Aufzeichnung von EEG in frei bewegten neonatalen Ratten mit einer neuartigen Methode
Summary
Hier stellen wir eine neuartige Technik vor, die für die Aufzeichnung der Elektroenzephalographie (EEG) in frei bewegten neonatalen epileptischen Welpen und deren Beschreibung, Funktionen und Anwendungen entwickelt wurde. Diese Methode erlaubt es, EEG für mehr als 1 Woche aufzunehmen.
Abstract
EEG ist eine nützliche Methode, um elektrische Aktivität im Gehirn zu erkennen. Darüber hinaus ist es ein weit verbreitetes Diagnosewerkzeug für verschiedene neurologische Erkrankungen wie Epilepsie und neurodegenerative Erkrankungen. Allerdings ist es technisch schwierig, EEG-Aufnahmen bei Neugeborenen zu erhalten, da es eine spezialisierte Handhabung und große Sorgfalt erfordert. Hier präsentieren wir eine neuartige Methode zur Aufzeichnung von EEG bei neonatalen Rattenwelpen (P8-P15). Wir haben eine einfache und zuverlässige Elektrode mit Computer Pin Loci; Es kann leicht in den Schädel eines Ratten-Welpen implantiert werden, um qualitativ hochwertige EEG-Signale im normalen und epileptischen Gehirn aufzuzeichnen. Pups erhielten eine intraperitoneale (ip) Injektion der Neurotoxin-Kaininsäure (KA), um epileptische Anfälle zu induzieren. Die in diesem Verfahren durchgeführte chirurgische Implantation ist weniger teuer als andere EEG-Verfahren für Neugeborene. Mit dieser Methode können Sie qualitativ hochwertige und stabile EEG-Signale für mehr als 1 Woche aufzeichnen. Darüber hinaus kann dieses Verfahren auch auf erwachsene ra angewendet werdenTs und Mäuse, um Epilepsie oder andere neurologische Störungen zu untersuchen.
Introduction
Es ist gut etabliert, dass eine kontinuierliche Kommunikation zwischen Neuronen erforderlich ist, um eine normale Hirnfunktion zu erhalten. Die interneuronale Kommunikation findet primär bei Synapsen statt, wo Informationen von einem Neuron zu einem zweiten Neuron vermittelt werden. Diese synaptische Übertragung wird durch zwei Arten von speziellen Strukturanordnungen vermittelt: elektrische oder chemische Synapsen 1 . Die Elektrophysiologie ist das Feld, das das bei der interneuronalen Kommunikation erzeugte elektrische Potential erfasst, das die Gesamtkörperfunktionen und das Verhalten 2 kontrolliert. EEG ist die am häufigsten verwendete Methode unter vielen elektrophysiologischen Techniken.
EEG ist eine Technik, die verwendet wird, um Änderungen in elektrischen Signalen zu erkennen, die durch interne oder externe Reize erzeugt werden. Darüber hinaus ist es ein wesentlicher Test für die klinische Diagnose und Ergebnis Vorhersage der verschiedenen neurologischen Erkrankungen wie Epilepsie, Parkinson und Alzheimer-ErkrankungenE, sowie Wirkungen von pharmakologischen und toxikologischen Wirkstoffen 3 . Im Allgemeinen zeigt ein epileptischer Patient eine Übererregbarkeit und eine beeinträchtigte funktionelle Konnektivität im Gehirn; Diese werden als interictale epileptiforme Entladungen (IEDs) zusammengefasst und können von EEG in Form von scharfen, vorübergehenden Spikes aufgezeichnet werden; Scharfe Wellen; Spike-Wave-Komplexe; Oder polyspikes 4 Das Hauptmerkmal des epileptischen Gehirns ist das spontane Auftreten epileptischer Anfälle, die entweder aus der Kopfhaut oder aus dem Hirnparenchym aufgezeichnet werden können, um den für die Krampfanfälle verantwortlichen Gehirnbereich zu lokalisieren. Darüber hinaus hat EEG auch sehr wichtige Implikationen bei neurodegenerativen Erkrankungen wie Alzheimer-Krankheit (AD). Forschung deutet darauf hin, dass veränderte EEG-Aufnahmen und beeinträchtigte Oszillationsnetze bei AD-Patienten häufig sind. Allerdings ist unser Wissen über die Pathophysiologie von Netzoszillationen bei neurodegenerativen Erkrankungen iS überraschend unvollständig und muss weiter erforscht werden 6 .
In diesem Protokoll haben wir eine einfache Elektrode entworfen, mit der man EEG aufzeichnen kann, um die elektrische Kommunikation sowohl im normalen als auch im pathologischen Gehirn zu verstehen. Die chirurgische Implantation in dieser Methode ist günstiger als andere verfügbare Verfahren 7 . Darüber hinaus kann mit dieser Methode qualitativ hochwertige und stabile EEG-Signale für längere Zeiträume ( dh 2-4 h jeden Tag für 1 Woche) aufgezeichnet werden. Darüber hinaus verwendeten wir leichtere Elektroden (mit einem Gewicht von ca. 26 mg), die es den Tieren ermöglichen, sich natürlicher zu verhalten 8 . Diese Methode ist weithin anwendbar auf die Untersuchung von EEG bei neonatalen Rattenwelpen, die den Verstärker und den Digitalisierer benötigen, die üblicherweise im Elektrophysiologie-Labor verwendet werden und keine zusätzlichen Vorrichtungen benötigen.
Protocol
Representative Results
Discussion
Hier berichten wir über chirurgische und Aufzeichnungsverfahren, um EEG in frei bewegten neonatalen Rattenwelpen durch verdrahtete Methode zu erwerben (Abbildung 3 ). Es wurde vorgeschlagen, dass der P7-P12 Rattenwelpe im Entwicklungsalter ist, der einem Vollzeit-menschlichen Neonat 10 , 11 entspricht. Es ist technisch schwierig, bei der Arbeit mit Rattenwelpen in dieser Altersgruppe qualitativ hochwertige EEG-Aufzeichnungsdaten zu erhalten. Da…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Diese Arbeit wurde von der Naturwissenschaftlichen Stiftung von China (31171355) und der Naturwissenschaftlichen Stiftung von Guangdong (S2011010003403, 2014A030313440) unterstützt.
Materials
| Computer pin | |||
| Pincer | DELI Group Co., Ltd. | ||
| 502 super glue | DELI Group Co., Ltd. | 7144 | |
| Drying oven | Boxun | GZX-9140MBE | |
| Isofluorane | RWD Life Science | 902-0000-522 | |
| Stereotaxic apparatus | RWD Life Science | 900-0068-507 | |
| Anesthesia apparatus | RWD Life Science | 902-0000-510 | |
| Homeothermic Heating Device | Harvard Apparatus | K 024509 | |
| Amplifier Model 3000 | A-M Systems | 61558 | |
| Micro1401 Analog Digital converter | Cambridge Electronic Design Ltd. | 4383 | Data acquisition unit |
| Spike2 | Cambridge Electronic Design Ltd. |
References
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