Microcoil 협와 가벼운 자궁내 Hypoperfusion의 쥐 모델
Summary
가벼운 자궁내 hypoperfusion 배아 일 17에 쥐의 자 궁과 난소 동맥의 주위에 감싸인 금속 microcoils와 동맥 협 착 증에 의해 제작 되었다. 이 절차는 태아 hypoperfusion 및 자궁내 성장 제한 생산.
Abstract
자궁내 hypoperfusion/허 혈은 자궁내 태아 성장 제한, 조산, 낮은 출생 무게의 주요 원인 중 하나입니다. 이 현상의 대부분의 연구는 심한 자궁내 허 혈과 어느 모델이 나 자궁내 hypoperfusion의 그라데이션 정도 가진 모델에서 수행 되었습니다. 아니 연구 균일 한 가벼운 자궁내 hypoperfusion (MIUH)에 모델에서 수행 되었습니다. MIUH의 연구에 대 한 두 가지 모델 사용 되었습니다: 동맥 아케이드의 양쪽의 봉합 결 찰에 따라 모델 함께 자 궁과 난소 동맥과 과도 모델 기반으로 양측 난소 동맥과 대동맥 patency 데 클리핑. 그 두 가지 설치류 모델 MIUH의 몇 가지 한계를가지고, 예를 들어, 모든 태아는 자 궁 경적에서 그들의 위치에 따라 MIUH를 받게 됩니다. 우리의 MIUH 모델에서 모든 태아는 자궁내 hypoperfusion의 대 등 한 수준으로 받게 됩니다. MIUH는 모든 4 개의 동맥 먹이 자 궁, 즉, 양측 자 궁 및 난소 동맥의 가벼운 협 착에 의해 달성 되었다.
동맥 협 착 증 먹이 동맥의 주위에 감싸인 금속 microcoils에 의해 유도 했다. Microcoils 제어, 최적화, 그리고 아주 작은 간 동물 다양성 및 낮은 사망률 감소 혈액 흐름을 재현 하 동맥 협 착 증의 생산, 따라서 정확한 평가 활성화 합니다. 0.24 m m 내부 직경 microcoils 사용 된 태 반 및 태아 혈액 흐름은 약간 감소 (약 30%는 태 반에 사전 협 수준에서). 우리의 MIUH 모델의 자손은 명확 하 게 신경, 신경 해부학 및 행동 테스트 결과에 오랫동안 변경 보여 줍니다.
Introduction
자궁내 성장 금지 (IUGR) (태아 성장 제한 라고도 함)와 유아 (출생 체중 < 임신 나이 대 한 10번째 백분위 수), (< 임신 37 주에 태어난), 조산 및 낮은 출생 무게 (< 2500 g) 계정에 대 한 모든 신생아 2,3의 거의 10%. 이러한 유아의 많은 뇌성 마비 및 발달 장애 (예를 들어, 관심-적자/과다 장애 (ADHD) 및 학습 장애) 3,,45같은 신경학 적인 문제를 제시. 그 조건 유사성과 그들의 병 인 및 결과에 차이가 있다. IUGR의 병 인은 multifactorial, 그리고 자궁내 hypoperfusion와 관련 된 태 반 부족 아닌 비정상적인 태아 7에서 가장 일반적인 것으로 간주 됩니다. Preterm의 병 뿐만 아니라, multifactorial 이며 자궁내 가장 빈번한 원인 8입니다.
개발 두뇌에 가벼운 자궁내 hypoperfusion (MIUH)의 영향 명확 하지 않습니다. 현재 자궁내 hypoperfusion/허 혈의 사용할 수 있는 동물 모델은 주로 심한 hypoperfusion 또는 reperfusion 9,,1011없이 hypoperfusion의 그라데이션 정도 포함 한다. 그러나 임상 설정에서, MIUH의 경우는 심각한 조건 포함 그 보다 훨씬 더 자주 해야 간주 됩니다. MIUH의 현재 사용할 수 있는 모델은 봉합 결 찰은 자 궁 또는 난소 동맥과 양측 난소 동맥과 대동맥 데 patency 12,13, 클리핑 관련 된 설치류 모델을 포함 하는 설치류 모델 14,15,,1617. 이 모델의 단점 중 하나는 깊은 hypoperfusion와 태아에서 태아는 자 궁의 동맥 아케이드 내 태아의 위치에 따라 거의 그대로 관류와에 이르기까지 광범위 한 간 태아 변화, 그리고 난소 동맥입니다. 이 모델의 또 다른 단점은 출생; 후 각 태아의 위치를 구별 하는 그들의 무 능력 따라서, 연구자 자궁내 hypoperfusion 출생 후 개별 강아지에 의해 경험의 심각도 구분할 수 없습니다.
