Ein komponenten-aufgelöster diagnostischer Ansatz für eine Studie auf Gras-Pollen-Allergenen in chinesischen Südländer mit allergischer Rhinitis und / oder Asthma
Summary
Diese Arbeit beschreibt ein Protokoll, das einen komponentenaufgelösten Ansatz verwendet, um Sensibilisierung für Gräserpollenallergene in einer Kohorte von Patienten aus Südchina mit allergischer Rhinitis und / oder Asthma zu untersuchen.
Abstract
Die Sensibilisierung für Gräserpollen erfordert ein globales Risiko für allergische Atemwegserkrankungen. Obwohl die Prävention auf der lokalen Untersuchung der Pollenallergene beruht, sind die Daten zu diesem Thema in Südchina begrenzt. Alle verfügbaren Daten wurden durch Selbstreport-Fragebögen, Hauttest-Tests und totale oder spezifische IgE-Tests mit Roh-Extrakten erhalten. Aus vielen Gründen sind diese Methoden unzuverlässig. Serum SIgE Reaktivität auf Bermuda Gras, Timothy Gras und Humulus scandens Allergene in einer Kohorte von Patienten aus Groß-Guangzhou (Süd-Chinas größte Stadt und seine Außenbezirke) mit allergischer Rhinitis und / oder Asthma wurden mit einem vollautomatischen Immunoassay-Analysator als Komponente untersucht -Rasiertes Diagnose-Tool (CRD).
Zum ersten Mal wurde in den chinesischen Südländer mit allergischer Rhinitis und / oder Asthma eine erheblich hohe Prävalenz der Bermuda-Gras-SITZ-Positivität nachgewiesen. Bei diesen Patienten eine subtile Prävalenz der SensibilisierungZu Timothy Gras und Humulus scandens wurde auch festgestellt, die aus Kreuzreaktivität entstehen können, da die beiden letzteren in der Region nicht üblich sind. Dies wurde auch durch den Nachweis von Allergenkomponenten unterstützt.
Vollautomatisierte Immunoassay-Analysatoren bieten eine zufriedenstellende Konsistenz zwischen Regionen, Laboratorien und Institutionen und im Laufe der Zeit. Die Automatisierung des Instruments kann eine standardisierte Erkennung ermöglichen, die vor dem Aufkommen von CRD nicht leicht enthüllt worden wäre.
Dies ist eine Studie, die einen CRD-Ansatz verwendet, um die Sensibilisierung für Gräserpollenallergene in Südchina zu untersuchen. Es fügt zu aktuellen Beweisen in der Literatur hinzu. Zukünftige Studien sind erforderlich, um diese Ergebnisse zu validieren. Obwohl CRD ein nützliches Werkzeug ist, sollten die Befunde, die mit dem vollautomatischen Immunoassay-Analysator durchgeführt wurden, keine anderen Laboruntersuchungen, klinischen Auswertungen und Fachwissen ausführen.
Introduction
Grass-Pollen machen fast 50% der Immunglobulin-E (IgE) -bezogenen Allergien aus und verleihen aufgrund ihrer luftgetragenen Natur ein globales Risiko für allergische Atemwegserkrankungen, insbesondere Asthma und allergische Rhinitis 1 , 2 , 3 , 4 . Die Prävention gegen Gräserpollenallergien in einer Region beruht auf Informationen über die lokale Verteilung der Pollenallergene. Leider variiert das Spektrum der sensibilisierenden Allergene von Ort zu Ort – eine Beobachtung, die allgemein als regionale Spezifität bekannt ist.
In China, einem riesigen ostasiatischen Territorium, wird die regionale Besonderheit der Graspollen Sensibilisierung durch begrenzte Daten, die derzeit aus dem südlichen Teil dieses Landes in den letzten Jahrzehnten verfügbar sind, noch komplizierter. Solch ein Mangel an Daten hat zu einer Schwierigkeit bei der Darstellung der gesamten Gras Pollen Sensi geführtIn diesem großen Land 6 . Darüber hinaus wurden die sehr begrenzten Daten über chinesische Südländer weitgehend aus Selbstreport-Fragebögen, Hauttest-Tests (anstatt Laborserum-Tests), Gesamt-IgE-Messungen (anstelle von allergenspezifischem IgE (sIgE)) und SIgE-Detektion an Allergene ( Anstelle von Allergenkomponentenmolekülen).
Die Selbstregistrierung allergischer Symptome kann bei bestimmten Allergenen unzuverlässig sein. Haut-Prick-Tests, obwohl weit verbreitet, beinhalten die Verwendung von nicht-standardisierten, rohen Allergenextrakte, die selbst andere sensibilisierende Komponenten enthalten können, die die Ergebnisinterpretation verwechseln. Die Zuverlässigkeit des Hauttest-Tests hängt auch entscheidend von einer geschickten Manipulation durch Allergologen oder Fachkrankenschwestern, der jüngsten Histamin-Anwendung und der Patienten-Compliance (manchmal sehr schwierig für kleine Kinder) ab. Total IgE ist nützlich für das Screening einer Allergie, aber nicht sinnvoll bestimmen thE beunruhigende Allergene bei einem Patienten. Darüber hinaus enthalten fast alle Allergene eine Reihe von Allergenkomponentenmolekülen. Die Sensibilisierung der Hauptkomponenten ( dh der p 1 und des p 2 von Hausstaubmilben) kann eine "echte" Allergie (Allergie auf ein bestimmtes Allergen, anstatt falsche Positivität durch Kreuzreaktionen mit anderen Allergenen), aber Sensibilisierung vorschlagen Zu bestimmten ( dh der kreuzreaktive Der p 10, ein Tropomyosin) darf nicht 7 sein .
