Protocol
1. Эшафот Fabrication
- Измельчите NaCl в лабораторном смесителе в течение 20 мин и высушить его на нагреватель при 100 ° С.
- Помещенный высушенного NaCl (45 г в момент времени) в просеивание в течение 30 минут при самой высокой возможной частоты без происходящих в резонансе. Сбор шесть солевые фракций, в пределах от 500 мкм до 1000 мкм (М 500); от 300 мкм до 500 мкм (М 300); от 100 мкм до 200 мкм (М 100); от 90 мкм до 100 (М 90); от 45 мкм до 65 мкм (М 45) и , наконец , M 10 с содержанием соли частиц размером менее 45 мкм , как схематизированы на рисунке 1.
- Вакуум высохнуть в течение ночи все материалы, с тем чтобы избежать гидролитического расщепления во время обработки. Для каждого материала, выбрать температуру, чтобы максимизировать степень сушки без преодоления - в случае полимеров - перехода стекла. Таким образом, выбор T = 90 ° C для PLA и Т = 25 ° C для PEG, Т = 105 ° С в течение NaCl.
- КормPLA, ПЭГ и NaCl, с весовой процент состава 20/5/75 соответственно, к эксплуатации смеситель периодического действия при Т = 190 ° С и п = 60 оборотов в минуту и затем обработать их до достижения постоянного значения крутящего момента, как правило, после того, как о 10 минут. После этого, быстро собрать полученный материал.
- Подготовьте монослоя с помощью лабораторного пресс, работающий при температуре 210 ° С, положить смесей в соответствующих цилиндрических формах с диаметром 10 мм и высотой 3 мм и держать их в течение 60 секунд при давлении окружающей среды и 3 мин при давлении 180 бар , После охлаждения смеси при комнатной температуре, поддерживая давление 180 бар.
- Сборка из трех слоев с помощью компрессионного формования
- Подготовка каждого один слой таким же образом, что и описанный в (1.5), но с использованием различных форм, т.е., имеющий диаметр 10 мм и высотой 1 мм. И, наконец, получить 6 дисков, имеющих диаметр 10 мм и высотой 1 мм, содержащий шесть различных размеров частиц: М 500, М 300, М 100,
- FoR сборки трехслойный подмости А (TLS-А), накопиться M 500, M 300 и M 100 внутри цилиндрической формы и компрессионного формования их в лабораторной пресс, работающий при температуре 210 ° С в течение 60 с при давлении окружающей среды и 3 минуты при 180 бар и затем охлаждают при комнатной температуре, поддерживая давление 180 бар.
Примечание: Подготовка TSL B путем укладки друг на друга М 90, М 45 и М 10 в тех же пресс-форм и проведения спрессованных операции, следуя той же процедуре, что используется для TLS А.
- Удалите диски из цилиндрических пресс-форм и поместить их в кипящей деминерализованной водяной бане с, без перемешивания. 3 ч после того, как, уводит полученную пористую структуру из ванны и дайте им высохнуть в течение 12 часов при комнатной температуре в химическом колпаком.
2. морфологический анализ
- Оценка морфологией каркасах с помощью сканирующей электронной микроскопии.
- Ломайте образцы под жидким азотом, а затем прикрепитеОбразцы на алюминиевой заглушкой, используя клейкую ленту. углеродную Наконец, бормотать-Coate с золотом в течение 90 секунд в атмосфере аргона до визуализации во избежание электростатического разряда во время испытания.
3. Эшафот Размер пор
- Выработать изображения, полученные с помощью анализа SEM с программным обеспечением для обработки изображений, способного распознавать распределение пор по размерам эшафота.
Примечание: В данной работе проведен анализ распределения пор по размерам был проведен с использованием MATLAB на основе программного обеспечения , ранее описанный 33
4. Пористость
- Взвесьте образцы перед выщелачиванием и оценить теоретическую пористость в соответствии со следующим выражением:
Примечание: М NaCl, м PEG и м PLA, соответственно теоретическая масса NaCl, ПЭГ и ПЛА, в предположении однородных смесей. Tон плотности (ρ) из NaCl, ПЭГ и PLA соответственно 2,16 г / см 3, 1,12 г / см 3 е 1,24 г / см 3. - Взвешивание образцов после промывки и сушки для того , чтобы оценить кажущуюся плотность образцов (ρ каркасных), а затем оценить реальную пористость в виде обратной величины соотношения между кажущейся плотности помост и плотности непористого PLA путем используя выражение (2).
