Vitreodynamic विश्लेषण के लिए पूरे शीशे हास्य विच्छेदन
Summary
The goal of this protocol is to show an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes.
Abstract
The authors propose an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes. While previous studies have shown the results of such dissections, the detailed steps have not been described, precluding researchers outside the field from replicating their methods. Other studies harvest vitreous either through aspiration, which does not maintain the vitreous structure anatomy, or through partial dissection, which only isolates the vitreous core. The proposed method isolates the whole vitreous body, with the vitreous core and cortex intact, while maintaining vitreous anatomy and structural integrity. In this method, a full thickness scleral flap in an enucleated porcine eye is first created and through this, the choroid tissue can be separated from the sclera. The scleral flap is then expanded and the choroid is completely separated from the sclera. Finally the choroid-retina tissue is peeled off the vitreous to leave an isolated intact vitreous body. The proposed vitreous dissection technique can be used to study physical properties of the vitreous humor. In particular, this method has significance for experimental studies involving drug delivery, vitreo-retinal oxygen transport, and intraocular convection.
Introduction
इस विधि के लक्ष्य के विस्तार के लिए vitreodynamic विश्लेषण के प्रयोजनों के लिए, एक शव आंख से, कांच का कोर और कॉर्टेक्स बरकरार साथ, एक पूरे बरकरार कांच का शरीर अलग करने के लिए एक तकनीक है। कांच का शरीर क्रिया विज्ञान के क्षेत्र में इस तरह के द्रव यांत्रिकी शोधकर्ताओं के रूप में, बहु-अनुशासनात्मक शोधकर्ताओं हो गया है, के रूप में, कांच का 1 की शारीरिक और biomechanical संपत्तियों की जांच कर रहे हैं। यह अंत करने के लिए, यह विस्तार करने के लिए बहु-अनुशासनात्मक शोधकर्ताओं सहायता करने के लिए पूरे बरकरार कांच का शरीर अलग करने के लिए एक तकनीक आवश्यक है।
Sebag एट अल। 2 और 3 अन्य मानव शव आंखों पर सुरुचिपूर्ण पूरे शीशे dissections प्रदर्शन किया और परिणाम के चित्र दिखाया। हालांकि, तकनीक का इस्तेमाल किया स्वतंत्र रूप से विधि को दोहराने में सक्षम नहीं होगा विस्तार और गैर-विशेषज्ञों में वर्णित नहीं किया गया था। अन्य अध्ययनों से इस तरह आकांक्षा या आंशिक विच्छेदन के रूप में सरल तरीकों का उपयोग कर शव आँखों से कांच का काटा हैदोनों जिनमें से एक पूरी बरकरार कांच का शरीर में परिणाम नहीं है। Gisladottis एट अल। 4 और जू एट अल। 5 शव आँखों से काटा शीशे हास्य में पारगम्यता की जाँच। कांच का निकासी की कोई विधि का वर्णन किया गया था हालांकि, बाद से, यह है कि वे एक सिरिंज के साथ कांच का हास्य aspirated मान लिया था कि। वत्स एट अल। 6 एक सर्जिकल तकनीक के साथ खरगोश शीशे हास्य को अलग-थलग करने की एक विधि का वर्णन करके एक कदम आगे चला गया। हालांकि, इस पद्धति बस कांच का कोर के एक अलगाव और नहीं कांच का कोर्टेक्स में यह परिणाम है। SKEIE एट अल। 7 बाद में 4 अद्वितीय क्षेत्रों में कांच का आयोजन किया और सुंदर ढंग से विश्लेषण के लिए प्रत्येक भाग काटना करने के लिए एक विधि का वर्णन किया। इस तकनीक हालांकि, एक पूरे के रूप में एक अक्षुण्ण शीशे में परिणाम नहीं करता है।
