Summary

Bygging av en rimelig og enkel å bygge Sebrafisk Facility

Published: November 22, 2014
doi:

Summary

A Zebrafish facility suitable for breeding and in vivo research is built in an easy and affordable manner. Maintenance is minimal. This facility is ideal for student involvement and independent research.

Abstract

In vivo biomedisinsk forskning er avgjørende for å oversette in vitro funn i kliniske fremskritt. Små akademiske institusjoner med begrensede ressurser finner det praktisk talt umulig å bygge og vedlikeholde typiske gnager fasiliteter for forskning. Sebrafisk forskning har vist seg å være et verdifullt alternativ til in vivo-undersøkelser i farmakologi, fysiologi, utvikling og genetiske studier. Denne artikkelen viser at en funksjonell sebrafisk anlegget kan bygges på en enkel og rimelig måte. Vi viser at et slikt anlegg kan bygges i omtrent en arbeidsdag med minimal verktøy og kompetanse. Kostnaden for den 27 1.8 L fisk tank sebrafisk anlegget konstruert i denne studien var ca $ 1500. Vi anslår at opprettholdelsen av en innledende arbeids 150 fisk koloni i 3 måneder er $ 1,000. Dette prosjektet involverte studenter, som ble innført for å aquaculturing av sebrafisk for forskning foreslår.

Introduction

In vivo-modeller er avgjørende i å gjennomføre omfattende biomedisinsk forskning siden de tillater in vitro forskning som skal oversettes på systemet og organismenivå. For eksempel har forskning med små pattedyr, gnagere, nemlig vist seg nødvendig for utvikling av medikamenter og i forbedring av tilgjengelige medikamenter. Imidlertid kan kompleksiteten (økonomisk og logistisk) gjør det praktisk talt umulig å bygge og vedlikeholde gnager fasiliteter for eksperimentering foreslår at små forsknings akademiske institusjoner. Likevel kan in vivo forskning utføres ved hjelp av andre dyrearter som krever mindre forseggjorte logistikk. Sebrafisk (Danio rerio) har blitt brukt som en in vivo modell for å studere genetikk, utvikling, patofysiologi og farmakologi 1,2,10,11,12. De nødvendige for å huse sebrafisk for eksperimentering anlegg er relativt enkle og betydelig rimeligere i forhold til rodent fasiliteter. Kim et al. 3 har nylig beskrevet i detalj en 80 tank sebrafisk bolig system som kan bygges for ca $ 1500, som inkluderer både deler og lønnskostnader. Dette står i sterk kontrast til den nesten $ 8500 som ville bli pålagt å kjøpe en ferdig, 80 tank system fra en rekke kommersielle leverandører. Imidlertid beskrivelsen gitt av Kim et al. kan være komplisert og vanskelig å følge for nybegynnere av fisk forskning. Vi tror at en sebrafisk anlegget kan konstrueres på forenklet måte for en investering på $ 1500.

Etableringen av en in vivo-anlegget på små akademiske institusjoner gir sine fakulteter et ekstra verktøy til å produsere mer kraftfull og grundig forskning. In vitro data støttes av in vivo resultater generelt produserer mer omfattende biomedisinsk forskning enn data innhentet ved hjelp av bare in vitro tilnærminger. Derforimplementering av en in vivo forskning anlegget vil betydelig forbedre institusjonen suksess i de totale forsknings bestrebelser (student eksponering til forskning, publikasjoner, kommunikasjon, jakten på ekstern finansiering, osv.).

Byggingen av en Sebrafisk anlegg som det som er beskrevet i denne studien er ideell for forskning akademiske institusjoner med begrensede fasiliteter (eller institusjoner uten in vivo forskningsfasiliteter) under sammentrekkende økonomiske tider.

Protocol

MERK: Disse protokollene følge retningslinjene i IACUC av Presbyterian College. 1. Skaff Materialer Oppført i tabell 1. 2. Fest fem Hylle Chrome Ifølge produsentens instruksjoner. Dette vil bli brukt til å huse Facility. 3. Konstruer vannbeholderen og filtersystem (figur 1A og 2). Ved hjelp av Figur 1A som en guide, layout de 18 gallon bøtte, pumpe, filter og UV-lampe for å bestemme endelig installasjon p…

Representative Results

Bygging av pumpen og Flters System Når stativet er montert og satt opp det første trinnet er å bygge pumpen og filtersystem. Filtrene er koplet til systempumpen, og er plassert over den nederste nivået til den første hylle, som gir mulighet for enkel filter vedlikehold og utskifting. På lignende måte er den UV-lampe i forbindelse med PVC-rør til filteret og holdes på plass med plasttrådbånd for å tillate lett utskifting av UV-lampen som nødvendig (figur 4A). Umiddelbart ette…

Discussion

Hovedformålet med denne artikkelen er å vise at byggingen av en funksjonell sebrafisk anlegget er ikke komplisert, og kan bygges av uerfarne fiske forskere med minimal konstruksjon kunnskap. Videre viser denne artikkelen at materialet for dette funksjonell sebrafisk anlegget kan bli kjøpt opp lett og rimelig fra lokale pet supply butikker eller jernvareforretninger. Når alle materialer og verktøy har blitt kjøpt opp byggingen av systemet og fisken tank tar ca en arbeidsdag. Den 72 timer første løp lar enhver svi…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Forfatterne ønsker å takke Office of Forskning av Presbyterian College School of Pharmacy for økonomisk støtte av dette prosjektet gjennom Small Pharmacy Awards for Research & Collaboration (SPARC) Award. Forfatterne takker Mr. John smink, leder av Aquatic Animal Research Laboratory, Clemson University, Clemson, SC for hans teknisk assistanse manuskript revisjon.