ПРИМЕЧАНИЕ: Это выражает отношение между пустой объем строительных лесов и полного объема строительных лесов (пустой + полный).
5. Механические свойства
- Тестирование образцов в режиме сжатия с использованием разрывной машины, оснащенный 1 кН динамометр. Установить постоянную скорость деформации 1 мм мин -1.
- Для исследования механических характеристик образцов в физиологической среде, оборудовать dynamometeR с ванной, содержащей (PBS), (рН = 7,4) при температуре 37 ° С и проводили тест с той же установке, что и описанный в пункте 5.1.
- Перед каждым измерением во влажной среде, замочить образцы с PBS в вакуумной колбе, в течение 5 мин, чтобы позволить PBS заполнить все поры. После этого позволить каркасы остаться в PBS при 37 ° С в течение 15 мин, чтобы достичь заданной температуры.
- Определить межфазное прочность сцепления (IAS) между слоями TL A и TL B с помощью специально разработанной межфазное испытания на прочность оборудования, подключенного к механической испытательной машины следуя методике , описанной в литературе 32,34.
- Закрепите леску на буровой установке и обеспечить его правильное совмещение с тензодатчика и базовой плиты машины. Приложить образцы строительных лесов к испытанию алюминиевых заглушек с помощью клея высокой вязкости и поместить их в оборудование для тестирования.
- Для условия испытания мокрой, увлажняют образцы в PBS в течение 1 ч ПОИили для тестирования. С помощью 1 кН динамометрический элемент, под растягивающей нагрузкой , приложенной скорости деформации 1 мм мин -1.
Примечание: Примите во внимание, что сбой может происходить либо на предел прочности на растяжение одного из слоев или из-за отслоения на границах раздела. Оценка МСФО в качестве максимальной прочности кривой напряженно-деформированного состояния.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Влияние NaCl размера частиц на поровой архитектуры каркасах оценивали качественно и количественно с помощью исследования морфологии образцов и расчета распределения пор по размерам методом анализа изображений, соответственно , рис 2а - е . Показывает SEM микрофотографии моно-слоистые каркасах в результате от соленого выщелачивания материалов, содержащих различные размеры частиц NaCl.
Более подробно, М 500 (рис 2а) показал поры со средним диаметром 500 мкм, вероятно , из - за поломки солевых частиц диаметром более 500 мкм , во время смешения в расплаве. Как отчетливо видно из того же рисунка, пор архитектура характеризуется низким числом нерегулярных пор, слабо связанных между собой, окруженных стенками около 10 мкм. 2б сообщает морфологию М 300. В этомслучай, были обнаружены поры проявляют средний диаметр в пределах того же диапазона частиц соли, заполненных во время смешивания расплава (300-500 мкм), тем самым подтверждая, что никакой поломки частиц не происходило в процессе смешивания расплава. были обнаружены стенки пор быть тоньше (около 5 мкм), чем наблюдаемые в M 500 слое. М 100, (фиг.2с), показывает бимодальное пористую структуру, характеризующуюся гетерогенной сети , состоящей крупными порами (100-200 мкм) , окруженную более мелких. Эта архитектура пор обеспечивает лучшую взаимосвязанность и повышенную плотность пор для единицы объема, хотя и определяют резкое истончение толщины стенок. Морфология M 90, при условии , на рисунке 2d, показывает примерно кубических поры, равномерно распределены по всей полимерной матрице, из - за меньшего размера диапазона соли (90-100 мкм) , используемой в данном случае. Микропор из-за ПЭГ сольватации присутствовали в качестве микро-туннелей внутри стен, которые, по сути, выглядят очень грубо. SEМ микрофотография М 45, как показано на рисунке 2Е, имеет высокую плотность пор, что диаметры в диапазоне от 45 мкм до 65 мкм. М 10 (рис 2F) отображается самая высокая плотность пор на единицу объема, средний размер пор приблизительно равен 20 мкм, с высокой степенью взаимосвязи и очень тонких (<1 мкм) стенками.
