglios basales (corpus striatum) de ratones.

Abstract

Hemorragia intracerebral espontánea (ICH) define una enfermedad potencialmente mortal neurológico que representa el 10-15% de todas las hospitalizaciones relacionadas con la carrera y para los cuales no hay tratamientos efectivos disponibles hasta la fecha ^1,2. Debido a la heterogeneidad de la HIC en los seres humanos, diferentes modelos preclínicos son necesarios para explorar a fondo posibles estrategias terapéuticas ^3. ICH Experimental es comúnmente inducida en los roedores mediante inyección intraparenquimatosa de cualquiera de sangre autóloga o colagenasa bacteriana ^4. El modelo apropiado se selecciona basándose en la fisiopatología de la inducción y progresión de la lesión hemorragia. El modelo de inyección de sangre imita una hemorragia rápidamente progresivo. Alternativamente, colagenasa bacteriana enzimáticamente interrumpe la lámina basal de los capilares del cerebro, causando una hemorragia activos que generalmente se desarrolla durante varias horas ^5. Edema resultante perihematoma y déficits neurofuncionales se puede cuantificar vaivénm ambos modelos. En este estudio, hemos descrito y evaluado un modelo modificado de doble inyección de sangre autóloga conjunto ^6, así como un modelo de inyección de ICH de colagenasa bacteriana ^7, ambos de los cuales objetivo de los ganglios basales (corpus striatum) de machos CD-1 ratones. Se evaluaron los déficits neurofuncionales y edema cerebral a las 24 y 72 horas después de la inducción de ICH. Inyección intraestriatal de sangre autóloga (30 l) o colagenasa bacteriana (0.075U) causada reproducibles déficit neurofuncionales en ratones y edema cerebral aumentado significativamente a las 24 y 72 h después de la cirugía (p <0,05). En conclusión, tanto los modelos de rendimiento consistentes infartos hemorrágicos y representan métodos básicos para la investigación preclínica ICH.

Protocol

Todos los procedimientos se realizaron de acuerdo con la Guía del NIH para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio y aprobados por el Cuidado de Animales y el empleo Comisión de Loma Linda University. 1. Preparación prequirúrgica Técnicas asépticas se recomiendan para todos los procedimientos quirúrgicos. Desinfecte el aparato estereotáxico y preparar instrumentos quirúrgicos estériles antes de la cirugía. Use el equipo de protección person…

Discussion

Los modelos animales de hemorragia intracerebral (ICH), contribuyen en gran medida a una comprensión avanzada de la fisiopatología de la enfermedad, y se utilizan para desarrollar y evaluar nuevas estrategias terapéuticas en un ambiente preclínica. Intraparenquimatosa inyecciones de sangre autóloga o colagenasa bacteriana son métodos bien establecidos para generar ICH en los roedores. Ambos métodos se desarrollaron inicialmente en la rata, sin embargo, debido a la disponibilidad creciente de cepas transgénicas y…

Materials

Material	Company	Catalogue Number	Comment
Stereotactic Head Frame	Stoelting Co.	51600
Nanomite Syringe Pump	Harvard Apparatus	PY2 70-2217
Hamilton Syringe	Hamilton Company	1725RN (250 μl) 1701 RN (10 μl)	26 Gauge needle for 250 μl and 10 μl syringes.
Microdrill	Fine Science Tools	18000-17
Microdrill burr	Fine Science Tools	19007-09	0.9 mm diameter
Collagenase Type VII-S	Sigma-Aldrich	C2399
Microhematocrit Capillary Tubes	Fisher Scientific	22-362-574	unheparinized
Bone Wax	Ethicon	W31
Suture	Ethicon	1676G
Ketamine	JHP Pharmaceuticals	42023-115-10	Ketalar
Xylazine	LLOYD Laboratories	139-236	AnaSed