Tromboembólica crônica Hipertensão Pulmonar e Avaliação da Função Ventricular Direita no Piglet

Summary

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) and Right Ventricular (RV) dysfunction were induced in piglets by progressive obstruction of the pulmonary arteries. Consequences were remarkably similar to those observed in CTEPH patients. This animal model would be a very useful tool for pathophysiology and therapeutic experiments on CTEPH and RV failure.

Abstract

Um modelo leitão original da tromboembólica crônica Hipertensão Pulmonar (TEPCH) associada do ventrículo direito (RV) disfunção crônica é descrito. Hipertensão pulmonar (PH) foi induzida em leitões de 3 semanas de idade por uma obstrução progressiva do leito vascular pulmonar. A ligadura da artéria pulmonar esquerda (PA) foi realizada pela primeira vez através de uma mini-toracotomia. Em segundo lugar, embolias semanais do lobo pulmonar inferior direita foram realizados sob orientação fluoroscópica com n-butil-2-cianoacrilato, durante 5 semanas. Pressão Arterial Pulmonar (PAP) medido pelo cateterismo cardíaco ritght dizer, aumentou progressivamente, bem como a pressão atrial direita e vascular pulmonar Resistências (PVR) após 5 semanas em comparação com animais sham. (RV) remodelação estrutural e funcional do ventrículo direito foram avaliados por ecocardiografia transtorácica (RV diâmetros, espessura da parede do VD, função sistólica do VD). Elastância RV e acoplamento RV-pulmonar foram avaliados por Pressão-Volume LoopsAnálise (PVL), com método da condutância. Estudo histológico do pulmão e do ventrículo direito também foram realizadas. Análises moleculares em RV tecidos frescos poderia ser realizada através de biópsias endomiocárdicas repetidas transcutânea. Doença microvascular pulmonar em territórios obstruídas e desobstruídas foi estudada a partir de biópsias pulmonares utilizando análises moleculares e patologia. Além disso, a fiabilidade e a reprodutibilidade foi associada com uma gama de PH gravidade em animais. A maioria dos aspectos da doença HPTEPC humano foram reproduzidas neste modelo, o que permite novas perspectivas para a compreensão dos mecanismos subjacentes (mitocôndrias, inflamação) e novas abordagens terapêuticas (, terapias celulares ou gene alvo) do ventrículo direito sobrecarregado, mas também microvascular pulmonar doença.

Introduction

Tromboembólica crônica Hipertensão Pulmonar (TEPCH) é um subtipo de hipertensão pulmonar (HP) devido à obstrução vascular pulmonar crônica cama por coágulos persistentes e organizados relacionadas com um ou mais agudas embolias pulmonares ^1-3. Uma combinação de doença microvascular obstrutiva e não-obstrutiva conduz a um aumento adicional da resistência vascular pulmonar ^4. O ventrículo direito tem de primeiro se adaptar com hipertrofia compensada para manter o débito cardíaco. Sem tratamento, o ventrículo direito dilata e falha ao longo do tempo. Na era moderna, PH continua a ser uma doença progressiva e muitas vezes fatal apesar do uso de terapias direcionadas modernos ^5. Muitos estudos têm mostrado que ventrículo direito (RV) adaptação à sobrecarga de pressão é o principal determinante da sobrevida em pacientes com HP. Por essa razão, a compreensão dos mecanismos subjacentes à transição de adaptação para remodelação RV maladaptive é uma peça fundamental para o tratamento e desenvolvimento de novas terapias. Porque PH é rara e amostras de tecido é quase inviável nesses pacientes frágeis, estudos experimentais são necessários. Além disso, estudos pré-clínicos são obrigatórios para verificar que uma droga com benefício na vasculatura pulmonar não causa prejuízo RV.

Durante muitos anos, diferentes modelos experimentais de PH e falência do VD foram desenvolvidos com vantagens e limitações ^6,7. Nos modelos de murino farmacológicos (Monocrotalina, SU5416, hipóxia), PH e falência do VD ocorrer secundária a uma inflamação maciça, isquemia ou estressor tóxico que pode induzir vários efeitos "lados" e viés na análise molecular percurso. Furthemore, biópsias endomiocárdicas RV em um modelo murino deve ser muito desafiador sem sacrificando o animal. Modelos cirúrgicos em animais maiores são mais fisiológica, mas não afetam a vasculatura pulmonar (bandagem pulmonar, shunt sistêmico-pulmonar) ou induzir PH aguda e RVF (embolia pulmonar aguda). O objetivo deste artigo é descrever um modelo original de hipertensão pulmonar tromboembólica crônica em leitão que é mais representativo do HPTEPC fisiopatologia. Este modelo animal de grande porte permite repetidas medições não-invasivos e invasivos normalmente realizados na prática clínica (cateterismo cardíaco direito) para acompanhar as mudanças na hemodinâmica pulmonar e função do VD.

Protocol

Este protocolo foi aprovado pelo comitê de ética local em experimentos com animais e pelo Comitê Institucional de Bem-Estar Animal da nossa instituição. Todos os animais receberam cuidados de acordo com os "Princípios de Laboratório Animal Care" formuladas pela Sociedade Nacional de Pesquisa Médica e do "Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório", elaborado pelo Instituto de Laboratório Recursos Animais e publicados pela National Institutes of Health (NIH Publication No. 86-23, re…

Representative Results

Viabilidade Este modelo leitão de hipertensão pulmonar pós-embólico crônica foi estabelecida em nosso laboratório em 2009-2010. Desde 2011, foram utilizados 70 leitões e realizamos 63 modelos completos. Em nossa experiência, a realização deste modelo exigido uma curva de aprendizado. Em relação à mortalidade, observamos 5 mortes não planejadas (7,1%), principalmente na primeira parte da nossa experiência. As duas etapas críticas fora…

Discussion

Como na prática clínica humana, o respeito das regras de assepsia é obrigatório durante todos os procedimentos cirúrgicos. No modelo original leitão HPTEPC descrito por O. Mercier et ai., A ligação da artéria pulmonar esquerda foi realizada após a abertura do pericárdio, através de uma esternotomia mediana ^14. Porque o pericárdio foi deixado aberto, a interação entre o ventrículo direito eo pericárdio foi prejudicada e insuficiência cardíaca direita foi adiada. Efeito adverso de au…