OTX1 और OTX2 के रूप में दो संभव आणविक मार्करों sinonasal कार्सिनोमा और घ्राण neuroblastomas के लिए की पहचान
Summary
homeobox जीन नियामक जीन अक्सर वयस्क जीवों में ट्यूमर के साथ जुड़े रहे हैं । हम immunohistochemical और वास्तविक समय पीसीआर विश्लेषण द्वारा उनके तुलनात्मक अभिव्यक्ति की जांच की, सामान्य और भड़काऊ नाक mucosae में और sinonasal अर्बुद में आदेश उन्हें संभव नैदानिक और चिकित्सीय लक्ष्यों के रूप में उपयोग करने के लिए.
Abstract
otx homeobox (HB) जीन भ्रूण की उत्पत्ति के दौरान और वयस्क जीवों में घ्राण उपकला के विकास के दौरान व्यक्त किए जाते हैं । इन जीन में होने वाले उत्परिवर्तन प्रायः मानव में ट्यूमर उत्पत्ति से संबंधित होते हैं । कोई डेटा आज otx जीन और नाक गुहा के ट्यूमर के बीच संभव सहसंबंध के बारे में उपलब्ध हैं । इस काम का उद्देश्य अगर OTX1 और OTX2 नाक ट्यूमर के विकास में आणविक मार्करों के रूप में माना जा सकता है समझने के लिए है । हमने इम्यूनोहिस्टोकेमिकल और रीयल-टाइम पीसीआर विश्लेषण के माध्यम से OTX1 और OTX2 जीन की अभिव्यक्ति की जांच करने के लिए नासिका और सिनोन्सल adenocarcinomas का चयन किया । दोनों OTX1 और OTX2 सिनोन्सल आंत्र प्रकार adenocarcinomas (itacs) के सभी नमूनों में अनुपस्थित थे. OTX1 mrna केवल गैर आंत्र प्रकार adenocarcinomas में पहचान की थी (nitacs) जबकि OTX2 mrna केवल घ्राण neuroblastomas (ONs) में व्यक्त किया गया था । हम प्रदर्शित किया है कि दोनों OTX1 और OTX2 जीन के लिए अंतर जीन अभिव्यक्ति एक उपयोगी आणविक मार्कर sinonasal ट्यूमर के विभिंन प्रकार के भेद हो सकता है ।
Introduction
otx एचबी जीन ड्रॉसोफिला ऑर्थोडेन्टिकल जीन (ओटीआरडी) के कशेरूका होमोलॉग होते हैं और वे ट्रांसक्रिप्शन कारकों के लिए सांकेतिक शब्दों में व्याख्या करते हैं जो कि सामान्य रूप से भ्रूण की उत्पत्ति के दौरान व्यक्त किए जाते हैं, लेकिन वे विभिन्न कार्यों के साथ वयस्क जीव में भी व्यक्त किए जा सकते हैं . भ्रूणीय विकास के दौरान वे कोशिका पहचान के विनिर्देश, कोशिका विभेद, और शरीर अक्ष ¹ की स्थिति को नियंत्रित करते हैं । otx परिवार में OTX1 और OTX2 जीन शामिल हैं जो विभिन्न कार्यों को प्रदर्शित करते हैं । OTX1 मस्तिष्क और संवेदी अंग विकास में शामिल है । वयस्क जीव में, यह संवेदी अंगों में व्यक्त किया जाता है और पिट्यूटरी ग्रंथि2के पूर्वकाल पालि में निम्न स्तर पर प्रतिलिखित है; यह हेमेटोपोइसिस में एक भूमिका निभाता है, जो हेमटोपोइटिक प्लूरिपोटेंट और जनक कोशिकाओं3में व्यक्त किया जा रहा है । OTX2 रोस्ट्रल सिर के विकास में शामिल है और इसके अनुवादित प्रोटीन एक morphogen के रूप में कार्य करता है क्योंकि यह एक ढाल के माध्यम से जो अंय जीन सक्रिय या एक spatio-लौकिक तरीके में दमन कर रहे है उत्पंन करता है, इस प्रकार सेल में योगदान प्रसार और भेदभाव । वयस्क जीव में, OTX2 विशेष रूप से कोरॉइड जाल और पिनियल ग्रंथि4में पाया जाता है ।
otx जीन में परिवर्तन अक्सर मानव जंमजात, दैहिक, या चयापचय दोषों की उपस्थिति से संबंधित हैं । लाभ या हानि otx जीन में उत्परिवर्तन tumorigenesis को बढ़ावा देने के अगर वे ठीक से सेलुलर विकास और/ ल्यूकोमियास और लिम्फोमा के रूप में के रूप में अच्छी तरह से कई ठोस ट्यूमर में (जैसे, medulloblastomas6, आक्रामक गैर hodgkin लिम्फोमा2, स्तन कार्सिनोमा7, कोलोरेक्टल कैंसर8, और रेटिनोब्लास्टोमा9), otx HB जीन की अपमानजनक अभिव्यक्ति अच्छी तरह से10प्रलेखित है । इसके अलावा, नेत्र विकास के नियंत्रण में इस जीन के लिए महत्वपूर्ण भूमिका के कारण OTX2 म्यूटेशन anophthalmia और microphtalmia11 के मामलों में प्रदर्शन किया गया है.