मौजूदा तकनीक वर्तमान में केवल शव आँखों में प्रदर्शन कर रहे हैं कि जैवभौतिक प्रयोगों की सुविधा के लिए विकसित किया गया था। पिछले विधियों, के रूप में वर्णित एकBove, 1) कोई भी पूरी तरह से पूरे कांच का शरीर अलग करने की वजह से सीमित कर रहे हैं, 2) काटा कांच का कोर और कॉर्टेक्स 3) कांच का शारीरिक संरचना को बनाए रखा नहीं है, homogenized हैं, या 4) विच्छेदन तकनीक पर्याप्त रूप से अन्य क्षेत्रों में शोधकर्ताओं द्वारा नकल के लिए विस्तृत नहीं कर रहे हैं । इसके अलावा, श्वेतपटल और रंजित, कांच का शरीर के दृश्य की अस्पष्टता के कारण अक्षुण्ण नेत्रगोलक में सीमित है। इस पूरे आंख के अंदर बनाया जा सकता है कि माप की शुद्धता और व्यवहार्यता की सीमा। इसके अलावा, कांच का आसपास के शारीरिक संरचनाओं शीशे के जैव रासायनिक और भौतिक गुणों के अध्ययन उलझाना कर सकते हैं।
हाल के वर्षों में, कांच का विज्ञान का शरीर काफी बड़ा हो गया है और पूरे कांच का शरीर अपनी अलग अलग हिस्सों से अलग गुण है कि विश्वास करने का कारण है। Vitreodynamics researc के लिए शीशे की शारीरिक, biomechanical, और रासायनिक गुणों की जांच में बढ़ती रुचि हैऐसी दवा वितरण, intravitreal oxygenation के 8 और vitrectomy के रूप में नैदानिक चिकित्सा में आवेदन किया है जो एच। कांच का हेरफेर करने के लिए pharmacologic एजेंटों का उपयोग करता है जो भेषज vitreodynamics, vitrectomy परिणामों 9 में सुधार करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। Biomechanical गुण intravitreal दवा वितरण प्रौद्योगिकियों 10-12 सुधार करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, जो कांच का द्रव का प्रवाह, मॉडल करने के लिए उपयोग किया जाता है। कांच के विभिन्न क्षेत्रों के भौतिक गुणों vitreo-रेटिना को ऑक्सीजन परिवहन 13 को समझने के लिए महत्वपूर्ण हैं। प्रस्तावित कांच का विच्छेदन तकनीक बरकरार शीशे हास्य के विभिन्न गुणों का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। यह पीठ टॉप प्रयोगों बेहतर दृश्य के साथ पूरे बरकरार कांच का शव पर किया जाना सक्षम बनाता है।
सारांश में, कांच का के अध्ययन के लिए मौजूदा तरीकों को या तो पर्याप्त रूप से वर्णित नहीं कर रहे हैं, या एक अधूरी अलगाव कांच का कोर और कोर्टेक्स में परिणाम। इसलिए, ई प्रदर्शन करने की जरूरत हैएक पारदर्शी आँख मॉडल में xperiments शव आंख में मौजूद है कि कांच की शरीर रचना विज्ञान बनाए रखते हुए।
Protocol
Representative Results
Discussion
ध्यान से कांच का विच्छेदन के दौरान प्रदर्शन किया जाना चाहिए कि दो महत्वपूर्ण कदम उठाए हैं। एक पूर्ण मोटाई स्क्लेरल फ्लैप बनाने चरण 3, पूरे विच्छेदन के लिए महत्वपूर्ण है। केयर पूर्ण मोटाई स्क्लेरल फ्ल?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge the following funding sources, Whittier Foundation, Harrington Foundation, National Institutes of Health and Research to Prevent Blindness.
Materials
| 0.3 forceps | Storz Opthalmics | E1793 | |
| Westcott Tenotomy Scissors Curved Right | Storz Opthalmics | E3320 R | |
| Scalpel Handle No. 3 | VWR | 25607-947 | |
| Scalpel Blade, #11, for #3 Handle | VWR | 470174-844 |
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