우리는 여러 동맥 협 착 증 1를 포함 하는 MIUH의 쥐 모델을 개발 했습니다. 난소 및 자 궁 동맥 주위 0.24 m m 내부 직경 금속 마이크로 코일을 배치 하면 협, 하지만 혈관 (그림 1)의 방해 하지. 중요 하지만 가벼운 감소 유도 배아 일 17 (인간 18에 배아 주 20-25에 해당)에 모두 양측 자 궁 및 난소 동맥, 자 궁, 즉, 공급 동맥의 근 위 부분에 이러한 microcoils을 적용 반응과 및 태아 혈액 흐름입니다. 코일은 자 궁을 먹이 모든 4 개의 동맥에 적용 된 후 혈액 흐름의 감소는 크게 동일 하 각 태 반 및 태아. 태아 사망률은 20% 미만. 새끼는 1-2 일 이전 (배아 하루 21-22) 정상 보다 자발적인 노동을 통해 태어난 다. 거의 모든 강아지는 크게 낮은 출생 무게 1전시 태어난 다. 회색 및 흰색 물질 볼륨 없이 명백한 조직 손상 1감소 됩니다. 새끼 신생아 반사, 근육의 약점, 그리고 변경 된 자발적인 활동 1의 지연된 취득 제시. 이 모델을 모방 태어난 중간 또는 IUGR; 어린이의 임상 증상과 아이 태어난된 preterm 전시 감소 회색 및 백색 질 또는 백색 질 부상 6, 존재 하지 않고, 신경 발달의 이정표를 지연 볼륨과 ADHD 3,5; 같은 행동 문제가 발생할 수 있습니다. 어린이 IUGR와 최소한의 신경 해부학 변경, 전시 하 고 모터와 인지 지연 4,7등 장애인된 신경 개발의 증가 위험을가지고. 조산 및 IUGR 다른 조건, 하지만 기본적인 메커니즘, 즉 임신 전체 기간 전에 미 숙 두뇌에 게 모욕을 공유 하는 두 가지 조건.
Protocol
Representative Results
Discussion
모두 자 궁 뿔에 난소와 자 궁 동맥의 microcoil 협 일관 되 고 재현 가능한 모든 반응과 태아에서 자궁내 hypoperfusion을 생성합니다. Hypoperfusion의 수준은 다른 내부 직경을 가진 microcoils를 사용 하 여 수정할 수 있습니다. Microcoils 0.24 m m 내경 동맥 협 착 증에 수행 된 댐에서 태어난 쥐 새끼 IUGR과 조산 (자세한 내용은 참조 1 참조)를 보여 줍니다. 새끼 신경 해부학 및 행동 변경 preterm 어린이 관찰 증상과…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 JSP와 CNRS, JSP KAKENHI 보조금 번호 26860858, Narishige 신경 과학 연구 재단 사이 년도 2013 연구 교환 프로그램에 의해 지원 되었다. 우리 박사 마 리코 하라다-시바와 쿄 시오 야 도움이 토론에 대 한 감사. 우리 마리 Furuta, 무쓰 미 사카모토, 리츠 코 마 키, 및 박사 Emi 다나카 우수한 기술 지원에 대 한 감사.
Materials
| Stereomicroscope | |||
| Isoflurane anesthesia machine | |||
| Anesthesia induction box | |||
| Heating pad | |||
| Diaper 30×40 cm | |||
| Depilatory foam or shaver | |||
| Iodine disinfectant solution | |||
| Gauze 10×20 cm | |||
| Surgical drape 45×45 cm with a round opening 5 cm in diameter | |||
| Spray bottle with ethanol for disinfection | |||
| Cotton swab | |||
| Forceps with large blunt tips | |||
| Forceps with angled fine tips | |||
| Scissors | |||
| Surgical scalpel, blade size is 27mm long (no.10, Axel, AS ONE Corporation, Osaka, Japan) | |||
| Surgical suture needle | |||
| Metal microcoils; inner diameter 0.24 mm, made from gold-coated steel (SAMINI Co. Ltd., Shizuoka, Japan) | |||
| Silk suture 4-0 | |||
| Sterile saline (0.9% sodium chloride) | |||
| Heating water bath | |||
| Plastic syringes (50ml) and needles (18G) |
References
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