新技术脱发的定量分析小鼠使用灰度分析
Summary
Alopecia is a common form of hair loss which can occur in many different conditions, including as a side-effect of chemotherapy. We have developed a method to quantify hair loss in mice, utilizing a standard gel imager to perform a grayscale analysis, to facilitate study of promising new alopecia therapies.
Abstract
脱发是它可以发生在许多不同的条件，包括男性型脱发，多囊性卵巢综合征和斑秃脱发的常见形式。脱发，也可能发生由于化疗的癌症患者的副作用。在这项研究中，我们的目标是开发一个一致的和可靠的方法来量化脱发小鼠，这将允许研究者准确地评估和比较新的治疗方法，这些不同形式的脱发。该方法利用一种标准的凝胶成像仪获取和处理的小鼠的图像，测量光吸收，这发生在粗糙成比例的黑色（或灰色）的头发上的鼠标的量。已量化以这种方式的数据然后可以使用标准的统计技术（ 即，方差分析，T检验）分析。这种方法是在化疗诱导的脱发，斑秃和脱发的小鼠模型从打蜡测试。在这份报告中，详细的协议是PRESented用于执行这些测量，其中包括来自C57BL / 6的验证数据和C3H /小鼠HeJ小鼠品系。这种新技术提供了许多优点，包括应用的相对简单性，依赖于设备这是在大多数研究实验室容易获得的，并且施加一个客观，定量评估这比主观评价更加健壮。改善头发生长的量化小鼠会改善脱发模型研究和促进有前途的新治疗方法的评价在临床前研究。
Introduction
脱发（脱发）可以是心理和情感上令人痛心的事件有多个原因。男性型脱发是脱发的最常见的原因，35岁1影响大约三分之二男性。脱发的一个类似的模式可以在女性多囊卵巢综合征被观察到。在这两种病症中，脱发是雄激素介导的。脱发也可发生自身免疫病，斑秃，从而影响人口2的1.7％。脱发可发生的一些医学治疗，如化疗3的副作用。化疗患者的高比例（65-85％）经历某种程度的脱发4,5。脱发的心理影响已经得到很好的研究，在化疗的设置。化疗引起的脱发会导致焦虑，抑郁，消极的身体形象，降低自尊和幸福6,7减少的感觉。高PE女性癌症患者rcentage（47-58％）认为脱发是化疗最痛苦的方面，以及高达8％的跌幅治疗恐惧脱发4,6。也有在雄激素性脱发的证据来支持治疗，以减少脱发8,9-心理甚至医学后果。同样，斑秃已报道有严重的心理后果2和脱发的斑片状性质可以导致更不愉快的美容效果比脱发的最其他原因。
虽然药物轻度抗雄激素效应（ 即，安体舒通）曾使用了有限的成功为治疗脱发，首先有效的药物治疗脱发的米诺地尔是10。这种降压具有引起毛发生长的观察副作用，现在用作局部治疗许多形式的脱发。然而，反应往往是不完整的，有些科目只显示缓慢荷兰国际集团的脱发，而不是实际的再生10。非那雄胺是一种竞争性拮抗剂II型5α还原酶其阻断睾酮转化为二氢睾酮，致使在局部全身雄激素阻断牺牲改善雄激素性脱发。应答率与长期（10年以上）的治疗是在50％左右11。总体而言，尽管相当多的研究在这方面，目前还没有适当的治疗脱发。
几十年来，科学家和临床医生已经检查测量的头皮头发生长的临床试验的方法。用的药物治疗脱发的发展，出现了用于测量头发的生长，并且具体地，对治疗的反应的可靠的，经济的和微创手段更加需要。图像分析技术对头发密度的患者的脱发症的准确定量，得到在过去的一致和有效的结果使用各种techniqu的ES，包括分析数字化图像12，每根毛发的图像分析和皮损13，和显微镜扫描量化毛传中定义的头皮区域14。
不幸的是，虽然上述的方法提供了效力的改进的评价对头发生长促进干预在临床试验中，这些方法还没有被应用到啮齿动物的研究中的临床前调查。我们的目标是开发一个一致的和可靠的方法来量化脱发小鼠，这将允许研究者能够更准确地评估和比较新的治疗方法对各种形式的脱发。我们已经开发使用的设备在大多数实验室，这将使头发密度的小鼠棕色或黑色的头发快速，可靠的量化一应俱全的方法。这种方法已在化疗诱导的脱发，斑秃，并从waxin脱发的小鼠模型被测试克。详细的协议提出了进行这些测量，包括C57BL / 6的验证数据和C3H /小鼠品系HeJ小鼠。作为这种技术依赖于从在毛干色素检测光的吸收，它不能被用于检测的毛发生长小白鼠或白化小鼠。
Protocol
Representative Results
Discussion
在这份报告中的详细描述，提供了一种新技术，用于量化脱发在啮齿类动物。此技术利用的凝胶成像仪进行图像采集和分析，设备这是在大多数实验室容易获得。测量已被证明是健壮到微小变化在技术（ 图4 – 5），并且是公相关，在治疗模型视觉毛发损失（ 图6）的程度。这些技术已被成功地用于在实验性疗法的评价为脱发17。
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Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
We would like to thank the Children’s Hospital at Montefiore, Department of Pediatrics, for providing support for these studies. We would like to thank the National Alopecia Areata Foundation for providing financial support for conducting studies with C3H/HeJ engrafted mice.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| KODAK Gel Logic 100 Imaging System | Eastman Kodak Company, Rochester, NY, USA | Gel imager for obtaining and analyzing photographs, must have built in light source for reflective photography. | |
| The Kodak/Tiffen Q-13 Gray Scale | Imatest, http://www.imatest.com/docs/q13/ | Greyscale standard | |
| C57BL/6J Mice | Jackson Laboratories, Bar Harbor, Maine | Mice for representative study | |
| C3H/HeJ engrafted mouse | Jackson Laboratories, Bar Harbor, Maine | Mice for representative study |
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