Summary

Konstruktion av en prisvärd och enkel att Build Zebrafish Facility

Published: November 22, 2014
doi:

Summary

A Zebrafish facility suitable for breeding and in vivo research is built in an easy and affordable manner. Maintenance is minimal. This facility is ideal for student involvement and independent research.

Abstract

In vivo biomedicinsk forskning är avgörande för att översätta in vitro fynd i kliniska framsteg. Små akademiska institutioner med begränsade resurser finner det praktiskt taget omöjligt att bygga och underhålla typiska gnagare anläggningar för forskning. Zebrafish forskning har visat sig vara ett värdefullt alternativ för in vivo forskning inom farmakologi, fysiologi, utveckling och genetiska studier. Denna artikel visar att en funktionell zebrafisk anläggning kan byggas på ett enkelt och prisvärt sätt. Vi visar att en sådan anläggning skulle byggas i ungefär en arbetsdag med minimala verktyg och kunskap. Kostnaden för 27 1,8 L akvarium zebrafisk anläggning konstrueras i denna studie var ca $ 1500. Vi uppskattar att upprätthållandet av ett första arbets 150 fiskar koloni för 3 månader är $ 1,000. Projektet involverade studenter, som infördes för att aquaculturing av zebrafisk för forskning föreslår.

Introduction

In vivo-modeller är viktiga för att bedriva omfattande biomedicinsk forskning, eftersom de tillåter i forsknings vitro ska översättas med systemet och organismnivå. Till exempel har forskning med små däggdjur, nämligen gnagare, visat sig vara nödvändigt i utvecklingen av läkemedel och i förbättringen av tillgängliga läkemedel. Dock kanske komplexiteten (ekonomiskt och logistiskt) gör det praktiskt taget omöjligt att bygga och underhålla gnagare anläggningar för experiment föreslår vid små forsknings akademiska institutioner. Ändå kan utföras in vivo forskning med andra djurarter som kräver mindre genomarbetade logistik. Zebrafisk (Danio rerio) har framgångsrikt använts som en in vivo-modell för att studera genetik, utveckling, patofysiologi och farmakologi 1,2,10,11,12. De resurser som krävs för att hysa zebrafisk för experiment är relativt enkla och betydligt billigare jämfört med rODENT anläggningar. Kim et al. 3 har nyligen beskrivits i detalj en 80 tank zebrafisk inhysningssystem som kan byggas för ca $ 1500, vilket inkluderar både reservdelar och arbetskostnader. Detta står i skarp kontrast till den nästan $ 8500 som skulle krävas för att köpa en färdig, 80 tanksystem från valfritt antal kommersiella leverantörer. Emellertid, den beskrivning som ges av Kim et al. kan vara komplicerad och svår att följa för nybörjare av fisk forskning. Vi tror att en zebrafisk anläggning kan byggas på förenklat sätt för en investering på $ 1500.

Etableringen av ett in vivo anläggning vid små lärosäten ger sina fakulteter ytterligare verktyg för att producera mer kraftfull och grundlig forskning. In vitro-data som stöds av in vivo resultat generellt producerar mer omfattande biomedicinsk forskning än data som erhållits med hjälp av endast in vitro metoder. Därförgenomförande av ett in vivo forskningsanläggning kommer att avsevärt förbättra den institution framgång i dess övergripande forsknings strävanden (elev exponering för forskning, publikationer, kommunikationer, strävan efter extern finansiering, etc.).

Byggandet av ett Zebrafish anläggning som den som beskrivs i denna studie är idealisk för forsknings akademiska institutioner med begränsade faciliteter (eller institutioner utan in vivo forskningsanläggningar) under bromsande ekonomiska tider.

Protocol

OBS: Dessa protokoll följer riktlinjerna i IACUC av Presbyterian College. 1. Förvärva material som anges i tabell 1. 2. Montera 5 Shelf Chrome Enligt tillverkarens anvisningar. Detta kommer att användas för att hysa anslaget. 3. Konstruera vattenbehållaren och filtreringssystem (figurerna 1A och 2). Använda Figur 1A som en guide, layout de 18 liters hink, pump, filter och UV-lampa för att fastställa sl…

Representative Results

Konstruktion av pumpen och Flters System När racket monteras och ställa in det första steget är att bygga pumpen och filtersystem. Filtren är anslutna till systempumpen och är belägna ovanför bottennivån hos den första hyllan, vilket möjliggör enkel filter underhåll och utbyte. På samma sätt är UV-lampan är ansluten med PVC-rör till filtret och hålls på plats med plast buntband för att möjliggöra enkel byte av UV-lampan efter behov (Figur 4A). Omedelbart efter pump…

Discussion

Det huvudsakliga syftet med denna artikel är att visa att byggandet av en funktionell zebrafisk anläggning inte är komplicerad och kan byggas av nybörjare fiskforskare med minimal bygg kunskap. Dessutom artikeln visar att material för detta funktionella zebrafisk anläggning kan förvärvas lätt och kostnadseffektivt från lokala sällskapsdjur leverans butiker eller järnaffärer. När allt material och verktyg har förvärvat byggandet av systemet och fisketankar tar ungefär en arbetsdag. Den 72 tim första kö…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Författarna vill tacka Office of Research av Presbyterian College School of Pharmacy för finansiellt stöd för detta projekt genom de små Apotek Awards för forskning & Collaboration (SPARC) Award. Författarna tackar Mr John Smink, chef för Aquatic Animal Research Laboratory, Clemson University, Clemson, SC för hans tekniskt bistånd manuskript revidering.

