Summary

Confronto degli effetti di fumo elettronico di sigarette e sigaretta in un romanzo<em> In Vivo</em> Sistema di esposizione

Published: May 24, 2017
doi:

Summary

Questo protocollo descrive un metodo per esporre i roditori al vapore elettronico di vapore (vapore E) e al fumo di sigaretta. Le camere di esposizione sono costruite modificando le camere di anestesia con un sistema di pompaggio automatico che fornisce vapori e fumo di sigaretta ai roditori. Questo sistema può essere facilmente modificato per ospitare molti endpoint sperimentali.

Abstract

Le sigarette elettroniche ( sigarette elettroniche ) vengono ampiamente utilizzate e crescono in popolarità. Si stima che più di 9 milioni di adulti li utilizzano regolarmente. I potenziali effetti negativi sulla salute dell'esposizione elettronica del vapore di sigaretta (E-vapore) sono poco definiti. Mentre sono stati sviluppati diversi modelli animali di E- vapor esposizione, alcuni modelli espongono i roditori a quantità clinicamente rilevanti di nicotina e fanno confronti diretti con il fumo di sigaretta all'interno dello stesso sistema di esposizione. Qui esempiamo un metodo per costruire e utilizzare una camera di vapore E e una camera di fumo per sigarette. Le camere sono costruite applicando camere di anestesia con un sistema di pompaggio controllato da computer che fornisce quantità consistenti di EL'esposizione alla nicotina viene misurata indirettamente quantificando i livelli di cotinina sierica pre e post esposizione. Questo sistema di esposizione può essere modificato per accogliere vari tipi di sigarette E e sigarette di tabacco e può Essere utilizzato per confrontare gli effetti di E- vapore e fumo di sigaretta in vivo .

Introduction

Dall'entrata nel mercato statunitense nel 2004, le sigarette elettroniche (sigarette elettroniche) si sono espanse in un settore di miliardi di dollari e si stima che quasi 9 milioni di adulti li usano regolarmente 1 . Nel 2014 e nel 2015, più studenti delle scuole superiori avevano utilizzato sigarette elettroniche rispetto alle sigarette convenzionali 2 . Il crescente numero di utenti di sigarette elettroniche ha generato uno sforzo di ricerca per valutare i loro potenziali effetti negativi sulla salute.

Le sigarette elettroniche generano un vapore (soprannominato "E vapore") riscaldando una soluzione viscosa che contiene tipicamente una miscela di acqua, polietilenglicole o glicerina vegetale, nicotina e aromi 3 , 4 . È stato dimostrato che il vapore in E contiene diversi composti nocivi tra cui le specie ossigeno reattivo (ROS), la nicotina, le aldeidi vari e gli idrocarburi policiclici aromatici 5 ,6. Molti di questi composti si formano durante il processo di vaporizzazione del liquido E prima dell'iniezione 7 . Notevolmente, molti di questi composti nocivi sono presenti anche nel fumo di sigaretta, suscitando preoccupazione che le sigarette elettroniche possano avere conseguenze negative per la salute 7 .

C'è poco consenso sugli effetti sulla salute delle sigarette elettroniche. Per risolvere questo problema, sono stati sviluppati diversi modelli animali di esposizione a vapori E ( Tabella 1 ). Questi modelli impiegano una varietà di metodi come l'esposizione a vapore del corpo intero e la ventilazione meccanica. Mentre i modelli attuali hanno fornito dati accurati, pochi effettuano confronti diretti con il fumo di sigarette all'interno dello stesso sistema di esposizione ( Tabella 1 ). Inoltre, mentre diversi studi sull'uomo hanno dimostrato agli utenti e ai fumatori di sigarette per avere livelli di cotinina sierici compresi tra 30-200 ng / ml, molti modelli di esposizione al fumo di E e fumo di sigaretta cadonoIde questa gamma 8 , 9 , 10 , 11 , 12 .

Ecco qui un metodo per confrontare gli effetti del fumo di sigaretta e dell'esposizione al vapore in vivo in modo da produrre livelli di cotinina sierici simili agli studi umani.

