绿脓杆菌引起的肺损伤模型
Summary
We have developed a mouse lung injury model by intra-tracheal injection of bacteria Pseudomonas aeruginosa. This model mimics lung injury during pneumonia and is clinically relevant.
Abstract
为了研究人的急性肺损伤和肺炎，它开发的动物模型来模拟这种疾病的各种病理特征是重要的。在这里，我们已经开发出通过气管内注射的细菌绿脓杆菌 （ 铜绿假单胞菌或PA）的小鼠肺损伤模型。利用该模型，我们能够显示肺部炎症损伤的早期阶段。此外，肺泡上皮屏障泄漏观察到通过分析支气管肺泡灌洗液（BAL）;并且观察到通过使用从受伤的肺组织制备TUNEL测定肺泡细胞死亡。在受伤后的稍后阶段，我们观察到所需的修复过程的细胞增殖。伤病得到了解决，从体育的开始7天后铜绿假单胞菌注射液。这个模型模拟的肺部炎症，损伤和修复的连续过程中的肺炎。这与临床相关的动物模型是适用于研究病理，修复机制中，following急性肺损伤，并且还可以用来测试潜在的治疗剂，这种疾病。
Introduction
肺部暴露于环境中的病原体，并很容易受到炎症和损伤1-3。在病理条件下，如肺炎或成人呼吸窘迫综合征（ARDS），病原体以及由白细胞释放炎性细胞因子诱导损伤的肺泡细胞1-3和死亡。它发展为急性肺损伤的动物模型，以促进损伤的病理修复的研究以及机制是很重要的。
目前，大多数人使用高氧和博来霉素诱导的小鼠肺损伤模型4。然而，氧的机制引起的损伤是不一样的肺炎或急性呼吸窘迫综合征5过程中出现的最常见的肺损伤。博莱霉素诱导的急性损伤是罕见的在临床方面4。在这里，我们报告使用气管内注射P的小鼠肺损伤模型铜绿假单胞菌 6,7。这个模型是临床上相关的，并且模仿在p这种情况发生以下肺炎8 rocesses。
由于免疫功能低下的人的机会，院内病原体，P.假单胞菌通常感染肺部，尿路，烧伤，创伤，并且还引起其他血液感染6。细菌释放出毒力因子外毒素A，乘，引发免疫反应6。 P的内部trachael管理假单胞菌反映到引起肺炎的细菌的情况，人体暴露和病理学可能是从最近报道流感病毒H1N1引起的肺损伤模型9不同。由于P.铜绿假单胞菌是一种条件致病菌，它是相对安全的处理相比，一些更致命的病原体。在这里，我们使用气管内注射给药的细菌，因为我们观察到，该方法引入更多的细菌进入肺的较远端肺泡区一些其他方法，例如通过口用的导管。
与其他急性肺损伤模型相比，P。这里描述绿脓杆菌模型适用于研究肺损伤的细菌和过度炎症反应。与使用P。等的动物模型铜绿假单胞菌诱发败血症10,11，这里我们使用气管内注入这些细菌诱发局部急性肺损伤。
Protocol
Representative Results
Discussion
我们在这里描述的假小鼠肺损伤模型模拟炎症，肺损伤，修复和解决发生的急性肺损伤或肺炎的全过程。它具有与其他几个损伤模型中，这是临床相关的和相对安全的和易于处理的比较独特的优势。
在该过程的关键步骤是，在注射细菌溶液必须是很慢的。如果注射过快，老鼠有可能被噎到死。一个成功的注射后，老鼠通常会显示几个深呼吸和喘息，这将有助于微粒进入肺部?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by National Institutes of Health grants HL105947-01 (YL), HL07829-16 (AM), HL090152 (AM).
Materials
| Name | Company | Catalog number | Comments |
| Anesthetic: Ketamin, xylazine, lidocaine, buprenorphine | pharmaceutical grade | ||
| 27g needle | Fisher | 1482648 | |
| syringe | Fisher | 14823434 | 1 ml |
| scissors | Fine Science tools | ||
| forceps | Fine Science tools | ||
| suture | Fisher | NC0147607 | |
| Eye gauge, glove, gown | |||
| Biosafety Cabinet | |||
| chlorine dioxide based sterilant | Clidox | ||
| sheep blood agar plates | Medex supply | HL-1160 |
References
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