Materials

Item Brand Quantity
74-in H x 48-in W x 18-in D 5-shelf Steel Freestanding Shelving Unit Style Selections 1
18-Gallon General Bucket/Tote Centrex Plastics: LLC Rugged Tote 1
6-Outlet Power Strip With 15-Ft. Cord Master Electrician 1
9-Watt UV Water Garden Clarifier FiIter and UV lamp Smartpond  1
Whole House Water Replacement Filter Whirlpool 6
Opaque Whole-House Pre-Filtration Housing Whirlpool 2
Thread Seal Tape William H Harvey 1
8-fl oz LO-VOC PVC Cement Oatey  1
8-fl oz LO-VOC Primer Oatey  1
1/4-in x 100-ft Vinyl Drip Irrigation Distribution Tubing Mister Landscaper  1
1/4-in Barbed Drip Irrigation On/Off Valve Mister Landscaper 33
9-Port NPT Irrigation Manifold with Filter  Mister Landscaper 6
Drop-In Filter with House  Whirlpool 6
2-in Dia 90-Degree PVC Elbow LASCO 3
2-in Dia 90-Degree Tee LASCO 3
3/4-in Dia 90-Degree Slip Elbow LASCO 15
3/4-in Dia PVC Adapter LASCO 7
3/4-in Dia PVC Tee LASCO 12
2-in Dia PVC Cap LASCO 3
1-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter LASCO 2
3/4-in PVC Socket In-Line Ball Valve American Valve 5
1/2-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter Lasco 8
3/4-in Dia PVC Cap Lasco 1
2-In x 5-Ft Pvc Pipe Charlotte Pipe 4
¾-In x 10-Ft Pvc pipe Charlotte Pipe 3
11/16×1-7/80 PVC ring SXT 10
½” PVC male adapter SXT 1
¾” PVC coupling  SXT 1
½” PVC female adapter  SXT 1
link
1.8 L Dual Beta Keeper Top Fin 27
¾” PVC male adapter (w/ #18 O-ring) SXT 28
90-degree ¾” threaded PVC elbow SXT 27
Fine Mesh N/A 1 yard
Bulkhead Connector N/A 1
Hacksaw N/A 1
Drill N/A 1
Hole saw N/A 1
Adjustable Wrench N/A 1
Pliers  N/A 1
Tape Measure N/A 1
Safety Glasses N/A 1
Work Gloves N/A 1

References

  1. Detrich, H., Westerfield, M., Zon, L. . The Zebrafish: Cellular and Developmental Biology, Part A.. , (2010).
  2. Grim, J. M., et al. Hemogen (hemgn), a transcription factor that regulates erythropoiesis and skeletogenesis in zebrafish. , (2013).
  3. Kim, S., Carlson, R., Zafreen, L., Rajpurohit, S. K., Jagadeeswaran, P. Modular, easy-to-assemble, low-cost facility. Zebrafish. 6 (3), 269-274 (2009).
  4. Linbo, T. L. Zebrafish (Danio rerio) husbandry and colony maintenance at the Northwest Fisheries Science Center. U.S. Dept. Commer., NOAA Tech. Memo. 62, (2009).
  5. Avdesh, A., et al. Regular care and maintenance of a zebrafish (Danio rerio) laboratory: an introduction. J Vis Exp. 69, 4196 (2012).
  6. McNabb, A., Scott, K., Ochsenstein, E., Seufert, K., Carl, M. Don’t be afraid to set up your fish facility. Zebrafish. 9 (3), 120-125 (2012).
  7. Garcia, R. L., Sanders, G. E. Efficacy of cleaning and disinfection procedures in a zebrafish rerio) facility. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (6), 895-900 (2011).
  8. Rivas-Boyero, A. A., et al. Pharmacological characterization of a nociceptin receptor from zebrafish (Danio rerio). J Mol Endocrinol. 46 (2), 111-123 (2011).
  9. Sanchez-Simon, F. M., Zhang, X. X., Loh, H. H., Law, P. Y., Rodriguez, R. E. Morphine regulates dopaminergic neuron differentiation via miR-133b. Mol Pharmacol. 78 (5), 935-942 (2010).
  10. Velasco, E. M., Law, P. Y., Rodríguez, R. E. Mu opioid from the zebrafish exhibits functional characteristics as those of mammalian mu opioid receptor. Zebrafish. 6 (3), 259-268 (2009).
check_url/51989?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Paige, C., Hill, B., Canterbury, J., Sweitzer, S., Romero-Sandoval, E. A. Construction of an Affordable and Easy-to-Build Zebrafish Facility. J. Vis. Exp. (93), e51989, doi:10.3791/51989 (2014).

View Video