На рисунке 3a, а ', а "показывает поперечное сечение TLS А, после того, как процесс выщелачивания, при разных увеличениях. На фиг.3а можно четко определить три слоя, каждый из которых характеризуется различным средним размером пор, в то время как панели а 'и а "относятся к М 100 М-300 и М 300-М областей 500 интерфейса, соответственно. Как ясно видно, все устройство не представляет каких-либо внутренних расколов, ни матрица разрыва между различными слоями. Аналогично, TLS - B и связанные с ними интерфейсы представлены на рисунке 3b, B ',б ". Изображения показали , морфологию , аналогичную TLS А. Действительно, три слоя с порами различных размеров могут быть легко узнаваемы (панель B), в то время как оба М 10-М 45 (панель B ') и М 45-М 90 (панель б ") межфазных областей выставлены не шелушения, ни разрыва. Как и следовало ожидать, каждый один слой имеет ту же архитектуру пор после сборки и промывных ступеней.
Таблица 1 сообщает сжимающей модули упругости материалов, измеренный в воздухе (сухой) и в PBS (влажной) среде. Это свойство было обнаружено, что следовать монотонный рост со средним размером пор. Модули упругости конечных устройств в основном определяются их соответствующими слабым слоем (т.е. M 100 для TLS A и M 10 для TLS B) для обоих двухуровневые исследованы. Таблица 2 докладов IAS для TLS A и TLS B в сухой и влажной среде , Не наблюдалось Межслоевые расслаивание явления, так как сбойвсегда имели место в середине самых слабых слоев TLS A (M 100) и TLS B (M 10). TLS Изображаемая лучший IAS производительность.
Рисунок 1:. Схематическое NaCl гранулометрии гранулометрии просеянные частиц NaCl и соответствующих кодов образца.
Рисунок 2: Морфология однослойных каркасах SEM микрофотографии однослойных каркасах , характеризующихся различными распределениями размер пор:. М 500 (а), шкала бар = 400 мкм; M 300 (б), масштаб бар = 400 мкм; M 100 (с), масштаб бар = 400 мкм; M 90 (d), масштаб бар = 200 мкм; М 45 (е), Scale = 400 бар81; м . И М 10 (е), масштаб бар = 100 мкм Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
. Рисунок 3: Морфология трехслойных строительных лесов (а, а ', а' ') СЭМ микрофотографии трехслойного типа подмости A (TLS A): (а) все сечение, масштаб бар = 500 мкм; (А ') М 100-М 300 интерфейс, масштаб бар = 250 мкм; (А '') 500 интерфейс M 300-М, масштаб бар = 250 мкм. (Ь, Ь ', Ь' ') СЭМ микрофотографии трехслойного типа строительных лесов B (TLS B): (б) все сечение, масштаб бар 500 мкм; (Б ') М 10-М 45 интерфейс, масштаб бар; = 100 мкм; (Б '') 90 Интерфейс М 45-М, масштаб бар = 100 мкм. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
| Образец кода | Сухой - Е (МПа) | Wet - Е (МПа) |
| M 500 | 40,33 ± 6,04 | 33,23 ± 4,96 |
| M 300 | 37,62 ± 6,89 | 31,42 ± 5,83 |
| M 100 | 32,12 ± 5,11 | 28,03 ± 4,04 |
| M 90 | 30,87 ± 4,93 | 26,91 ± 3,79 |
| M 45 | 25,36 ± 5,82 | 22,83 ± 5,01 |
| M 10 | 21 0,76 ± 3,91 | 19,87 ± 3,93 |
| TL | 33,08 ± 5,21 | 29,55 ± 4,09 |
| TL B | 22,31 ± 5,46 | 20,54 ± 3,87 |
Таблица 1: Компрессионные механические результаты при сжатии модуля Юнга моно- и трехслойных каркасах с различными размерами пор в мокрой и сухой среде.. Значения приведены в качестве средства ± SD.
| Образец кода | Сухие - МСФО (кПа) | Влажные - МСФО (кПа) |
| TL | 350,8 ± 51,2 | 299,6 ± 35,1 |
| TL B | 262,3 ± 62,2 | 220,5 ± 31,3 |
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Первый важный шаг заключается в оптимизации эффективности просеивания. Высокий контроль размера частиц NaCl является основой для подготовки строительных лесов с требуемым распределением пор по размерам. Другим важным шагом является избежать перелома тонких монослоев PLA во время извлечения образца из формы. Анализ обработки изображений не может быть представителем всего устройства.
