Summary

Asymmetrisk Walkway: A Novel Behavioral analyse for å studere asymmetrisk Locomotion

Published: January 15, 2016
doi:

Summary

Here, we present a protocol to quantify precise stepping in rodents. Cortical and the spinal central pattern generator signals are required for precise foot-placement during obstructed locomotion. We report here the novel constrained walking task that directly examines precise stepping behavior.

Abstract

Atferds analyser blir ofte brukt for vurdering av sensorisk svekkelse i sentralnervesystemet (CNS). De mest sofistikerte metoder for å kvantifisere lokomotoriske underskudd hos gnagere er å måle minutt forstyrrelser av ubegrenset gangart Ground (f.eks., Manuell BBB scorer eller automatisert Catwalk). Imidlertid er kortikale innganger ikke er nødvendig for generering av grunnleggende bevegelse frembringes av rygg sentrale mønstergenerator (CPG). Dermed ubegrensede, walking oppgaver teste lokomotoriske underskudd på grunn av motor kortikal fall bare indirekte. I denne studien foreslår vi en ny, presis fot-plassering muskel oppgave som evaluerer kortikale innganger til rygg CPG. En instrumentert peg-veis ble brukt til å pålegge symmetriske og asymmetriske lokomotoriske oppgaver mimicking lateralized bevegelse underskudd. Vi viser at turnus fra ekvidistante inter-steglengder på 20% til endringer i forbena holdning fasekarakteristikkene under bevegelse med preffeilet skrittlengde. Videre foreslår at den asymmetriske gangveien tillater målinger av atferds utfall produsert av kortikal styresignaler. Disse tiltakene er relevant for vurderingen av verdifall etter kortikal skade.

Introduction

Post-takts sykelighet i den gjenlevende befolkningen omfatter brutto motoriske svekkelser som utgjør en utfordring for kvantitativ vurdering i både mennesker starte hjerneslag og dyremodeller av neurologisk svekkelse 1. I klinisk setting, er disse motoriske vansker målt ved hjelp av subjektive kriterier som er mer følsomme for alvorlig heller enn moderat svekkelse utstilt ved de fleste pasienter. Tilsvarende slike subjektive vurderinger av etter skade motor atferd hos dyr er vanlig, f.eks., Basso, Beattie, og Bresnahan (BBB) ​​muskel skala metode 2,3. Mens disse subjektive evalueringsmetoder hjelper oversettelse mellom gangart rehabiliterings studier i quadruped dyremodeller og mennesker, er detaljene i motor underskudd forbundet med aktivitet av separate muskelgrupper ikke vurdert. Videre vurdering av motor kortikale bidrag til bevegelse, som den antatte skyldige av motor underskudd i cerebrovaskulær sykdom,kan bare oppnås indirekte selv ved hjelp av de nye automatiserte kvantitative metoder 4,5, som de er avhengige av open-feltet eller lineær walking oppgaver. Disse oppgavene krever ikke kortikal bidrag og kan utføres av de nevrale mekanismene i ryggmargen, dvs. det sentrale mønster generator (CPG) nettverk som er spart i de fleste dyremodeller av nevrale skade, f.eks spinalized dyr 6 -.. 8 . Essential kortikale bidrag til disse ryggmekanismer har blitt eksperimentelt innblandet i oppgaver som krever forventede postural justeringer 9 og nådde 10, samt presis pass 10.

Videre er de fleste nevrologiske skader asymmetrisk; for eksempel hjerneslag hemiparesis, dvs. svakhet på en side av kroppen, noe som resulterer i en asymmetrisk gangart 11 -. 14. Asymmetrien av hemiplegisk gangart er produsert av asymmetrisk spatiotemporal muskelaktivering viktigst manifestert i forkorting av extensor-assosiert holdning fase og forlengelsen av flexor-forbundet svingfasen av trinnet sykle på paretic side 15,16. Denne trenden har ennå ikke blitt utforsket gjennom en rekke locomotor hastigheter hos friske eller paretic dyr. I denne studien, benyttet vi analyse av fase varighet egenskaper 17 som beskriver forholdet mellom varigheten av sving eller holdning fasene som en funksjon av syklustid i hvert trinn. Den oppnådde lineær regresjonsmodell ble deretter ytterligere beskrevet med en analyse av asymmetri i alle lemmer.

Vi rapporterer en roman rimelig metode for å vurdere aktiviteten av synkende kortikale innganger i motorsystemet firbent dyr basert på en presis springbevegelses oppgave. Denne oppgaven er utformet for å utfordre motor cortex ved å pålegge krav til foten plassering over en naturlig rekke gang- hastigheter. I tilleggEr fot-krav til plassering manipulert til fortrinnsvis å utfordre venstre eller høyre side av motorsystem. I en tilsvarende bevegelses oppgave, Metz og Whishaw (2009) undersøkte forekomsten av svikt, antall tapte skritt på uregelmessig rung gangvei, hos rotter. Vår metode er gratis til dette tidligere studie, og det detaljer kvaliteten på fasekontroll i "vellykket" trinn 18.

