髓内锁钉股骨截骨标准化固定用于分析正常和有缺陷的骨愈合小鼠
Summary
This protocol describes an osteosynthesis technique using an intramedullary locking nail for standardized fixation of femur osteotomies, which can be used to analyze normal and defective bone healing in mice.
Abstract
骨愈合模型是新的治疗策略的发展为临床骨折的治疗是必不可少的。此外，小鼠模型正在成为创伤研究更常用。它们提供了大量的突变株和抗体对骨愈合的高度分化的过程背后的分子机制的分析。为了控制生物力学环境，规范和良好的特点接骨技术在小鼠强制性的。在这里，我们的设计和使用的髓内钉的报告在小鼠体内稳定开放股骨截骨。钉，由医用级不锈钢的，提供高的轴向和旋转刚度。所述植入物进一步允许的限定，恒定截骨间隙创建尺寸从0.00毫米到2.00毫米。髓内锁定股骨截骨钉镇定的0.00和0.25mm间隙尺寸导致通过软骨内和膜内ossificat足够骨愈合离子。与萎缩性不愈合2.00毫米结果的间隙大小股骨截骨的镇定。因此，髓内锁钉可在愈合和未愈合的机型。使用相比其他开放骨愈合模型指甲的另一优点是，以充分修正骨代用品和支架为了研究骨整合的过程中的可能性。使用该髓内钉的缺点是愈创手术过程，固有相比封闭模型所有打开的程序。另一个缺点可能是骨髓腔一定的伤害的诱导，固有相比髓外稳定程序的所有髓内稳定技术。
Introduction
骨愈合的生物学可在体外使用细胞和球体培养物进行研究，但它也需要在体内使用动物研究的方法。而大的动物实验还处于临床前试验中发挥重要作用，产品或假设早期测试已经在过去的10年变化，并且现在通常在小动物模型1进行。有几个原因，进行这一切换。生产和小鼠和大鼠的维护都比较便宜猪和羊。此外，小动物具有较短再现时间和更短的正常愈合期间，这两种促进大系列慢性实验的性能。最后，基因靶向的动物和特异性抗体的可用性允许在骨愈合的分子机制的分析。然而，虽然预先在较大的动物模型用于骨接合术的技术可以用最小variat翻译从人或兽医临床病人的护理，在小尺寸的大鼠和小鼠的发展和骨接合术的技术应用中使用类似的程序离子竟然是具有挑战性的。
这是众所周知的，该生物力学环境显著影响骨愈合过程2。从骨折愈合在人类已知的，在治疗的不同的模式，包括与micromovements较小刚性固定后固定牢靠和软骨内骨化后膜内成骨骨折的稳定结果的差异。完整的轴向或旋转不稳定可能延迟愈合过程或可能导致非工会3。因此，我们认为，有必要制定在小鼠和大鼠复杂植入系统和接骨技术。以这种方式，生物力学条件可以适当地标准化，以保证有效的结果分析愈合过程时。
e_content“>虽然有相当数量的高度复杂的鼠稳定技术已在过去的几年中已经引入，最常用的技术仍是简单的髓内钉。这个技术的主要缺点，但是，是缺乏的旋转和轴向稳定性4，为了提高旋转和轴向稳定性，髓内螺钉被引入，以稳定在小鼠中5股骨骨折。然而，螺钉固定，不能用来分析骨缺陷的愈合由于需要在接触和压缩所述骨碎片之间为了保持旋转稳定性。髓内锁钉提供更高的轴向和旋转稳定相比简单的引脚和髓内螺钉4。高度重复性的股骨截骨术，可能的，因为指南的吉利锯，并创造界定的间隙大小的能力，允许正常苯教的分析Ë愈合和骨愈合不良6。由于联锁销的插入，髓内锁钉保证在整个治疗过程中的恒定间隙的大小，即使在轴承全部重量。这里，我们的设计和髓内锁定钉的应用报告，以及它的优点，以及对正常和延迟骨愈合实验研究的缺点。
Protocol
Representative Results
Discussion
手术技术的最重要的步骤是钉，瞄准装置，和销的正确定位。钉已被完全插入到在骨钉的远端标记缩进，因为钉的突出成在髁的水平的膝关节可以限制膝关节（ 图3A）的移动。因此，股骨的大小，因此，动物的体重，必须加以考虑。外科医生还应该特别注意的瞄准装置安装钉的连接法兰的最终位置。这保证了截骨总是在一个相同的中段位置。最后，联锁销必须被完全bicortically插入，?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
这项工作是由RISystem AG，达沃斯，瑞士的支持。
Materials
| MouseNail | RISystem AG | 221,122 |
| MouseNail aiming device | RISystem AG | 221,201 |
| MouseNail interlocking pin | RISystem AG | 221,121 |
| Centering bit | RISystem AG | 592,205 |
| Drill bit | RISystem AG | 590,200 |
| Gigli wire saw | RISystem AG | 590,100 |
| Suture (5-0 Prolene) | Ethicon | 8614H |
| Forceps | Braun Aesculap AG &CoKG | BD520R |
| Dressing forceps | Braun Aesculap AG &CoKG | BJ009R |
| Scissors | Braun Aesculap AG &CoKG | BC100R |
| Needle holder | Braun Aesculap AG &CoKG | BM024R |
| 24G needle | BD Mircolance 3 | 304100 |
| 27G needle | Braun Melsungen AG | 9186182 |
| Scalpel blade size 15 | Braun Aesculap AG &CoKG | 16600525 |
| Pincers | Knipex | 7932125 |
| Heat radiator | Sanitas | 605.25 |
| Depilatory cream | Asid bonz GmbH | NDXZ10 |
| Eye lubricant | Bayer Vital GmbH | 2182442 |
| Xylazine | Bayer Vital GmbH | 1320422 |
| Ketamine | Serumwerke Bernburg | 7005294 |
| Tramadol | Grünenthal GmbH | 2256241 |
| Disinfection solution (SoftaseptN) | Braun Melsungen AG | 8505018 |
| CD-1 mice | Charles River | 22 |
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