Во время испытаний на растяжение, образец может оторваться от оборудования.
Перед просеиванием шаг, установить, что соль была хорошо сушат для того, чтобы получить более высокий контроль над размером частиц NaCl. Этот вопрос имеет важное значение, особенно для самого маленького размера частиц соли, из-за его чрезвычайно высокой гигроскопичностью. Перед формованием под давлением стадии, нанесите тонкий тефлоновый напыление на пресс-формах, с тем чтобы облегчить удаление образца из пресс-форм. Анализ обработки изображений должен осуществляться с учетом различных снимков, сделанныхиз разных регионов на эшафот, чтобы убедиться, что они являются репрезентативными для всего устройства. И, наконец, до испытания на растяжение (особенно те проводили во влажной среде), тщательно проверить клей к образцу адгезии.
Основным ограничением метода заключается в невозможности получить непрерывный градиент размера пор. В самом деле, этот метод описан в данном документе позволяет достичь дискретный градиент размера пор, так как он основан на сборке различных слоев. В большинстве случаев, четко определенная многослойная леска может быть предпочтительно непрерывно градуированных один, но не всегда. Это ограничение может быть частично превышены за счет увеличения числа слоев, что в свою очередь приведет к более тонкие слои, очевидно, труднее работать.
В отличие от многих других технологий производства, стратегия здесь принята можно считать экологически чистой, так как он не требует какого-либо токсического растворителя потенциально опасногодля окружающей среды и для живых клеток и тканей. Кроме того, выщелачивание в виде частиц обеспечивает высокий уровень контроля по размером пор и пористостью, настраивая соответственно размер и количество NaCl смешан с PLA.
Будущие достижения этой методики опираются на возможность собрать слои, представляющие другие химио-физические различия. Например, можно собрать различные биополимеры или усиливают каждый слой с различными наночастицами, такими как гидроксиапатит 28, nanocellulose 27, графена 35 или его производные 9,36,37, чтобы обеспечить еще больше функциональных возможностей 38. На самом деле, этот метод обеспечивает высокий контроль таким образом, что позволяет легко настроить каждый участок многослойной помост. Эта проблема играет решающую роль в ОИТ, так как наличие нескольких фазическими и / или анизотропной биологических структур, которые постепенно переходить от одной ткани к другой, являются типичными особенностями тканей интерфейса, такие как связки-к-бодин, сухожилие к кости и хрящи к кости.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Poly(lactic acid) | NatureWorks | PLA 2002D | |
| Poly(ethylene glycol) | Sigma | 83797-1KG-F | |
| Sodium Cloride | Sigma | 793566-5KG-D | |
| Phosfate Buffer Solution | Sigma | P5368-10PAK | |
| Laboratory Mixer | Brabender | PLE 330 - Plasticorder | |
| Laboratory Press | Carver | ||
| Scanning Electron Microscopy | Phenom-world | ProX | |
| Universal Testing Machine | Instron | 3365 (UK) | |
| BioPuls Bath | Instron, Norwood | ||
| Sieving Machine | Endecotts | E.V.F.1. | |
| Vacuum Oven | ISCO | NSV9035 | |
| Precision Balance | Sartorius | AX224 |
References
- Scaffaro, R., Morreale, M., Lo Re, G., Mantia, F. P. La Degradation of Mater-Bi®/wood flour biocomposites in active sewage sludge. Polymer Degradation and Stability. 94 (8), 1220-1229 (2009).
- Scaffaro, R., Botta, L., Passaglia, E., Oberhauser, W., Frediani, M., Di Landro, L. Comparison of different processing methods to prepare poly(lactid acid)-hydrotalcite composites. Polymer Engineering & Science. 54 (8), 1804-1810 (2014).
- Thakur, V. K., Thakur, M. K. Recent advances in graft copolymerization and applications of chitosan: A review. ACS Sustainable Chemistry and Engineering. 2 (12), 2637-2652 (2014).