Protocol

Følgende trening paradigmet syssels analyse av fasejusteringer av gjennomsnittlig voksen Sprague-Dawley rotte. Vennligst sørg for at protokollen beskrevet her er i samsvar med dine institusjonelle retningslinjer dyr omsorg. Alle prosedyrer i denne studien ble utført i samsvar med Institutional Animal Care og bruk Committee (IACUC) og Office for Laboratory Animal Welfare (OLAW) ved West Virginia University School of Medicine og retter seg etter National Institutes of Health retningslinjer for bruk av eksperimentell dy…

Representative Results

Figur 2 viser en analyse av asymmetri i de lokomotoriske oppgaver for en enkelt representativ emne. Verdiene ble beregnet for alle forhold ved bruk av ligning 1 og 2 fra alle pasientene individuelt (figur 2) og fra sammensatte data fra 8 Sprague-Dawley-rotter (250 – 400 g, Figur 3). Vanligvis, modulering av forbena holdning fase var mindre for den siden til hvilken bevegelse tilstand var foretrekkes (short ISL), i overensstemmelse med id…

Discussion

The rationale for this study was to develop a behavioral task that quantitatively assesses the changes in precise control of asymmetric locomotor behaviors. The existence of the spinal CPG has been functionally demonstrated for some time20, but the anatomical and functional characteristics that describe its mechanism as well as its modulatory inputs from descending or sensory feedback pathways have not been characterized until the past decade6,21,22. The current consensus is that the intrinsic spina…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Kriss Franklin, Amanda Pollard and Justine Shaffer assisted in animal training and data collection. Sarah Freeman and Alisa Ivanova contributed to data analysis. This study is supported by WVU School of Medicine Start-Up, NIH/NIGMS U54GM104942, and NIH CoBRE P20GM109098.

Materials

MATLAB® R2013a MathWorks Design platform for custom videoa video annotation software
Sony HDR-CX380/B High Definition Handycam Sony 27-HDRCX330/B Video acquisition device.
Jif Creamy Peanut Butter – Gluten Free 454 g J.M. Smucker Company NA Food reward stimulus.
Sucrose Tablet – Chocolate 1800 g TestDiet 1811256 Food reward stimulus.
Manzanita Wood Gnawing Sticks BioServe W0016 For presentation of food reward stimulus.