Protocol

Il seguente protocollo è stato eseguito sotto la guida e l'approvazione del Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali (IACUC) dell'Università del Michigan. 1. Assieme elettronico della camera da sigarette vapore NOTA: La camera completa deve essere collocata in una cappa di fumo durante l'uso. La camera qui è stata alloggiata in un ambiente di laboratorio controllato e filtrato. Gli investigatori possono scegliere di monitorare tal…

Representative Results

Monitoraggio di monossido di carbonio e ossigeno Le concentrazioni di ossigeno non sono diminuite al di sotto del 20% durante l'esposizione al vapore e le concentrazioni di CO non sono state rilevabili durante l'esposizione. I monitor di gas durante l'esposizione al fumo di sigarette hanno indicato che la concentrazione di ossigeno è rimasta al di sopra del 20%. Le concentrazioni di monossido di carbonio non hanno su…

Discussion

Qui descriviamo un metodo per la costruzione di camere che espongono i roditori al vapore e al fumo di sigaretta in modo controllato ( Figura 6 ). La costruzione della camera di sigaretta E è relativamente semplice e poco costosa rispetto ai sistemi di esposizione commerciale 14 , 15 e 16 . Le parti e gli strumenti necessari per costruire la camera sono facilmente reperibili da fornitori commerciali online. Al…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questa ricerca è stata resa possibile dalla Aortic Research Grant (University of Michigan) presso il Dr. Eliason. Gli autori vorrebbero inoltre riconoscere Nick Scott presso il Dipartimento per la Segnaletica e la Grafica del Dipartimento di piantagioni di Michigan per assistere alla progettazione e all'assemblaggio del dispositivo di illuminazione per sigarette.

Materials

blu PLUS Rechargeable Kit blu eCigs N/A
1R6F Reference Cigarettes Center for Tob Ref  Prod UK N/A
Lexan Anesthesia Chamber 20 L Jorgensen Laboratories JOR265
Arduino UNO Arduino 2877
Diode Rectifier – 1A 50V Spark Fun COM-08589
Resistor 10K Ohm 1/6th Watt PTH – 20 pack Spark Fun COM-11508
Electrolytic Decoupling Capacitors – 100uF/25V Spark Fun COM-00096
Solderless Plug-in BreadBoard  BusBoard Prototype Systems BB400
Alligator-Clip Wires BusBoard Prototype Systems CA-M-20
ZipWire BusBoard Prototype Systems ZW-MM-10
Standard Fan 80 ST2 Cooler Master R4-S8R-20AK-GP
ARIC 4" adjustable vent Bestlouver N/A
ToxiPro  Carbon Monoxide Monitor Honeywell Analytics 54-00-10316
ToxiPro Oxygen Monitor Honeywell Analytics 54-45-90-VD
ToxiPro IQ Express Docking Station Honeywell/Sperian Biosystems  54-46-9100
Command Wall Hook Small Wire 6-Pack 3M N/A
Micro Water/Air Pump Xiamen Conjoin Electronics CJWP40-A12A1
1/4" Silicon Tubing NewAge 2801470-100
T Connector Bel-Art Scienceware F196060000
Plastic Whole Blood tube with spray-coated K2EDTA Becton, Dickinson and Company 367841
Cotinine ELISA kit Calbiotech CO096D

References

  1. Schoenborn, C. A., Gindi, R. M. Electronic Cigarette Use Among Adults: United States, 2014 Key findings. NCHS. , (2014).
  2. Singh, T. Tobacco Use Among Middle and High School Students – United States, 2011-2015. MMWR. 65 (14), 361-367 (2016).
  3. Flora, J. W. Characterization of potential impurities and degradation products in electronic cigarette formulations and aerosols. Regul. Toxicol. Pharmacol: RTP. 74, 1-11 (2016).
  4. Tierney, P. A., Karpinski, C. D., Brown, J. E., Luo, W., Pankow, J. F. Flavour chemicals in electronic cigarette fluids. Tob. Control. , (2015).
  5. Sleiman, M. Emissions from Electronic Cigarettes: Key Parameters Affecting the Release of Harmful Chemicals. Environ. Sci. Technol. 50 (17), 9644-9651 (2016).
  6. Hwang, J. H. Electronic cigarette inhalation alters innate immunity and airway cytokines while increasing the virulence of colonizing bacteria. Int J Mol Med (Berlin, Germany). 94 (6), 667-679 (2016).
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  9. Etter, J. -. F. Levels of saliva cotinine in electronic cigarette users. Addiction. 109 (5), 825-829 (2014).
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Cite This Article
Hage, A. N., Krause, W., Mathues, A., Krasner, L., Kasten, S., Eliason, J. L., Ghosh, A. Comparing the Effects of Electronic Cigarette Vapor and Cigarette Smoke in a Novel In Vivo Exposure System. J. Vis. Exp. (123), e55672, doi:10.3791/55672 (2017).

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