神経侵襲性脳炎ウイルスのin vivoイメージングシステム（IVIS）検出で
Summary
小説としてルシフェラーゼおよびin vivoイメージングシステム（IVIS）を活用することで臨床開発が発生する前に病気のエンドポイントを識別することを意味します。 IVISは、私たちは今後の研究のために、より正確な疾患モデルを提供し、リアルタイムで複数の日にわたって脳炎ウイルスの侵入を可視化することができました。また、私たちは高速に現在利用されている動物モデルよりも抗ウイルス薬やワクチンの潜在的な保護機能を識別することができました。複数の時点にわたって個々の動物を利用する能力は、病気の研究のより人間的な、より科学的な手段を確保し活用動物に減少動物要件、コスト、および全体的な罹患率を保証します。
Abstract
イメージング技術の近代的な進歩は、ウイルス研究が達成されるようにさらなる開発と改良を奨励しています。当初はヒュームの3R（リデュース交換、還元、リファインメント）でラッセルとBurchによって提案された、科学研究における動物モデルの利用が科学的正確さとスピードを向上させながら、動物の使用量を削減する新たな方法論を識別するために、一定の圧力の下にある。ヒュームのプリンシパルへの主要な課題は、しかし、動物の疾病の罹患率と全体の数字を削減しつつ、研究は統計的に正確であることを確認する方法です。ワクチンの有効性の研究は、現在、統計的に有意であると見なされるためには、動物の多数を必要とし、多くの場合、免疫防御の識別のための高い罹患率と死亡率のエンドポイントにつながる。我々は徐々にリファレンスによって、中枢神経系（CNS）の侵入を追跡するためにホタル生物発光酵素と一緒にin vivoイメージングシステム（IVIS） で利用マウスモデルにおけるphaliticウイルス。典型的には、病気は、比較的ゆっくりと進行する、しかしウイルス複製は、特に中枢神経系内で、迅速であり、多くの場合、致命的な結果につながることができます。 TC83-Lucを用いたマウスの鼻腔内感染後、弱毒ベネズエラウマ脳炎ウイルス株は、ルシフェラーゼ遺伝子を発現するように改変、我々は、少なくとも3日臨床疾患の症状の開発前に脳内でのウイルスの複製を視覚化することができます。我々は臨床症状が発現する前に速やかにTC83-Lucの感染症に対する治療薬およびワクチンの保護を識別することができるキー脳炎疾患発症のエンドポイントとして中枢神経系への浸潤を利用。 IVIS技術により、我々は動物数および罹患率を低減しつつ、薬物治療やワクチンの迅速かつ正確なテストを実証することができます。
Protocol
Representative Results
Discussion
このプロトコルは 、in vivo で解析するための撮像面をカバーしていますが、それは今後の研究のための重要な要因として、生物発光ベクトルを認識することは重要である。ルシフェラーゼの発現用ベクターとしてTC83当社の利用、VEEVの弱毒ワクチン株は、酵素を多量に前述の1〜4としてCNSにおけるウイルスの高い複製速度に起因する生産されていることを保証します。野?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この原稿のためのビデオ編集と彼女の支援のためのトランスレーショナル科学UTMB-NIHの助成金1UL1RR029876-01とアリーシャプレイザー研究所。
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| D-Luciferin | |||
| Isoflurane | |||
| Xenogen IVIS System (Spectrum) | Caliper Life Sciences | ||
| XGI-8-gas Anesthesia System | Caliper Life Sciences | ||
| XIC-3 Containment Box | Caliper Life Sciences | ||
| LivingImage 4.0 Software | Caliper Life Sciences | ||
| Telemetry/identification chips | Bio Medic Data Systems | IPTT-300 | Animal ID and Temperature |
| BD Integra 1ml TB syringe with 26 g x 3/8” needle | Fisher Scientific | 305279 | |
| Vet Bond tissue adhesive | Fisher Scientific | NC9259532 | |
| Vetropolycin Ophthalmic Ointment | Webster Veterinary Products | 78444656 | |
| Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline 1X | Invitrogen | 14190-144 | |
| BMDS Chip Reader | Bio Medic Data Systems | DAS-7007S | |
| DAS-HOST Software | Bio Medic Data Systems | Used to download probe information |
References
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