References

  1. Curzon, P., Zhang, M., Radek, R. J., Fox, G. B. . The Behavioral Assessment of Sensorimotor Processes in the Mouse: Acoustic Startle, Sensory Gating, Locomotor Activity, Rotarod, and Beam Walking. Methods of Behavior Analysis in Neuroscience.. , (2009).
  2. Basso, D. M., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. A sensitive and reliable locomotor rating scale for open field testing in rats. Journal of Neurotrauma. 12 (1), 1-21 (1995).
  3. Basso, D. M., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. Graded histological and locomotor outcomes after spinal cord contusion using the NYU weight-drop device versus transection. Experimental Neurology. 139 (2), 244-256 (1996).
  4. Li, S., Shi, Z., et al. Assessing gait impairment after permanent middle cerebral artery occlusion in rats using an automated computer-aided control system. Behavioural Brain Research. 250, 174-191 (2013).
  5. Vandeputte, C., Taymans, J. -. M., et al. Automated quantitative gait analysis in animal models of movement disorders. BMC Neuroscience. 11, 92 (2010).
  6. Yakovenko, S. Chapter 10 – A hierarchical perspective on rhythm generation for locomotor control. Progress in Brain Research. 188, 151-166 (2011).
  7. Giszter, S. F., Hockensmith, G., Ramakrishnan, A., Udoekwere, U. I. How spinalized rats can walk: biomechanics, cortex and hindlimb muscle scaling – implications for rehabilitation. Annals of the New York Academy of Sciences. 1198, 279-293 (2010).
  8. Smith, J. L., Edgerton, V. R., Eldred, E., Zernicke, R. F. The chronic spinalized cat: a model for neuromuscular plasticity. Birth Defects Original Article Series. 19 (4), 357-373 (1983).
  9. Yakovenko, S., Drew, T. A motor cortical contribution to the anticipatory postural adjustments that precede reaching in the cat. Journal of Neurophysiology. 102 (2), 853-874 (2009).
  10. Yakovenko, S., Krouchev, N., Drew, T. Sequential Activation of Motor Cortical Neurons Contributes to Intralimb Coordination During Reaching in the Cat by Modulating Muscle Synergies. Journal of Neurophysiology. 105, 388-409 (2011).
  11. Pizzi, A., Carlucci, G., Falsini, C., Lunghi, F., Verdesca, S., Grippo, A. Gait in hemiplegia: Evaluation of clinical features with the Wisconsin Gait Scale. Journal of Rehabilitation Medicine. 39 (9), 170-174 (2007).
  12. Bohannon, R. W., Horton, M. G., Wikholm, J. B. Importance of four variables of walking to patients with stroke. International Journal of Rehabilitation Research. 14 (3), 246-250 (1991).
  13. Richards, C., Malouin, F., Dumas, F., Tardif, D. Gait velocity as an outcome measure of locomotor recovery after stroke. Gait Analysis. Theory and Application. , 355-364 (1995).
  14. Thaut, M. H., McIntosh, G. C., Rice, R. R. Rhythmic facilitation of gait training in hemiparetic stroke rehabilitation. Journal of the Neurological Sciences. 151, 207-212 (1997).
  15. Hsu, A. -. L., Tang, P. -. F., Jan, M. -. H. Analysis of impairments influencing gait velocity and asymmetry of hemiplegic patients after mild to moderate stroke. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 84 (8), 1185-1193 (2003).
  16. Jansen, K., De Groote, F., Duysens, J., Jonkers, I. Muscle contributions to center of mass acceleration adapt to asymmetric walking in healthy subjects. Gait & Posture. 38 (4), 739-744 (2013).
  17. Halbertsma, J. M. The stride cycle of the cat: the modelling of locomotion by computerized analysis of automatic recordings. Acta physiologica Scandinavica. 521, 1-75 (1983).
  18. Metz, G. A., Whishaw, I. Q. The ladder rung walking task: a scoring system and its practical application. Journal of Visualized Experiments : JoVE. (28), 4-7 (2009).
  19. Hogg, R. V., Ledolter, J. Engineering Statistics. , (1987).
  20. Brown, T. G. The intrinsic factors in the act of progression in the mammal. Proceedings of the Royal Society of London. Series B, Containing Papers of a Biological Character. 84 (572), 308-319 (1911).
  21. Kiehn, O. Locomotor circuits in the mammalian spinal cord. Annual Review of Neuroscience. 29, 279-306 (2006).
  22. Blitz, D. M., Nusbaum, M. P. State-dependent presynaptic inhibition regulates central pattern generator feedback to descending inputs. The Journal of Neuroscience. 28 (38), 9564-9574 (2008).
  23. Martin, J. H., Ghez, C. Red nucleus and motor cortex: parallel motor systems for the initiation and control of skilled movement. Behavioural Brain Research. 28 (1-2), 271-223 (1998).
  24. Drew, T., Jiang, W., Kably, B., Lavoie, S. Role of the motor cortex in the control of visually triggered gait modifications. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 74 (4), 426-442 (1996).
  25. Drew, T., Andujar, J. -. E., Lajoie, K., Yakovenko, S. Cortical mechanisms involved in visuomotor coordination during precision walking. Brain Research Reviews. 57 (1), 199-211 (2008).
  26. Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).
  27. Uluç, K., Miranpuri, A., Kujoth, G. C., Aktüre, E., Başkaya, M. K. Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat. Journal of Visualized Experiments : JoVE. 48, e1978 (2011).
  28. Hackney, D. B., Finkelstein, S. D., Hand, C. M., Markowitz, R. S., Black, P. Postmortem Magnetic Resonance Imaging of Experimental Spinal Cord Injury Magnetic Resonance Findings versus In Vivo Functional Deficit. Neurosurgery. 35 (6), 1104-1111 (1994).
  29. Kjaerulff, O., Kiehn, O. Distribution of Networks Generating and Coordinating Locomotor Activity in the Neonatal Rat Spinal Cord In Vitro: A Lesion Study. The Journal of Neuroscience. 16 (18), 5777-5794 (1996).
  30. Liddell, E. G. T., Phillips, C. G. Striatal and pyramidal lesions in the cat. Brain. 69 (4), 264-279 (1946).
  31. Beloozerova, I. N., Sirota, M. G. The Role of the Motor Cortex in the Control of Accuracy of Locomotor Movements in the Cat. Journal of Physiology. 461, 1-25 (1993).
  32. Hill, K. D., Goldie, P. A., Baker, P. A., Greenwood, K. M. Retest reliability of the temporal and distance characteristics of hemiplegic gait using a footswitch system. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 75 (5), 577-583 (1994).
  33. Hillyer, J. E., Joynes, R. L. A new measure of hindlimb stepping ability in neonatally spinalized rats. Behavioural Brain Research. 202 (2), 291-302 (2009).

Play Video

Cite This Article
Tuntevski, K., Ellison, R., Yakovenko, S. Asymmetric Walkway: A Novel Behavioral Assay for Studying Asymmetric Locomotion. J. Vis. Exp. (107), e52921, doi:10.3791/52921 (2016).

View Video