Materials

Item Brand Quantity
74-in H x 48-in W x 18-in D 5-shelf Steel Freestanding Shelving Unit Style Selections 1
18-Gallon General Bucket/Tote Centrex Plastics: LLC Rugged Tote 1
6-Outlet Power Strip With 15-Ft. Cord Master Electrician 1
9-Watt UV Water Garden Clarifier FiIter and UV lamp Smartpond  1
Whole House Water Replacement Filter Whirlpool 6
Opaque Whole-House Pre-Filtration Housing Whirlpool 2
Thread Seal Tape William H Harvey 1
8-fl oz LO-VOC PVC Cement Oatey  1
8-fl oz LO-VOC Primer Oatey  1
1/4-in x 100-ft Vinyl Drip Irrigation Distribution Tubing Mister Landscaper  1
1/4-in Barbed Drip Irrigation On/Off Valve Mister Landscaper 33
9-Port NPT Irrigation Manifold with Filter  Mister Landscaper 6
Drop-In Filter with House  Whirlpool 6
2-in Dia 90-Degree PVC Elbow LASCO 3
2-in Dia 90-Degree Tee LASCO 3
3/4-in Dia 90-Degree Slip Elbow LASCO 15
3/4-in Dia PVC Adapter LASCO 7
3/4-in Dia PVC Tee LASCO 12
2-in Dia PVC Cap LASCO 3
1-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter LASCO 2
3/4-in PVC Socket In-Line Ball Valve American Valve 5
1/2-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter Lasco 8
3/4-in Dia PVC Cap Lasco 1
2-In x 5-Ft Pvc Pipe Charlotte Pipe 4
¾-In x 10-Ft Pvc pipe Charlotte Pipe 3
11/16×1-7/80 PVC ring SXT 10
½” PVC male adapter SXT 1
¾” PVC coupling  SXT 1
½” PVC female adapter  SXT 1
link
1.8 L Dual Beta Keeper Top Fin 27
¾” PVC male adapter (w/ #18 O-ring) SXT 28
90-degree ¾” threaded PVC elbow SXT 27
Fine Mesh N/A 1 yard
Bulkhead Connector N/A 1
Hacksaw N/A 1
Drill N/A 1
Hole saw N/A 1
Adjustable Wrench N/A 1
Pliers  N/A 1
Tape Measure N/A 1
Safety Glasses N/A 1
Work Gloves N/A 1

References

  1. Detrich, H., Westerfield, M., Zon, L. . The Zebrafish: Cellular and Developmental Biology, Part A.. , (2010).
  2. Grim, J. M., et al. Hemogen (hemgn), a transcription factor that regulates erythropoiesis and skeletogenesis in zebrafish. , (2013).
  3. Kim, S., Carlson, R., Zafreen, L., Rajpurohit, S. K., Jagadeeswaran, P. Modular, easy-to-assemble, low-cost facility. Zebrafish. 6 (3), 269-274 (2009).
  4. Linbo, T. L. Zebrafish (Danio rerio) husbandry and colony maintenance at the Northwest Fisheries Science Center. U.S. Dept. Commer., NOAA Tech. Memo. 62, (2009).
  5. Avdesh, A., et al. Regular care and maintenance of a zebrafish (Danio rerio) laboratory: an introduction. J Vis Exp. 69, 4196 (2012).
  6. McNabb, A., Scott, K., Ochsenstein, E., Seufert, K., Carl, M. Don’t be afraid to set up your fish facility. Zebrafish. 9 (3), 120-125 (2012).
  7. Garcia, R. L., Sanders, G. E. Efficacy of cleaning and disinfection procedures in a zebrafish rerio) facility. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (6), 895-900 (2011).
  8. Rivas-Boyero, A. A., et al. Pharmacological characterization of a nociceptin receptor from zebrafish (Danio rerio). J Mol Endocrinol. 46 (2), 111-123 (2011).
  9. Sanchez-Simon, F. M., Zhang, X. X., Loh, H. H., Law, P. Y., Rodriguez, R. E. Morphine regulates dopaminergic neuron differentiation via miR-133b. Mol Pharmacol. 78 (5), 935-942 (2010).
  10. Velasco, E. M., Law, P. Y., Rodríguez, R. E. Mu opioid from the zebrafish exhibits functional characteristics as those of mammalian mu opioid receptor. Zebrafish. 6 (3), 259-268 (2009).

Play Video

Cite This Article
Paige, C., Hill, B., Canterbury, J., Sweitzer, S., Romero-Sandoval, E. A. Construction of an Affordable and Easy-to-Build Zebrafish Facility. J. Vis. Exp. (93), e51989, doi:10.3791/51989 (2014).

View Video