Трансуретральная инстилляции процедура в взрослого мужчины мыши
Summary
Трансуретральная инстилляции является сложной процедурой и не хорошо описаны в литературе. Цель этой рукописи должен описать технику для трансуретральной ввода катетера для доставки внутрипузырной жидкостей с активными веществами в мочевого пузыря и предстательной железы у взрослых мышей-самцов.
Abstract
Трансуретральная инстилляций может использоваться для доставки различных решений с активных ингредиентов (например, наркотиков, химических веществ, бактерий и вирусов) локально в мочевого пузыря побудить животных моделей патологии пузыря или оценить эффективность лечения внутрипузырной. Большинство грызунов моделей патологии нижних мочевыводящих путей (LUT) индуцированной в самок мышей из-за простоты внутрипузырной инстилляции через женской уретры веществ. Однако благодаря анатомические различия между женской и мужской LUT, трансуретральная инстилляции в мужской мышь была сочтена весьма сложной процедуры, и он не был описан ранее. В этой рукописи мы предоставляем подробное описание о том, как подготовить полиэтилен (ПЭ) труб для последующей вставки в мочеиспускательный канал мужчины мыши. Кроме того мы обсуждаем идеальные типы ПЭ трубы для использования в зависимости от желаемого места прививки. Кроме того мы опишем пункт за пунктом, как готовить животных для успешной трансуретральная инстилляций избежать травмы уретры и обеспечить доставку решения в нужное место. Процедура запускается путем втягивания крайней плоти и головки подвергать отверстие уретры слухового прохода. Далее головки захвачен тупой-дробление щипцы для стабилизации пенис и ПЭ трубы. ПЭ трубы вставляется сначала уретры слухового прохода параллельно телу животного, то его угол регулируется, наклоняя катетер для маневра он следовать естественной кривизны мочеиспускательного канала. Этот метод может использоваться для индуцированного мышиных моделях патологии пузыря и/или оценки эффективности лечения внутрипузырной у мышей-самцов.
Introduction
Трансуретральная инстилляции подход был использован в ходе предыдущих исследований как один из методов для создания грызунов моделей мочевого пузыря патологий1,2,3,4 и может быть использован для оценки эффективность локально поставленного обработок в мышах. Хотя Животные модели нельзя охарактеризовать полностью человеческих патологий, выявление основных механизмов в исследованиях на животных обеспечивает более глубокое понимание человека LUT расстройств, таких как интерстициального цистита/мочевого пузыря болевого синдрома, нейрогенные цистит, аутоиммунные цистит и простаты воспаления5.
Трансуретральная инстилляции процедура, проводимая на взрослого мужчины мыши технически более сложной, чем внутрипузырной инстилляции в взрослых женщин мыши6. Естественно изогнутые Анатомия мужской уретры наряду с ее малого диаметра сделать технически сложно выполнить трансуретральная ввода катетера. Таким образом подробные инструкции для трансуретральной индукции инфекции мочевыводящих путей мыши6 и LUT воспаление7,8,9,10,11 , 12 , 13 , 14 , 15 через катетер мочевого пузыря вставить ранее были подготовлены только самок мышей. Эта рукопись призвана обеспечить пошаговое описание методики для трансуретральной инстилляций веществ у мышей-самцов, включая видеоклипы, изображения и иллюстрации. Трансуретральная инстилляции, что процедуры в взрослого мужчины мыши могут быть выполнены с помощью переменной прививает аналогична ранее описанные в женской мыши7 и объединена с дополнительные методы, такие как записи ЭМГ visceromotor ответов (VMR)16.
Protocol
Representative Results
Discussion
Эта рукопись подробно описывает метод трансуретральная инстилляции в взрослого мужчины мыши. Дифференциальный первичного заполнения области можно добраться с помощью ПЭ трубы различного диаметра. PE-50 рекомендуется для успешного достижения мочевого пузыря люмен, а большего диаметра,…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Авторы не имеют каких-либо подтверждений.
