Ecocardiografia fetal e ultra-som Doppler pulsátil em um modelo de coelho de restrição do crescimento intra-uterino
Summary
Descrevemos exame da função cardíaca fetal com a ecocardiografia fetal funcional contemporânea e fetoplacentária Doppler usando o VisualSonics VEVO 2100 microultrasound em um modelo induzido cirurgicamente de restrição do crescimento fetal intra-uterino em um coelho.
Abstract
Fetais crescimento intrauterino restrito (CIUR) resulta na função cardíaca anormal que é aparente pré-natal devido aos avanços na fetoplacentária Doppler e ecocardiograma fetal. Cada vez mais, essas modalidades de imagem estão sendo utilizados clinicamente para examinar a função cardíaca e avaliar o bem-estar no útero, orientando, assim, calendarização das decisões de nascimento. Aqui, usamos um modelo de coelho de CIUR, que permite a análise da função cardíaca de uma forma clinicamente relevante. Usando anestesia induzida isoflurano, CIUR é criado cirurgicamente em idade gestacional dia 25, realizando uma laparotomia, expondo o útero bicorno e ligadura de 40-50% dos vasos útero-placentários fornecendo cada saco gestacional em um único corno uterino. O outro chifre no útero bicorno coelho serve como fetos controles internos. Em seguida, após a recuperação em idade gestacional dia 30 (termo), o mesmo coelho passa por exame da função cardíaca fetal. A anestesia é induzida com Ketamine e xilazina por via intramuscular, em seguida, mantido por uma infusão contínua de cetamina e xilazina para minimizar os efeitos iatrogênicos sobre a função cardíaca fetal. Uma laparotomia repetição é realizada para expor cada saco gestacional e um exame microultrasound (VisualSonics VEVO 2100) da função cardíaca fetal é realizada. Insuficiência placentária é evidente por um elevado índice de pulsatilidade ou um fluxo diastólico final ausente ou reversa da artéria umbilical Doppler onda. O ducto venoso e da artéria cerebral média Doppler é então examinada. Ecocardiografia fetal é realizada pelo modo B gravação, o modo M e OVF em vista lateral e apical. Cálculos off-line determinar variáveis padrão do modo M cardíacos, excursão sistólica avião anular tricúspide e mitral, salpico de monitoramento e análise de tensão, o índice de desempenho miocárdico modificado e vascular OVF de interesse. Assim, este modelo de pequenos animais de CIUR oferece exame em Utero da função cardíaca que é consistente com a prática clínica atual e é, portanto, útil em um ambiente de pesquisa translacional.
Introduction
A carga de doença cardiovascular que resulta da restrição do crescimento fetal intra-uterino retardado (CIUR) não pode ser exagerada. É a principal causa de morte fetal após anomalias congénitas. CIUR 1 refere-se a um feto que não consegue atingir o seu potencial de crescimento e é geralmente um resultado de insuficiência placentária. Em dois sobreviventes, a doença cardiovascular é evidente através do tempo de vida com a disfunção do miocárdio resulta na infância 3,4 e hipertensão subseqüente 5, 6 diabetes e obesidade em desenvolvimento na vida adulta – todos fatores de risco cardíaco cumulativos desde o nascimento à morte prematura por doença cardíaca isquêmica 7.
Desenvolvimento de modelos animais para caracterizar a comunicação materno-fetal que estabelece CIUR ea resposta fetal após a redução da disponibilidade de substrato é necessário se quisermos tanto melhor compreender a fisiopatologia do carro CIUR relacionadacomprometimento cardíaco e desenvolver estratégias cardio-protetores para melhorar a saúde fetal e pós-natal. A este respeito, muitos modelos diferentes, em diferentes espécies foram descritas. CIUR 8 é induzido por materno sob a nutrição com uma dieta de baixo teor de proteína em roedores, 9 ablação cirúrgica ou ligadura de fluxo sanguíneo uterino em roedores e cobaias 10 ou oclusão do artéria umbilical em ovinos. 11 No entanto, é evidente que nenhum modelo totalmente recapitula o CIUR humano 12.
Neste estudo metodológico atual, usamos uma abordagem bem validado de interrupção vascular útero-placentária seletiva em um coelho 13-16 que não só produz respostas cardiovasculares fetais observadas com ultra-som clinicamente 14, mas também permite o interrogatório da função cardíaca fetal com o romance ecocardiografia utilizando a tecnologia microultrasound do VisualSonics VEVO 2100. Apesar de ultra-som Doppler de fetoplvasos acental continua a ser a pedra angular da atual vigilância pré-natal de fetos com RCIU 17, ecocardiografia funcional está sendo cada vez mais utilizado para fornecer novos insights sobre a fisiopatologia da doença e para avaliar o bem-estar fetal. 18 Assim, aqui vamos dar esses avanços da pesquisa clínica e descrever um modelo animal que portos não só esta imagem de sofisticação, mas também fornece a plataforma experimental para investigar os caminhos mecanicistas e terapêuticas.
Protocol
Representative Results
Discussion
Nós usamos uma abordagem previamente validado de reduzir cirurgicamente fluxo sanguíneo útero-placentário em um coelho para produzir CIUR 13-16 e examinar mais tarde a função cardíaca fetal 14 para descrever a tecnologia microultrasound e análise da função cardíaca disponíveis na VEVO VisualSonics 2100. A capacidade de reproduzir feto-placentárias Doppler mudanças de fetos com RCIU humanos em um modelo animal pequeno e, em seguida, permitir o exame da função cardíaca com a ecocardi…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho é apoiado por uma Hamilton-Fairley NHMRC Fellowship (RH, AL), Programa de Apoio à Infra-Estrutura Operacional do Governo de Victoria (RH, EW) ea Curie Indústria-Academia Parceria Marie e Caminhos conceder patrocinado pela Comissão Europeia (ME, PD) . Os autores gostariam de agradecer ao Dr. Andre Miyague, Dr. Francesca Russo, a Sra. Rosita Kinnart eo Sr. Ivan Laermans por seus conhecimentos técnicos na produção deste vídeo.
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | Comments |
| Ketamine | Ceva Sante Animale | http://www.ceva.com/en | |
| Xylazine | Ceva Sante Animale | http://www.ceva.com/en | |
| Depot Provera | Pharmacia Upjohn | ||
| Penicillin G | Kela Pharma | http://www.kela.be | |
| Lidocaine | B Braun Medical | http://www.bbraun.com/ | |
| Temgesic | Schering-Plough | http://www.merck-animal-health-usa.com/ | |
| Isolurane | Isoba Vet; Abbott Laboratories Ltd | http://www.abbottanimalhealth.com/index.html | |
| Ethicon | Johnson and Johnson | http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures | |
| Ethicon | Johnson and Johnson | http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures | |
| Ethicon | Johnson and Johnson | http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures | |
| VEVO 2100 | VisualSonics | SN100-0032 | http://www.visualsonics.com/ |
| Aquasonic Gel | Parker Laboratories | 01 02 | http://www.parkerlabs.com/ultrasound_products.html |
| Nellcor N-20PA Pulse oximeter | Covidien | http://www.nellcor.com/prod/PRODUCT.ASPX?S1=POX&S2=MON&id=282&V |
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