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细菌转化：电穿孔法
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Overview
“转化”这一术语是指细胞摄入外源DNA。自然界中，某些类型的细菌可以发生转化。而在分子生物学中，可通过在细菌细胞壁上穿孔来人工诱导转化。能够从环境中接受DNA的细菌细胞被称为感受态细胞。可在实验室制备电穿孔感受态细胞，并通过施加电场在细胞壁上形成小孔让DNA穿过来转化这些细胞。
本短片讲解了用于电穿孔转化的设备，如电转化仪和电击杯。视频也演示了如何制备电穿孔感受态细胞和用电穿孔转化目的细胞的逐步步骤。也提到了通过观察时间常量来估计转化实验是否成功和电穿孔时去除掉溶液中的盐离子的重要性。
Procedure
细菌转化是一种自然存在的过程，细菌摄入外源DNA, 然后扩增或克隆该DNA。在实验室里，该过程可人工诱导完成，使用高电压的电场在细菌膜上形成小孔，质粒DNA将由此穿过。该方法就是电穿孔法，接下来的视频将讲解它的原理，逐步操作和应用。 在讲细菌的电穿孔之前，很重要的一点是要了解该方法中用到的DNA类型-质粒。质粒是独立于染色体外，小的环状DNA，它作为载…
Disclosures
No conflicts of interest declared.
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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Bacterial Transformation: Electroporation. JoVE, Cambridge, MA, (2023).