Materials
| BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 10 | BD Medical | 63019-004 | |
| BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 50 | BD Medical | 63019-048 | |
| BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath | BD Medical | 311411 | |
| Ethanol (EtOH) | Fisher Scientific | BP2818500 | |
| BD Needle Only 22 Gauge (G) 1 inch | Becton Dickson | 205155 | |
| BD Needle Only 27 Gauge (G) 1/2 inch | Becton Dickson | 305129 | |
| Luer stub, 22 G X 0.5 in / Blunt Needle | Instech | LS22 | |
| Luer stub, 27 G X 0.5 in / Blunt Needle | Instech | LS27 | |
| 6" Long x 2" Wide x 1" Thick, Aluminum Oxide Sharpening Stone / Oil Stone | Norton | 40204034 | |
| Surgical Lubricant Sterile Bacteriostatic Folilpac | Surgilube | 281020543 | |
| Isoflurane | Fluriso | 13985-528-60 | |
| SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System | Kent Scientific | SS-01 | |
| Dissecting Forceps, Curved | vwr | 82027-392 | |
| BD 1 ml Syringe | BD Medical | 309626 | |
| India Ink Solution., 0.2% in PBS buffer | Alfa Aesar | J61007 | |
| 8~12 weeks old male C57B/6 Mice | Jackson Lab | #000664 |
References
- Lee, S., Yang, G., Bushman, W. Prostatic inflammation induces urinary frequency in adult mice. PLoS One. 10 (2), e0116827 (2015).
- Wong, L., Hutson, P. R., Bushman, W. Prostatic inflammation induces fibrosis in a mouse model of chronic bacterial infection. PLoS One. 9 (6), e100770 (2014).
- Elkahwaji, J. E., Zhong, W., Hopkins, W. J., Bushman, W. Chronic bacterial infection and inflammation incite reactive hyperplasia in a mouse model of chronic prostatitis. Prostate. 67 (1), 14-21 (2007).
- Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. Prostate. 72 (3), 307-317 (2012).
- Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Bushman, W. Models of inflammation of the lower urinary tract. Neurourol Urodyn. 30 (5), 673-682 (2011).
- Thai, K. H., Thathireddy, A., Hsieh, M. H. Transurethral induction of mouse urinary tract infection. J Vis Exp. (42), (2010).
- Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Boldon, K., Bushman, W. Bacterial cystitis is accompanied by increased peripheral thermal sensitivity in mice. J Urol. 179 (2), 759-763 (2008).
- Hopkins, W. J., Gendron-Fitzpatrick, A., Balish, E., Uehling, D. T. Time course and host responses to Escherichia coli urinary tract infection in genetically distinct mouse strains. Infect Immun. 66 (6), 2798-2802 (1998).
- Dinis, P., Charrua, A., Avelino, A., Cruz, F. Intravesical resiniferatoxin decreases spinal c-fos expression and increases bladder volume to reflex micturition in rats with chronic inflamed urinary bladders. BJU Int. 94 (1), 153-157 (2004).
- Cayan, S., et al. Botulinum toxin type A may improve bladder function in a rat chemical cystitis model. Urol Res. 30 (6), 399-404 (2003).
- Jerde, T. J., Bjorling, D. E., Steinberg, H., Warner, T., Saban, R. Determination of mouse bladder inflammatory response to E. coli lipopolysaccharide. Urol Res. 28 (4), 269-273 (2000).
- Saban, M. R., et al. LPS-sensory peptide communication in experimental cystitis. Am J Physiol Renal Physiol. 282 (2), F202-F210 (2002).
- Schilling, J. D., Mulvey, M. A., Vincent, C. D., Lorenz, R. G., Hultgren, S. J. Bacterial invasion augments epithelial cytokine responses to Escherichia coli through a lipopolysaccharide-dependent mechanism. J Immunol. 166 (2), 1148-1155 (2001).
- Saban, M. R., et al. Discriminators of mouse bladder response to intravesical Bacillus Calmette-Guerin (BCG). BMC Immunol. 8, 6 (2007).
- Bjorling, D. E., et al. Acute acrolein-induced cystitis in mice. BJU Int. 99 (6), 1523-1529 (2007).
- Sadler, K. E., Stratton, J. M., Kolber, B. J. Urinary bladder distention evoked visceromotor responses as a model for bladder pain in mice. J Vis Exp. (86), (2014).
