在重大疾病的小鼠模型中使用中心静脉导管的流体，药物和营养管理
Summary
This protocol describes a centrally catheterized mouse model of prolonged critical illness. We combine the cecal ligation and puncture method to induce sepsis with the use of a central venous line for fluids, drugs and nutrient administration to mimic the human clinical setting.
Abstract
本协议描述长期重大疾病的中央插管小鼠模型。我们结合盲肠结扎和穿刺方法诱发败血症与使用中心静脉导管为液体，药物和营养管理，以模仿人类临床。危重病人需要为了生存密集的医疗支持。虽然大多数的患者会在几天之内恢复，有关的四分之一患者需要长期的精心护理，并在非解决多器官功能衰竭死亡的高风险。此外，重大疾病的延长的相位被深刻肌无力，和内分泌和代谢的变化，这的发病机理目前不完全理解纯度标记。在重症监护研究中最广泛使用的动物模型是盲肠结扎和穿刺模型诱发败血症。这是一个非常可重复的模型，类似于人类九月急性炎症和血液动力学变化SIS，其目的是研究重大疾病的急性期。然而，这种模式是由高杀伤力，这是从临床的人情况不同，并没有发展到研究重大疾病的长期阶段纯度标记。因此，我们通过将中心静脉导管在颈静脉使我们能够管理临床相关的支持性护理适应的技术，以更好地模仿重大疾病的人体临床情况。这种小鼠模型需要动物的大型外科手术和日常精心呵护，但它会导致重大疾病的急性和长期阶段的相关模型。
Introduction
重大疾病是其中的一个或多个器官系统的功能受到阻碍该患者会死亡，除非强化药物载体施用的程度的疾病状态。而对于进入重症监护病房（ICU）可以改变，从外伤，手术复杂，烧伤，病情加重败血症的最初原因，所有的危重病人从细胞损伤，引起缺血，缺氧和过度炎症反应等遭受，从而导致器官衰竭。大多数患者生存的严重侮辱，但患者的一个重要部分不会马上恢复，并且需要长时间的重症监护室。他们在死亡的高风险，由于非解决多器官功能衰竭。此外，重大疾病的延长的相位被深刻肌肉无力和内分泌及代谢变化，这的发病机理目前不完全理解纯度标记。
几个R取代odent模型在重症监护研究环境中使用。两个最常用的模型是脂多糖（LPS）和盲肠结扎和穿刺（CLP）的外源施用。这两种型号的开发，以模仿败血症的急性期，定义为造成失调的宿主对感染的反应威胁生命的器官功能障碍，和的主要原因接纳全世界ICU 1，2中的一个。该LPS模型有几个缺点，因为它只有短暂影响细胞因子的释放和动物3的血流动力学状态。与人类不同，啮齿动物也对内毒素特别耐以及使用内毒素的“高剂量”是必要的，以产生低血压和死亡率，特此进一步提高该方法4,5的有效性的担忧。其他模型，盲肠结扎和穿刺模型（CLP）设有后跟一个针穿刺通过和 – 通过盲肠的一部分的一个结扎。此过程会导致多种微生物腹腔感染组织损伤，随后是易位细菌进入血液舱。这会引发全身炎症反应和脓毒症的发展。该CLP模型已被广泛承认为再现败血症的主要特征急危重症的动物模型：hyperinflammation，血管舒张，低血压和心输出量增加6,7。然而，这种模式不允许非解决多器官功能衰竭，肌肉萎缩，和内分泌及代谢的变化，这是典型的重大疾病的长期阶段的研究。此外，最近的小鼠模型对重大疾病的有效性受到质疑，因为从小鼠模型的研究结果不能总是被转换为人类设置8，9，10。一种可能的解释可能是提供给危重人类患者的支持治疗从提供给危重小鼠的护理有很大的不同。
因此，为了更接近于人类的设置，并允许重大疾病的长期阶段的调查，我们开发了模仿急性重症监护给人类，如丰富的静脉输液和抗生素治疗的小鼠模型，并允许为了生存重大疾病，如营养支持的延长期来管理支持治疗。为此，我们适应CLP-引起败血症的小鼠模型，是败血症的金标准，并放置在中央静脉线使体液的营养和药物管理。
Protocol
Representative Results
Discussion
我们开发重大疾病的更多的临床相关的小鼠模型中，通过结合盲肠结扎和穿刺方法诱发败血症与使用中心静脉导管为液体，药物和营养管理。该实验装置是可重复的，允许以研究重大疾病和结果的延长阶段稳定死亡率，特此模仿人类的临床情况1。
盲肠结扎和穿刺已经被广泛承认为再现败血症6,7的主要特征急性危?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
GVdB, via the University of Leuven (KU Leuven), receives long-term structural research support from the Methusalem Program funded by the Flemish Government (METH08/07) and holds a European Research Council Advanced Grant AdvG-2012-321670 from the Ideas Program of the European Union seventh framework program. SET received a Research Foundation-Flanders (FWO) Research Assistant Fellowship.
Materials
| Buprenorphine | Ecuphar | Vetergesic 0,3mg/ml | |
| C57BL/6 | Janvier labs | C57BL/6JRj | |
| colloids | Fresenius Kabi | Volulyte 6% | |
| crystalloids | Baxter | Plasmalyte a viaflo | |
| Ethilon 3.0 | Ethicon | F3211 | |
| Imipenem | MSD | Tienam 500mg powder for injection fluid | |
| Isoflurane | Eurovet | Iso-vet | |
| Ketamine | Eurovet | Nimatek 100mg/ml | |
| LocTite Super glue3 all plastics | Rectavit | 119818 | |
| Mersilk 3.0 | Ethicon | L192 | |
| Mersilk 5.0 | Ethicon | F682 | |
| Microrenathane .025 O.D." x .012 I.D." | Bioseb | MRE-025 | |
| olimel N7E | Baxter | ||
| PE10 – Polyethylene .011" x .024" | Instech Solomon | BTPE-10 | |
| PE-50 tubing .023"x.038" | Instech Solomon | BTPE-50 | |
| Rodent Swivel 20 G | Bioseb | RS-20G | |
| Ropivacaïne | Astrazenica | Naropin 2mg/ml | |
| Xylazine | VMD | Xylazine hydrochloride 2% |
References
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