Summary

Construcción de un Build-Fácil-Fondo de pez cebra asequible y

Published: November 22, 2014
doi:

Summary

A Zebrafish facility suitable for breeding and in vivo research is built in an easy and affordable manner. Maintenance is minimal. This facility is ideal for student involvement and independent research.

Abstract

En vivo la investigación biomédica es fundamental para traducir en hallazgos in vitro a los avances clínicos. Instituciones académicas pequeñas con recursos limitados les resulta prácticamente imposible construir y mantener instalaciones de roedores típicos para la investigación. El pez cebra investigación ha demostrado ser una alternativa valiosa para la investigación in vivo en farmacología, la fisiología, el desarrollo y los estudios genéticos. En este artículo se demuestra que una instalación de pez cebra funcional puede construirse de una manera fácil y asequible. Demostramos que una instalación de este tipo podría ser construido en alrededor de un día de trabajo con un mínimo de herramientas y conocimientos. El costo de la instalación de pez cebra pecera 27 1.8 L construido en este estudio fue de aproximadamente $ 1,500. Estimamos que el mantenimiento de una colonia inicial peces de trabajo 150 por 3 meses es de $ 1.000. Este proyecto consistió en los estudiantes, que se introdujeron a la acuacultura del pez cebra para la investigación propone.

Introduction

En modelos in vivo son esenciales en la realización de la investigación biomédica integral, ya que permiten la investigación in vitro para ser traducido a nivel del sistema y del organismo. Por ejemplo, la investigación con mamíferos pequeños, es decir, los roedores, se ha demostrado necesaria en el desarrollo de fármacos y en la mejora de los medicamentos disponibles. Sin embargo, la complejidad (financiero y logístico) podría hacer que sea prácticamente imposible construir y mantener instalaciones de roedores de experimentación propone en pequeñas instituciones académicas de investigación. Sin embargo, la investigación in vivo se puede realizar utilizando otras especies de animales que requieren la logística menos elaboradas. El pez cebra (Danio rerio) se han utilizado con éxito como un modelo in vivo para estudiar la genética, el desarrollo, fisiopatología, y 1,2,10,11,12 farmacología. Las instalaciones necesarias para albergar el pez cebra para la experimentación son relativamente simples y significativamente menos costoso en comparación con rinstalaciones Odent. Kim et al. 3 han descrito recientemente con detalle un sistema de vivienda pez cebra 80 del tanque que se puede construir por aproximadamente $ 1.500, que incluye las piezas y la mano de obra. Esto está en marcado contraste con los casi $ 8.500 que serían necesarios para comprar un sistema de 80 tanque de ready-made de cualquier número de proveedores comerciales. Sin embargo, la descripción dada por Kim et al. puede ser complicado y difícil de seguir para los novatos de la investigación de pescado. Creemos que una instalación de pez cebra se puede construir de manera simplificada para una inversión de $ 1.500.

El establecimiento de una instalación en vivo a las pequeñas instituciones académicas ofrece sus facultades una herramienta adicional con la que producir investigación más potente y completa. Los datos in vitro apoyados por resultados in vivo generalmente producen la investigación biomédica más completo que los datos obtenidos utilizando sólo en enfoques in vitro. Por lo tanto, laimplementación de un centro de investigación in vivo mejorará significativamente el éxito institución en sus esfuerzos globales de investigación (exposición de los estudiantes a la investigación, publicaciones, comunicaciones, búsqueda de financiación externa, etc.).

La construcción de una instalación de pez cebra como el que se describe en este estudio es ideal para las instituciones académicas de investigación con instalaciones limitadas (o instituciones sin in vivo instalaciones de investigación) durante la constricción de tiempos financieros.

Protocol

NOTA: Estos protocolos siguen las directrices del IACUC de Presbyterian College. 1. Materiales Adquirir En la Tabla 1. 2. Montar el 5 Shelf Chrome Según las instrucciones del fabricante. Esto será utilizado para albergar el Mecanismo. 3. Construir el depósito de agua y sistema de filtración (Figuras 1A y 2). Utilizando la figura 1A como guía, Esquemas de los 18 galones cubo, bomba, filtros y lámpara UV pa…

Representative Results

La construcción del sistema de bomba y fltros Una vez que el bastidor está montado y configurado el primer paso es construir el sistema de la bomba y el filtro. Los filtros están conectados a la bomba del sistema y se encuentran por encima del nivel inferior de la primera plataforma, lo que permite el mantenimiento del filtro fácil y reemplazo. Del mismo modo, la lámpara UV está conectada con tubo de PVC para el filtro y sujeta con lazos de alambre de plástico para permitir la fácil sustitución …

Discussion

El propósito principal de este artículo es demostrar que la construcción de una instalación de pez cebra funcional no es complicado y puede ser construido por investigadores noveles peces con un mínimo conocimiento de la construcción. Además, este artículo muestra que los materiales de este centro de pez cebra funcional se pueden adquirir fácilmente y asequible de las tiendas de mascotas locales o ferreterías. Una vez que todos los materiales y herramientas que se hayan adquirido la construcción del sistema y…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Los autores desean agradecer a la Oficina de Investigación de la Facultad de Farmacia de la Escuela Presbiteriana de apoyo financiero de este proyecto a través de los Premios de la pequeña farmacia para la Investigación y Colaboración (SPARC) Premio. Los autores agradecen al Sr. John Smink, director del Laboratorio de Investigación de Animales Acuáticos de la Universidad de Clemson, Clemson, Carolina del Sur por su técnica de revisión de asistencia manuscrito.

