Ultrasound Imaging guidata intracardiaca iniezione di sviluppare un modello murino di Breast Cancer metastasi cerebrali Seguito da longitudinale MRI
Summary
Un seno cancro al cervello metastasi modello del mouse viene stabilito con ecografia guidata iniezione intracardiaca delle cellule MDA-MB231/Br-GFP. Sviluppo delle metastasi intracraniche multifocali è stato monitorato longitudinalmente utilizzando ad alta risoluzione di 9.4 T MRI.
Abstract
Metastasi cerebrali Cancro al seno, che si verificano nel 30% dei pazienti con carcinoma mammario in stadio IV, è associata ad alta mortalità. La sopravvivenza mediana è di soli 6 mesi. È fondamentale disporre di adeguati modelli animali per imitare la diffusione emodinamico delle cellule metastatiche nello scenario clinico. Qui, stiamo introducendo l'uso di piccolo ecografia animale per guidare un'iniezione accurata delle cellule tumorali mammarie tropicale cervello nel ventricolo sinistro di topi nudi atimici. MRI longitudinale viene utilizzato per valutare iniziazione intracranica e la crescita delle metastasi cerebrali. Iniezione intracardiaca ecoguidata garantisce non solo un'iniezione accurata e pertanto un più alto tasso di successo, ma anche diminuito significativamente il tasso di mortalità, rispetto al nostro precedente procedura manuale. In vivo alta risoluzione MRI permette la visualizzazione di lesioni iperintense multifocali, piccolo come 310 micron di diametro sulle immagini T 2-pesate a tre settimane dopo l'iniezione. Follow-up MRI rivela la crescita del tumore intracranico e aumento del numero di metastasi che distribuiscono in tutto il cervello.
Introduction
Cervello metastasi è il tumore maligno intracranica più comune negli adulti. La prognosi è estremamente povero, con una sopravvivenza mediana di 4-6 mesi, anche con un trattamento aggressivo. Il cancro al seno è uno dei tre principali tumori primari con alta morbilità di metastasi cerebrali 1-3. Diverse linee di cancro al seno brain-tropico sono in grado di sviluppare metastasi cerebrali dopo intracardiaca o iniezione intracarotidea 4. Iniezione diretta di cellule tumorali nel ventricolo sinistro può ignorare il letto capillare polmonare e quindi aumentare l'incidenza di formare metastasi cerebrali minimizzando metastasi viscerali. La linea MDA-MB231Br è una delle linee di cancro al seno più utilizzati umane per sviluppare metastasi cerebrali in modelli di roditori 5,6.
Come molti altri studi 4,7, abbiamo eseguito una procedura manuale di iniezione intracardiaca nei nostri studi precedenti. Tuttavia, solo il 50% tasso di successo è stato ottenuto con il manualeiniezione e una frazione di topi morti per le procedure invasive ripetute se studi precedenti fallito. Qui, stiamo introducendo l'uso di una procedura di imaging-guidata per garantire l'iniezione di cellule di carcinoma mammario-cervello cerca nel ventricolo sinistro di topi atimici. Longitudinale alta risoluzione MRI è applicata a seguire lo sviluppo intracranica di metastasi cerebrali.
Protocol
Representative Results
Discussion
Nel presente studio, abbiamo dimostrato che l'ecografia iniezione ventricolare sinistra di imaging guidata garantisce l'accuratezza modo che è stata osservata ogni animale in questo studio sviluppato metastasi cerebrali e non la morte degli animali. La bellezza di iniezione immagine-guida è che il percorso di penetrazione dell'ago della pelle e, infine, nel ventricolo sinistro può essere monitorato e regolato sotto la foto, che è distinta dalla procedura manuale che richiede severe punti di repere anatom…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Siamo grati a Drs. Diane Palmieri e Patricia Steeg di NSC per averci fornito le cellule MDA-MB231Br. Ringraziamo il Dr. Ralph Mason, Mr. Jason Reneau e la signora Ramona Lopes per il supporto tecnico e collegiale. Questo lavoro è stato sostenuto in parte dal IDEA DOD Awards W81XWH-08-1-0583 e W81XWH-12-1-0317. Esperimenti di risonanza magnetica sono stati eseguiti in Advanced Imaging Research Center, una struttura NIH BTRP # P41-RR02584, e l'iniezione intracardiaca ecoguidata è stato eseguito con VisualSonics Vevo 770 sotto 1S10RR02564801.
Materials
| DMEM | HyClone | SH30022.01 | |
| Trypsin | Mediatech | 25-051-C1 | |
| Automatic cell counter | Biorad | TC10 | |
| Isoflurane | Baxter International Inc. | 1001936060 | |
| VisualSonics Vevo 770 High-Resolution Imaging System | Visual Sonics Inc. | ||
| 9.4T horizontal bore magnet with a Varian INOVA Unity system | Agilent | ||
| O.C.T Compound | Sakura Finetek USA | 4583 |
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