संवहनी रोग के अध्ययन के लिए चूहों में orthotopic महाधमनी ट्रांसप्लांटेशन
Summary
हम एक तकनीक है जिसमें एक माउस से उदर महाधमनी के एक अनुभाग orthotopically एक allogeneic या syngeneic प्राप्तकर्ता में गुर्दे धमनियों के नीचे प्रत्यारोपित है का वर्णन करता है. इस तकनीक के अध्ययन में जो समान आकार के बड़े धमनियों का प्रत्यारोपण फायदेमंद समझा जाता है में उपयोगी हो सकता है.
Abstract
संवहनी माउस में anastomoses शामिल प्रक्रिया आम तौर पर कठिन और बेहद व्यक्तिगत सर्जन के कौशल पर निर्भर माना जाता है. यह काफी हद तक सच है, लेकिन वहाँ महत्वपूर्ण सिद्धांतों की एक संख्या है कि इन प्रक्रियाओं की कठिनाई को कम करने और reproducibility में वृद्धि कर सकते हैं कर रहे हैं. Orthotopic महाधमनी प्रत्यारोपण एक उत्कृष्ट प्रक्रिया है जिसमें इन सिद्धांतों को जानने के लिए है क्योंकि यह केवल दो अंत करने के लिए अंत anastomoses शामिल है, लेकिन अच्छा suturing और लगातार सफलता के लिए जहाजों के हैंडलिंग तकनीक की आवश्यकता है. इस प्रक्रिया में एक दाता जानवर से उदर महाधमनी की लंबाई, प्राप्तकर्ता में देशी महाधमनी के विभाजन के बाद की खरीद के साथ शुरू होता है. की खरीद महाधमनी तो प्राप्तकर्ता महाधमनी के विभाजित सिरों के बीच रखा जाता है और अंत करने के लिए अंत anastomoses का उपयोग जगह में sutured. इस उद्देश्य को पूरा करने के लिए सफलतापूर्वक एकाग्रता की एक उच्च डिग्री, अच्छे उपकरण, एक स्थिर हाथ, और की सराहना की आवश्यकता कितनी आसानी सेएक माउस के vasculature क्षतिग्रस्त हो सकता है घनास्त्रता में जिसके परिणामस्वरूप. इन महत्वपूर्ण सिद्धांतों सीखना है क्या शुरुआत के समय की सबसे रह रहे हैं जब छोटे कृन्तकों में microsurgery सीखने. इस प्रोटोकॉल के दौरान, हम इन महत्वपूर्ण बिंदुओं को देखें. इस मॉडल को अलग प्रयोगात्मक 1-8 प्रणालियों की एक किस्म में रोग का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. यहां दिखाए गए संदर्भ में, यह सबसे अक्सर प्रत्यारोपण के बाद रोग, ठोस अंग प्रत्यारोपण की एक आम समस्या लंबे समय तक जो में intimal hyperplasia allograft के भीतर होता है के अध्ययन के लिए किया जाता है. मॉडल का प्राथमिक लाभ यह है कि मात्रात्मक morphometric विश्लेषण की सुविधा और प्रतिरोपित पोत अंतर्जात जहाज है, जो एक अतिरिक्त 9 नियंत्रण के रूप में सेवा कर सकते हैं सन्निहित निहित है. यहाँ दिखाया तकनीक सबसे अक्सर 18-25 ग्राम वजन चूहों के लिए प्रयोग किया जाता है. हम हमारे अनुभव के सबसे संचित है C57BL/6J / BALB CJ, और C3H/HeJ उपभेदों का उपयोग.
Protocol
Representative Results
Discussion
महाधमनी प्रत्यारोपण के माउस मॉडल लाभ का एक नंबर प्रदान करते हैं क्योंकि चूहे बहुत अच्छी तरह से 9,12,13 immunogenetically परिभाषित कर रहे हैं, और वे आसानी से विशिष्ट जीन की उनकी अभिव्यक्ति को बदल छेड़छाड़ कर सकते ह?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम NIH P30 ओ केंद्र (+०७९३३७ डीके) के मुख्य संसाधन द्वारा वित्त पोषित किया गया था.
Materials
| Item | Company | Catalog No. |
| Vascular Clamps | Fine Science Tools | 00396-01 (Size B-1) |
| Dumont Forceps | Fine Science Tools | 11293-00 |
| 10-0 Needled microsuture | AROSurgical | TK-107038 |
| Straight scissors | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5620 |
| Low temperature cauterizer | Beaver-Visitec International | 8441000 |
| Self retaining retractor | World Precision Instruments | 14240 |
References
- Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
- Dambrin, C., Calise, D., Pieraggi, M. T., Thiers, J. C., Thomsen, M. Orthotopic aortic transplantation in mice: a new model of allograft arteriosclerosis. J. Heart Lung Transpl. 18, 946-951 (1999).
- Calise, D., et al. Orthotopic aortic transplantation in rodents by the sleeve technique: a model system for the study of graft vascular disease. Transpl. Proc. 33, 2369-2370 (2001).
- Thomsen, M., et al. An orthotopic aortic graft mouse model to study the immunopathology of chronic vascular rejection. Transpl. Proc. 34, 2833-2835 (2002).
- Benza, R. L., George, J. F. Aortic graft transplantation in mice. J. Heart Lung Transpl. 21, 1319-1321 (2002).
- Chereshnev, I., et al. Mouse model of heterotopic aortic arch transplantation. The Journal of surgical research. 111, 171-176 (2003).
- Cho, H. R., et al. Improved surgical technique for heterotopic aortic transplantation in mice. J. Korean Med. Sci. 22, 12-15 (2007).
- Zhong, R. Organ transplantation in mice: current status and future prospects. Microsurgery. 19, 52-55 (1999).
- George, J. F., Pinderski, L. J., Litovsky, S., Kirklin, J. K. Of mice and men: mouse models and the molecular mechanisms of post-transplant coronary artery disease. J. Heart Lung Transpl. 24, 2003-2014 (2005).
- Gorska, P. Principles in laboratory animal research for experimental purposes. Med Sci Monit. 6, 171-180 (2000).
- Landi, M. S., Kreider, J. W., Lang, C. M., Bullock, L. P. Effects of shipping on the immune function in mice. Am. J. Vet. Res. 43, 1654-1657 (1982).
- Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
- Chen, B., et al. Carbon monoxide rescues heme oxygenase-1-deficient mice from arterial thrombosis in allogeneic aortic transplantation. Am. J. Pathol. 175, 422-429 (2009).
- Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transpl. Proc. 5, 733-735 (1973).
- Chang, E. I., et al. Vascular anastomosis using controlled phase transitions in poloxamer gels. Nature medicine. 17, 1147-1152 (2011).