Materials

Item Brand Quantity
74-in H x 48-in W x 18-in D 5-shelf Steel Freestanding Shelving Unit Style Selections 1
18-Gallon General Bucket/Tote Centrex Plastics: LLC Rugged Tote 1
6-Outlet Power Strip With 15-Ft. Cord Master Electrician 1
9-Watt UV Water Garden Clarifier FiIter and UV lamp Smartpond  1
Whole House Water Replacement Filter Whirlpool 6
Opaque Whole-House Pre-Filtration Housing Whirlpool 2
Thread Seal Tape William H Harvey 1
8-fl oz LO-VOC PVC Cement Oatey  1
8-fl oz LO-VOC Primer Oatey  1
1/4-in x 100-ft Vinyl Drip Irrigation Distribution Tubing Mister Landscaper  1
1/4-in Barbed Drip Irrigation On/Off Valve Mister Landscaper 33
9-Port NPT Irrigation Manifold with Filter  Mister Landscaper 6
Drop-In Filter with House  Whirlpool 6
2-in Dia 90-Degree PVC Elbow LASCO 3
2-in Dia 90-Degree Tee LASCO 3
3/4-in Dia 90-Degree Slip Elbow LASCO 15
3/4-in Dia PVC Adapter LASCO 7
3/4-in Dia PVC Tee LASCO 12
2-in Dia PVC Cap LASCO 3
1-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter LASCO 2
3/4-in PVC Socket In-Line Ball Valve American Valve 5
1/2-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter Lasco 8
3/4-in Dia PVC Cap Lasco 1
2-In x 5-Ft Pvc Pipe Charlotte Pipe 4
¾-In x 10-Ft Pvc pipe Charlotte Pipe 3
11/16×1-7/80 PVC ring SXT 10
½” PVC male adapter SXT 1
¾” PVC coupling  SXT 1
½” PVC female adapter  SXT 1
link
1.8 L Dual Beta Keeper Top Fin 27
¾” PVC male adapter (w/ #18 O-ring) SXT 28
90-degree ¾” threaded PVC elbow SXT 27
Fine Mesh N/A 1 yard
Bulkhead Connector N/A 1
Hacksaw N/A 1
Drill N/A 1
Hole saw N/A 1
Adjustable Wrench N/A 1
Pliers  N/A 1
Tape Measure N/A 1
Safety Glasses N/A 1
Work Gloves N/A 1

References

  1. Detrich, H., Westerfield, M., Zon, L. . The Zebrafish: Cellular and Developmental Biology, Part A.. , (2010).
  2. Grim, J. M., et al. Hemogen (hemgn), a transcription factor that regulates erythropoiesis and skeletogenesis in zebrafish. , (2013).
  3. Kim, S., Carlson, R., Zafreen, L., Rajpurohit, S. K., Jagadeeswaran, P. Modular, easy-to-assemble, low-cost facility. Zebrafish. 6 (3), 269-274 (2009).
  4. Linbo, T. L. Zebrafish (Danio rerio) husbandry and colony maintenance at the Northwest Fisheries Science Center. U.S. Dept. Commer., NOAA Tech. Memo. 62, (2009).
  5. Avdesh, A., et al. Regular care and maintenance of a zebrafish (Danio rerio) laboratory: an introduction. J Vis Exp. 69, 4196 (2012).
  6. McNabb, A., Scott, K., Ochsenstein, E., Seufert, K., Carl, M. Don’t be afraid to set up your fish facility. Zebrafish. 9 (3), 120-125 (2012).
  7. Garcia, R. L., Sanders, G. E. Efficacy of cleaning and disinfection procedures in a zebrafish rerio) facility. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (6), 895-900 (2011).
  8. Rivas-Boyero, A. A., et al. Pharmacological characterization of a nociceptin receptor from zebrafish (Danio rerio). J Mol Endocrinol. 46 (2), 111-123 (2011).
  9. Sanchez-Simon, F. M., Zhang, X. X., Loh, H. H., Law, P. Y., Rodriguez, R. E. Morphine regulates dopaminergic neuron differentiation via miR-133b. Mol Pharmacol. 78 (5), 935-942 (2010).
  10. Velasco, E. M., Law, P. Y., Rodríguez, R. E. Mu opioid from the zebrafish exhibits functional characteristics as those of mammalian mu opioid receptor. Zebrafish. 6 (3), 259-268 (2009).
check_url/51989?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Paige, C., Hill, B., Canterbury, J., Sweitzer, S., Romero-Sandoval, E. A. Construction of an Affordable and Easy-to-Build Zebrafish Facility. J. Vis. Exp. (93), e51989, doi:10.3791/51989 (2014).

View Video