- Thakur, V. K., Thakur, M. K. Recent advances in green hydrogels from lignin: A review. International Journal of Biological Macromolecules. 72, 834-847 (2015).
- Thakur, V. K., Kessler, M. R. Self-healing polymer nanocomposite materials: A review. Polymer. 69, 369-383 (2015).
- Thakur, V. K., Thakur, M. K. Recent trends in hydrogels based on psyllium polysaccharide: a review. Journal of Cleaner Production. 82, 1-15 (2014).
- Voicu, S. I., Condruz, R. M., et al. Sericin Covalent Immobilization onto Cellulose Acetate Membrane for Biomedical Applications. ACS Sustainable Chemistry & Engineering. 4 (3), 1765-1774 (2016).
- Scaffaro, R., Botta, L., Sanfilippo, M., Gallo, G., Palazzolo, G., Puglia, A. M. Combining in the melt physical and biological properties of poly(caprolactone) and chlorhexidine to obtain antimicrobial surgical monofilaments. Applied Microbiology and Biotechnology. 97 (1), 99-109 (2013).
- Scaffaro, R., Maio, A., et al. Synthesis and self-assembly of a PEGylated-graphene aerogel. Composites Science and Technology. 128, 193-200 (2016).
- Scaffaro, R., Botta, L., Gallo, G., Puglia, A. M. Influence of Drawing on the Antimicrobial and Physical Properties of Chlorhexidine-Compounded Poly(caprolactone) Monofilaments. Macromolecular Materials and Engineering. 12 (300), 1268-1277 (2015).
- Scaffaro, R., Lopresti, F., et al. Effect of PCL/PEG-Based Membranes on Actinorhodin Production in Streptomyces coelicolor Cultivations. Macromolecular bioscience. 16 (5), 686-693 (2016).
- Scaffaro, R., Lopresti, F., Botta, L., Rigogliuso, S., Ghersi, G. Melt Processed PCL/PEG Scaffold With Discrete Pore Size Gradient for Selective Cellular Infiltration. Macromolecular Materials and Engineering. 301 (2), 182-190 (2016).
- Yousefi, A. -M., Hoque, M. E., Prasad, R. G. S. V., Uth, N. Current strategies in multiphasic scaffold design for osteochondral tissue engineering: A review. Journal of Biomedical Materials Research Part A. 103 (7), 2460-2481 (2015).
- Gillette, B. M., Rossen, N. S., et al. Engineering extracellular matrix structure in 3D multiphase tissues. Biomaterials. 32 (32), 8067-8076 (2011).
- Seidi, A., Ramalingam, M., Elloumi-Hannachi, I., Ostrovidov, S., Khademhosseini, A. Gradient biomaterials for soft-to-hard interface tissue engineering. Acta Biomaterialia. 7 (4), 1441-1451 (2011).
- Son, J. S., Kim, S. G., et al. Hydroxyapatite/polylactide biphasic combination scaffold loaded with dexamethasone for bone regeneration. Journal of Biomedical Materials Research - Part A. 99 (4), 638-647 (2011).
- Sundararaghavan, H. G., Burdick, J. A. Gradients with depth in electrospun fibrous scaffolds for directed cell behavior. Biomacromolecules. 12 (6), 2344-2350 (2011).
- Zou, B., Liu, Y., Luo, X., Chen, F., Guo, X., Li, X. Electrospun fibrous scaffolds with continuous gradations in mineral contents and biological cues for manipulating cellular behaviors. Acta biomaterialia. 8 (4), 1576-1585 (2012).
- Nedjari, S., Schlatter, G., Hébraud, A. Thick electrospun honeycomb scaffolds with controlled pore size. Materials Letters. 142, 180-183 (2015).
- Yusong, P., Qianqian, S., Chengling, P., Jing, W. Prediction of mechanical properties of multilayer gradient hydroxyapatite reinforced poly(vinyl alcohol) gel biomaterial. Journal of Biomedical Materials Research - Part B Applied Biomaterials. 101 (5), 729-735 (2013).
- Kim, Y. B., Kim, G. Functionally graded PCL/β-TCP biocomposites in a multilayered structure for bone tissue regeneration. Applied Physics A: Materials Science and Processing. 108 (4), 949-959 (2012).
