Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Воздействие на ЦНС Pig для гистологического анализа: Руководство для обезглавливания черепа Открытие и Brain Removal

16.3K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/55511

⸱

13 апреля 2017 г.

 ,  ,  ,  ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

Цель данной статьи и обучающего видео, чтобы описать, как выявить и удалить посмертную свинью мозг и гипофиз в интактном состоянии, подходящем для последующего макроскопического и гистологического анализа.

Аннотация

Свиньи становятся все более популярными в крупных животных исследования трансляционной нейронауки в качестве экономически и этически возможной замены для приматов. Большой размер мозга свиньи позволяет использовать обычные томографы клинического мозга и прямое использование и тестирование нейрохирургических процедур и оборудования из человеческой клиники. Далее макроскопическое и гистологическое исследование, однако, требует посмертного воздействия на свиной центральную нервной системе (ЦНС) и последующего удаление головного мозга. Это не простая задача, как свиньи ЦНС инкапсулируется толстым, костистым черепом и позвоночником. Цель данной статьи и обучающего видео, чтобы описать, как выявить и удалить посмертный мозг свиньи и гипофиз в интактном состоянии, пригодный для последующего макроскопического и гистологического анализа.

Введение

Трансляционные исследования неврологии у свинех становятся все более популярными в течение последних двух десятилетий. Большой размер мозга свиньи позволяет использовать обычные томографы клинического мозга и прямого использование и тестирования нейрохирургических процедур и оборудования из человеческой клиники 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8. В течение последних 20 лет, свиней, особенно минисвиней (на....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

анестезии животных и euthanesia проводили в соответствии с «Принципами ухода за лабораторными животными» (NIH публикации № 86-23, пересмотренные 1985) и одобрен Советом Датских животных исследовательской этики.

1. инструменты

  1. Собирают инструменты , представленные в видео , и перечисленные в таблице материалов.

2. обезглавливание

Примечание: Анестезия индуцировали путем внутримышечной инъекции 5 мл мидазолам (5 мг / мл) и 5 ​​мл кетамина (25 мг / мл). 5-10 мин позже, когда был глубоко седативные животное, ушную вену вводили канюлю и летальный передози....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Чтобы предотвратить материал ткани от высыхания, рекомендуются хранить удаленный мозг и гипофиз в банке, наполненный фиксатором или изотоническим солевой раствор сразу после макроскопического анализ был выполнен. Материал, ткань может быть сохранен в фиксаторе в течение многих лет, в то время как хранение в изотоническом солевом растворе, даже в холодильнике, приведет к разрушению ткани со временем.

Удален гипофиз может также .......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Большинство экспериментальных исследований неврологии проводятся в небольших видов животных, таких как мыши и крысы, где доступ к ЦНС облегчается с помощью тонкой skull- и дуральной толщины. Однако в более крупных экспериментальных животных , таких как свиньи 1, 4, 8, овец 32, и отличные от человека приматы, значительная толщина этих структур требует использования надежных инструментов (таблица материало.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего раскрывать.

Благодарности

Авторы с благодарностью искусной помощи миссис Трин W Миккелсен, г-ж Lise М. Место и сотрудники в Påskehøjgaard. Датский Совет по медицинским исследованиям, то Lundbeck фонд и Фонд Novo Nordisk при финансовой поддержке исследования.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Тяжелая ручка для скальпеля # 4FST (Fine Science Tools)10008-13Подходит для разреза кожи и удаления мягких тканей
Нестерильные лезвия для скальпеля # 23FST 10023-00
Рукоятка скальпеля #7FST 10007-12Оптимально для дурального разреза и прецизионной работы
Лезвия нестерильных скальпелей #11FST 10011-00
Щипцы хирургическиеFST 11024-18Наконечники хирургических щипцов обеспечивают надежный захват 
Kerrison Bone PunchAesculap NeurosurgeryFF713RДолжен быть прочным, размер прикуса 3-5 мм
Костный RongeurAesculap NeurosurgeryMD615Должен быть прочным, размер прикуса 15 x 5 мм
Костный RongeurAesculap NeurosurgeryFO551RДолжен быть прочным, размер прикуса 25 x 15 мм 
Костяное долотоLawton67-0335Размер головки зубила не должен превышать 20 мм
Молоток (молоток)Millarco5624108Weigth 300 г, длина 30 см, размер места удара головки 2 х 2 см
МикроножницыFST 14002-14   
ДиссекторЭскулап НейрохирургияOL165R
Gö ttingen minipigsEllegaard Gö ttingen Minipigs A/S, Дания
Euthanimalпентобарбитал
кетаминPfizer
Midazolam Гамельн Фармасьютикалз
.

Ссылки

  1. Lind, M. N., Moustgaard, A., Jelsing, J., Vajta, G., Cumming, P., Hansen, A. K. The use of pigs in neuroscience: Modeling brain disorders. Neurosci Biobehav Rev. 31, 728-751 (2007).
  2. Bjarkam, C. R., et al. Neuromodulation in a minipig model of Parkinson disease. British ....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Экспозиция ЦНС свиньиметодика трепанации черепапроцедура извлечения головного мозгаэкстракция гипофизаметод декапитацииразрез твердой мозговой оболочкииспользование костного долотаприменение хирургических пинцетовподготовка к гистологическому анализупосмертная обработка тканей