Внутрилимфатическое иммунотерапия и вакцинации у мышей

Summary

Профилактическая и терапевтическая вакцинация часто не удается стимулировать сильный иммунный ответ за счет неделе дренажа вакцины в лимфатические узлы и, следовательно, плохой участие иммунных клеток. Прямым инъекции вакцины к лимфоузлах так называемый внутрилимфатическое инъекция эффективность вакцины можно сильно улучшены и доз вакцины можно уменьшить.

Abstract

Вакцины обычно вводят подкожно или внутримышечно для стимуляции иммунного ответа. Успех это требует эффективного дренажа вакцины к лимфатическим узлам, где антиген представляющие клетки могут взаимодействовать с лимфоцитами для генерации хотели иммунных реакций. Сила и тип иммунных реакций, индуцируемых также зависит от плотности или частоты взаимодействий, а также микросреды, особенно содержания цитокинов. Как только минуту доля периферии введенных вакцин достигает лимфатических узлов, вакцинация мышей и людей проводились путем прямой инъекции вакцины в паховых лимфатических узлов, то есть внутрилимфатическое инъекции. В человеке, процедура руководствуется ультразвука. У мышей, небольшой (5-10 мм) надрез в паховой области анестезированных животных, лимфатический узел локализуется и иммобилизованных пинцетом, а объем 10-20 мкл вакцины вводят под визуальным контролем.Разрез закрывается с помощью одного стежка с помощью хирургических швов. Мыши были вакцинированы с плазмидной ДНК, РНК пептида, белка, частиц и бактерий, а также в качестве адъювантов, и наблюдалось сильное повышение иммунных реакций против всех типов вакцин. Внутрилимфатическое метод вакцинации особенно подходит в ситуациях, когда обычные вакцинация вырабатывает недостаточное иммунитет или где количество доступной вакцины ограничено.

Introduction

Вакцины обычно вводят подкожно или внутримышечно для стимуляции иммунного ответа. Успех этой процедуры требует эффективного дренажа вакцины в лимфатические узлы, где антиген представляющие клетки могут взаимодействовать с лимфоцитами для генерации Т-и ответов B-клеток. Кроме того, прочность и тип иммунных реакций, индуцируемых также зависит от плотности или частоты таких взаимодействий, так как сама микросреды, особенно содержания цитокинов. Как только небольшая часть вакцины вводят в периферийной ткани достигает лимфатического узла, прививки мышей и человека путем прямой инъекции вакцины в лимфатических узлах, сайт иммунные ответы были сгенерированы, были выполнены. В человеке, процедура руководствуется ультразвука, процедура также используется для управления изображениями агентов для визуализации и диагностики в лимфатическую систему. У мышей, процедура является инвазивным. Здесь небольшой (5-10 мм) incisioн выполнен в паховой области анестезированных животных ^1, лимфатических узлов локализован и иммобилизованных пинцетом, а объем 10-20 мкл вакцины вводят под визуальным контролем; 10 мкл используется для первой инъекции и у молодых мышей с небольшими лимфатических узлов, тогда как 20 мкл может быть введен в лимфатических узлах старшего возраста или уже грунтованные мышей, которые имеют большие лимфатические узлы. Разрез может быть закрыт с помощью одного стежка с помощью хирургических швов. С помощью этого метода, мышей, вакцинированных ДНК ^{плазмиды, 2,3} РНК ^{4, 1,3,5,6} пептида, белка ^7-10 частиц, бактерий ^{11 12,} а в качестве адъювантов ^7,13 и сильного улучшения иммунной ответы против всех типов вакцин были обнаружены. Внутрилимфатическое метод вакцинации особенно подходит в ситуациях, когда обычные вакцинация вырабатывает недостаточное иммунитет или где количество доступной вакцины ограничено или веру дорогостоящим. У человека, внутрилимфатическое способ иммунизации был применен к аллергии пациентов ^14,15, или пациентов с раком ^16-21. Хотя в настоящее время понятие является то, что внутрилимфатическое метод является более инвазивными, чем других инъекционных методов, таких как внутримышечных и подкожных инъекций, восприятие боли не выше, чем после венозной пункции ^15. Ожидается, что внутрилимфатическое вакцинация станет альтернативой или дополнением к другим методам профилактики и особенно лечебных прививок. Эта статья подробно описывает, как процедура внутрилимфатическое вакцинации, проведенных в мышей. Все процедуры, описанные, были утверждены кантона ветеринарной агентства Цюриха и осуществляется в соответствии швейцарских федеральных руководящих принципов и директив по защите животных, используемых для научных целей.

Protocol

1. Анестезия мышей Подготовьте анестетики, смешивая кетамин (диссоциативной обезболивающий) и ксилазина (седативное и обезболивающее) в буферном растворе. Концентрации кетамина и ксилазина в конечном растворе 12,5 и 2 мг / мл, соответственно. Введите анестетиков в мышах путем в…

Representative Results

Порядок внутрилимфатическое инъекций у мышей, несмотря на хирургическое природы, является прямым и относительно быстро. Обученный человек может выполнить процедуру в 3-4 мин. Разрез, замкнутое один стежок обычно заживает в течение двух дней (рис. 1) Внутрилимфат?…

Discussion

Внутрилимфатическое иммунизации и иммунотерапия как было показано, не подходить для стимуляции обоих реакции антител и Т-клеточных реакций. Как показано в этом видео-статьи, внутрилимфатическое процедура вакцинации является быстрый и простой способ для стимулирования сильный иммун?…

Materials

Ketamine (Ketasol-100)	Graeub AG, Switzerland		Anesthetics
Xylazine (Rompun)	Bayer, Germany		Anesthetics
Viscotears Eye-Gel	Novartis, Switzerland		To keep eyes from drying out during anesthesia.
BD Micro-Fine 0.5 ml	BD Medical, France		29 G Insulin syringes with permanently attached needles
6-0 Dermalon Monofilament nylon	Covidien, MA, USA		For sutures (0.7 metric, 18G, 45 cm, Blue)
Curved forceps, 4.5 inch	Polymed, Switzerland		For incision and holding of lymph node
Straight surgical scissors, 4.5 inch	Polymed, Switzerland		For incision
Needle holder, 5.5 inch	Polymed, Switzerland		To close incision with suture