- Sudarmadji, N., Tan, J. Y., Leong, K. F., Chua, C. K., Loh, Y. T. Investigation of the mechanical properties and porosity relationships in selective laser-sintered polyhedral for functionally graded scaffolds. Acta biomaterialia. 7 (2), 530-537 (2011).
- Molladavoodi, S., Gorbet, M., Medley, J., Kwon, H. J. Investigation of microstructure, mechanical properties and cellular viability of poly(L-lactic acid) tissue engineering scaffolds prepared by different thermally induced phase separation protocols. Journal of the mechanical behavior of biomedical materials. 17, 186-197 (2013).
- Oh, S. H., Kim, T. H., Il Im, G., Lee, J. H. Investigation of pore size effect on chondrogenic differentiation of adipose stem cells using a pore size gradient scaffold. Biomacromolecules. 11 (8), 1948-1955 (2010).
- Lin, L., Gao, H., Dong, Y. Bone regeneration using a freeze-dried 3D gradient-structured scaffold incorporating OIC-A006-loaded PLGA microspheres based on β-TCP/PLGA. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 26 (1), 3 (2015).
- Yoo, D. Heterogeneous minimal surface porous scaffold design using the distance field and radial basis functions. Medical engineering & physics. 34 (5), 625-639 (2012).
- Soon, Y. -M., Shin, K. -H., Koh, Y. -H., Lee, J. -H., Choi, W. -Y., Kim, H. -E. Fabrication and compressive strength of porous hydroxyapatite scaffolds with a functionally graded core/shell structure. Journal of the European Ceramic Society. 31 (1-2), 13-18 (2011).
- Scaffaro, R., Lopresti, F., Botta, L., Maio, A. Mechanical behavior of Polylactic acid/Polycaprolactone porous layered functional composites. Composites Part B: Engineering. 98, 70-77 (2016).
- Halili, A. N., Hasirci, N., Hasirci, V. A multilayer tissue engineered meniscus substitute. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 25 (4), 1195-1209 (2014).
- Bai, H., Wang, D., et al. Biomimetic gradient scaffold from ice-templating for self-seeding of cells with capillary effect. Acta Biomaterialia. 20, 113-119 (2015).
- Algul, D., Sipahi, H., Aydin, A., Kelleci, F., Ozdatli, S., Yener, F. G. Biocompatibility of biomimetic multilayered alginate-chitosan/β-TCP scaffold for osteochondral tissue. International Journal of Biological Macromolecules. 79, 363-369 (2015).
- Scaffaro, R., Lopresti, F., Botta, L., Rigogliuso, S., Ghersi, G. Preparation of three-layered porous PLA/PEG scaffold relationship between morphology , mechanical behavior and cell permeability. Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials. 54, 8-20 (2016).
- Lo Re, G., Lopresti, F., Petrucci, G., Scaffaro, R. A facile method to determine pore size distribution in porous scaffold by using image processing. Micron. 76, 37-45 (2015).
- Levingstone, T. J., Matsiko, A., Dickson, G. R., O'Brien, F. J., Gleeson, J. P. A biomimetic multi-layered collagen-based scaffold for osteochondral repair. Acta Biomaterialia. 10 (5), 1996-2004 (2014).
- Scaffaro, R., Botta, L., Maio, A., Mistretta, M. C., La Mantia, F. P. Effect of Graphene Nanoplatelets on the Physical and Antimicrobial Properties of Biopolymer-Based Nanocomposites. Materials. 9 (5), 351 (2016).
- Maio, A., Fucarino, R., Khatibi, R., Rosselli, S., Bruno, M., Scaffaro, R. A novel approach to prevent graphene oxide re-aggregation during the melt compounding with polymers. Composites Science and Technology. 119, 131-137 (2015).
- Maio, A., Agnello, S., et al. A rapid and eco-friendly route to synthesize graphene-doped silica nanohybrids. Journal of Alloys and Compounds. 664, 428-438 (2015).
- Maio, A., Giallombardo, D., Scaffaro, R., Piccionello, A. P., Pibiri, I. Synthesis of a fluorinated graphene oxide-silica nanohybrid: improving oxygen affinity. RSC Advances. 6 (52), 46037-46047 (2016).
