تحليل الفئران خلايا شوان التنمية جنبا إلى جنب المحوار النامي
Summary
نحن هنا وصف خلية شوان (SC) مقايسة الهجرة التي الطوائف المنبوذة هي قادرة على تطوير محاور عصبية على طول تمديد.
Abstract
تطوير الأعصاب الطرفية هو عملية مثيرة للاهتمام. الخلايا العصبية ترسل محاور عصبية لعصب أهداف محددة، والتي غالبا ما تكون في البشر أكثر من 100 سم بعيدا عن سوما من الخلايا العصبية. بقاء الخلايا العصبية خلال التنمية يتوقف على عوامل النمو المشتقة من الهدف ولكن أيضا على دعم خلايا شوان (SCS). محاور عصبية لهذه الغاية ensheath SC من منطقة سوما العصبية (أو الانتقال من المركزية إلى الجهاز العصبي المحيطي) إلى المشبك أو الموصل العصبي العضلي. خلايا شوان هي مشتقات من قمة العصبية والسلائف وتهاجر على طول محاور عصبية الناشئة حتى يتم تغطية كامل مع محور عصبي الطوائف المنبوذة. وهذا يدل على أهمية الهجرة SC لتطوير النظام العصبي الطرفي وتشدد على ضرورة التحقيق في هذه العملية. من أجل تحليل SC التنمية، هناك حاجة إلى الإعداد الذي بجانب اللجان الدائمة التي تشمل أيضا الركيزة الفسيولوجية للهجرة، ومحور عصبي. بسبب النمو داخل الرحم <eم> في الوقت الفاصل بين التصوير الحية، ومع ذلك، ليس من الممكن في الفقاريات مثل المشيمة الماوس (المصحف العضلة). للتحايل على هذا، وتكييفها نحن متفوقة عنق الرحم العقدة تقنية يزدرع (SCG). على العلاج مع عامل نمو العصب (NGF) إإكسبلنتس SCG توسيع نطاق محاور عصبية، تليها السلائف SC المهاجرة على طول محاور عصبية من العقدة إلى المحيط. جمال هذا النظام هو أن يتم اشتقاق SC من بين مجموعة من SC الذاتية وأنها تهاجر على طول محاور عصبية من الفسيولوجية الخاصة التي تنمو في نفس الوقت. هذا النظام هو الفتنة خاصة، لأنه لا يمكن تحليل تطور على طول محاور عصبية من قبل SC الوقت الفاصل بين التصوير، وفتح إمكانيات أخرى للحصول على نظرة ثاقبة الهجرة SC.
Protocol
Representative Results
Discussion
تطوير الجهاز العصبي المحيطي هي عملية مثيرة. عند اكتمال التنمية، ومغمد محاور عصبية من قبل اللجان الدائمة على طول، والتي يمكن، في البشر، غالبا ما تكون أكثر من 100 سم. تحقيقا لهذه الغاية العدد الصحيح من الطوائف المنبوذة المطلوبة لابد من وضعت خلال التنمية واللجان الدائمة …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
نريد ان نشكر أورماس Arumae لتبادل بروتوكول الكولاجين وطفولي وجوتا هينز أورسولا للمساعدة التقنية الممتازة. وعلاوة على ذلك نريد ان نشكر المسيحية F. أكرمان، إنجل أولريك والتصوير نيكون مركز في جامعة هايدلبرغ، وكذلك لمساعدة كيرش يواكيم التكرم لshoting الفيديو. وقد تم تمويل جزء من العمل من خلال جمعية الألمانية للبحوث (SFB 592).
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalogue Number | Comments |
| 10x MEM | Gibco | 21430 | |
| Sodium Bicarbonate (7.5%) | Gibco | 25080 | |
| Glutamine | Gibco | 25030 | |
| NaOH | Merck | 109137 | |
| NGF | Roche | 1058231 | R&D#556-NG-100 |
| Neurobasal Medium | Gibco | 21103 | |
| B27 Supplement | Gibco | 17504 | |
| antibiotics | Gibco | 15640 | |
| d-PBS | Gibco | 14040 | |
| insect needles | FST | 26002-20 | |
| syringe needle | Braun | BD # 300013 | |
| 8 well chamber slide | Lab tek | 177402 |
References
- Ebendal, T., Rush, R. A. . Use of collagen gels to bioassay nerve growth factor activity. IBRO Handh, (1989).
- Heermann, S., SchmÃcker, J., Hinz, U., Rickmann, M., Unterbarnscheidt, T., Schwab, M. H., Krieglstein, K. Neuregulin 1 type III/ErbB signaling is crucial for Schwann cell colonization of sympathetic axons. PloS One. 6 (12), e28692 (2011).
- Zuo, Y., Lubischer, J. L., Kang, H., Tian, L., Mikesh, M., Marks, A., Scofield, V. L. Fluorescent proteins expressed in mouse transgenic lines mark subsets of glia, neurons, macrophages, and dendritic cells for vital examination. The Journal of Neuroscience. The Official Journal of the Society for Neuroscience. 24 (49), 10999-11009 (2004).
- Levi-Montalcini, R., Booker, B. EXCESSIVE GROWTH OF THE SYMPATHETIC GANGLIA EVOKED BY A PROTEIN ISOLATED FROM MOUSE SALIVARY GLANDS. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 46 (3), 373-384 (1960).
- Meintanis, S., Thomaidou, D., Jessen, K. R., Mirsky, R., Matsas, R. The neuron-glia signal beta-neuregulin promotes Schwann cell motility via the MAPK pathway. Glia. 34 (1), 39-51 (2001).
- Yamauchi, J., Miyamoto, Y., Chan, J. R., Tanoue, A. ErbB2 directly activates the exchange factor Dock7 to promote Schwann cell migration. The Journal of cell biology. 181 (2), 351-365 (2008).
- Anton, E. S., Weskamp, G., Reichardt, L. F., Matthew, W. D. Nerve growth factor and its low-affinity receptor promote Schwann cell migration. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 91 (7), 2795-2799 (1994).
- Mahanthappa, N. K., Anton, E. S., Matthew, W. D. Glial growth factor 2, a soluble neuregulin, directly increases Schwann cell motility and indirectly promotes neurite outgrowth. The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 16 (15), 4673-4683 (1996).
- Yamauchi, J., Chan, J. R., Shooter, E. M. Neurotrophins regulate Schwann cell migration by activating divergent signaling pathways dependent on Rho GTPases. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 101 (23), 8774-8779 (2004).
- Gumy, L. F., Bampton, E. T. W., Tolkovsky, A. M. Hyperglycaemia inhibits Schwann cell proliferation and migration and restricts regeneration of axons and Schwann cells from adult murine DRG. Molecular and Cellular Neurosciences. 37 (2), 298-311 (2008).
- Sakaue-Sawano, A., Kurokawa, H., Morimura, T., Hanyu, A., Hama, H., Osawa, H., Kashiwagi, S. Visualizing spatiotemporal dynamics of multicellular cell-cycle progression. Cell. 132 (3), 487-498 (2008).
- Park, D., Don, A. S., Massamiri, T., Karwa, A., Warner, B., MacDonald, J., Hemenway, C. Noninvasive imaging of cell death using an Hsp90 ligand. Journal of the American Chemical Society. 133 (9), 2832-2835 (2011).
- Shcherbo, D., Souslova, E. A., Goedhart, J., Chepurnykh, T. V., Gaintzeva, A., Shemiakina, I. I., Gadella, T. W. J., Lukyanov, S., Chudakov, D. M. Practical and reliable FRET/FLIM pair of fluorescent proteins. BMC Biotechnology. 9, 24 (2009).