Bevor eine komponentenaufgelöste Diagnostik (CRD) eingeführt wurde, behinderten diese enttäuschenden Rückschläge Allergenstudien in China. CRD präzise die Komponenten eines Allergens unter Verwendung von rekombinanten oder gereinigten Allergenmolekülen, wodurch die Messung leicht quantifizierbar und charakterisierbar ist 8 . In den vergangenen Jahrzehnten verwendeten Allergie häufig Rohextrakte von Allergenen, die zwangsläufig eine Anzahl irrelevanter Komponenten enthalten. Viele von diesen coMponents sind inert, aber gelegentlich könnten einige zu verstopfenden positiven reaktionen führen. Die Verwendung von rekombinanten oder gereinigten Allergenmolekülen in CRD kann dies umgehen und bietet somit eine bessere Testgenauigkeit. Bei der Verarbeitung in Mikroarrays, ein CRD-Ansatz schnell Bildschirme oder identifiziert Sensibilisierung für Hunderte von Allergen-Moleküle in einzelnen Themen. Eine gut gestaltete CRD-Studie zur Graspollen-Sensibilisierung in Südchina fehlt derzeit. Idealerweise sollte eine solche Studie eine lokale Bevölkerung mit beträchtlicher geografischer Abdeckung einschließen, die Graspollen, die gemeinhin in China gemeldet werden, berücksichtigen und die oben genannten technischen Aspekte ansprechen. Um eine praktische klinische Relevanz zu erreichen und die Rekrutierung von Serumproben zu erleichtern, kann eine frühzeitige Untersuchung der Sensibilisierung von Gräserpollen als Inhalationsallergene auch auf Patienten mit allergischen Atemwegserkrankungen und nicht auf die allgemeine Bevölkerung gerichtet sein.
Diese Arbeit beschreibt eine MethodeVerwendet, um die Serum-SIgE-Reaktivität auf Bermuda-Gras, Timothy-Gras und Humulus- Scandens bei Patienten aus Groß-Guangzhou (Südchinas größte Stadt und ihre Außenbezirke) mit allergischer Rhinitis und / oder Asthma mit dem CRD-Ansatz 5 zu testen. Diese Erkenntnisse über die Sensibilisierung dieser subtropischen und gemäßigten Gräserpollen in Südchina fügen wichtige Beweise dafür in der Literatur hinzu.
Protocol
Representative Results
Discussion
Vollautomatisierte Immunoassay-Analysatoren bieten eine zufriedenstellende Konsistenz zwischen Regionen, Laboratorien und Institutionen und im Laufe der Zeit. Es wurde festgestellt, dass ein solches automatisches Verfahren die Bankforschung und die klinischen Studien im Wesentlichen unterstützt, den standardisierten Nachweis von vielen Allergenen und / oder Allergenkomponenten ermöglicht und eine wahrscheinliche Allergen-Kreuzreaktivität identifiziert, die vor dem Aufkommen von CRDs nicht leicht enthüllt worden wär…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Wir danken Yueming Su für seine Hilfe bei der Vorbereitung der Figur. Diese Studie wurde von der Guangdong-Stiftung für Wissenschaft und Technologie (Projekt Nr .: 2014A020212352), dem Guangzhou Education Bureau (1201630044, 1201630393) und der Nationalen Naturwissenschaftlichen Stiftung von China (NSFC 81572063, NSFC 81601394) finanziert.
Materials
| ImmunoCAP 1000 Instrument | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 12-3800-01 | |
| Phadia Information Data Manager Software Package | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 12-3801-11 | |
| Software Package, ImmunoCAP 1000 | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 12-3801-12 | |
| g2 (Bermuda grass) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4131-01 | |
| g6 (Timothy grass) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4100-01 | |
| w22 (Japanese Hop) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4452-01 | |
| g216 (nCyn d 1) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4972-01 | |
| g205 (rPhl p 1) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5234-01 | |
| g208 (nPhl p 4) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5288-01 | |
| g215 (rPhl p 5b) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5338-01 | |
| g209 (rPhl p 6) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5289-01 | |
| g210 (rPhl p 7) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5290-01 | |
| g211 (rPhl p 11) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5291-01 | |
| g212 (rPhl p 12) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5292-01 | |
| o214 Cross-reacting carbohydrate determinants (CCDs) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5339-01 | |
| Specific IgE Conjugate 400 | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9310-08 | |
| Specific IgE Calibrator Strip | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9459-08 | |
| Specific IgE Curve Control Strip | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9312-08 | |
| Specific IgE Anti-IgE ImmunoCAP | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4417-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Negative Control | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9445-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Control L | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9528-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Control M | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9529-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Control H | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9530-01 | |
| Development Solution | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9439-08 | |
| Stop Solution | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 34-2271-58 | |
| Washing Solution | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9202-08 | |
| FluoroC | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9264-01 | |
| Maintenance Solution Kit | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9476-01 |
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