ठोस neoplasms के संदर्भ में, आणविक और लक्षणप्ररूपी मार्करों की खोज निदान, वर्गीकरण के लिए एक महत्वपूर्ण चुनौती है, और ट्यूमर11के कई प्रकार के उपचार, उन है कि नाक गुहा और प्राणसाल में उत्पन्न सहित Sinuses. वास्तव में, के बावजूद कि इन क्षेत्रों में केवल एक मामूली संरचनात्मक स्थान पर कब्जा, श्लेष्मल उपकला, ग्रंथियों, कोमल ऊतकों, हड्डी, उपास्थि या तंत्रिका/neuroectodermal, और हेमाटॉलफॉइड कोशिकाओं अक्सर जटिल और histologically अलग की उत्पत्ति के लिए साइट हो सकता है ट्यूमर के समूह । सिनोनेसल ट्रैक्ट से जुड़े नियोप्लाम्स के विभिन्न प्रकारों में कई प्रकार की विशेषताएं मौजूद हैं जो आमतौर पर ऊपरी वायुपाचन तंत्र में या यहां तक कि शरीर के अधिकांश हिस्सों में12में देखी जाती हैं । सिनोन्सल दुर्मताओं दुर्लभ हैं और 1:100000 निवासियों को दुनिया भर में एक वार्षिक घटना वर्तमान, और इसलिए यह tumorigenesis में शामिल रास्ते और वैकल्पिक उपचार रणनीतियों के परीक्षण के बारे में अध्ययन से बचाता है । इस के बावजूद, इमेजिंग तकनीकों में अग्रिमों, सर्जिकल दृष्टिकोण, और रेडियोथेरेपी sinonasal कैंसर के नैदानिक प्रबंधन में सुधार हुआ है. इसके अलावा, सेल लाइनों के रूप में के रूप में अच्छी तरह से पशु मॉडल और कैंसर आनुवंशिक रूपरेखा के विकास वर्तमान में भविष्य के लक्षित विरोधी चिकित्सा13के लिए आधार का गठन । तिथि करने के लिए, वहां कोई OTX1 और/या नाक गुहा के अर्बुद में अभिव्यक्ति OTX2 के बारे में रिपोर्ट कर रहे हैं, paranasal साइनस, और nasopharynx । चूंकि हम पहले से देखा है कि OTX1 और OTX2 स्तन कैंसर7में शामिल हैं, हम अगर इन जीन न केवल सामांय नाक म्यूकोसा में लेकिन यह भी नाक गुहा के ट्यूमर में मौजूद हो सकता है सोचा । इस लक्ष्य तक पहुंचने के लिए हम के पैथोलॉजी विभाग से प्राप्त “ospedale डि circolo” सामान्य mucosa के varese नमूनों में, और नाक और sinonasal adenocarcinomas से एकत्र १९८५ करने के लिए २०१२ और वर्गीकृत के अनुसार विश्व स्वास्थ्य संगठन (डब्ल्यूएचओ) सिर और गर्दन के ट्यूमर का वर्गीकरण । हम उन्हें वास्तविक समय पीसीआर और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री विश्लेषण के माध्यम से विश्लेषण करने के लिए चुनते हैं और हम OTX1 और OTX2 अभिव्यक्ति का मूल्यांकन करते हैं ताकि वे इन प्रकार के ट्यूमर के लिए आणविक मार्करों पर विचार किया जा सके ।
Protocol
Representative Results
Discussion
यह अध्ययन पहली बार पता चलता है कि, एमआरएनए स्तर पर आधारित, एचबी जीन OTX1 और OTX2 सामान्य sinonasal म्यूकोसा और सबम्यूकोसल ग्रंथियों, भड़काऊ जंतु, sinonasal schneiderian पैपिलोमास में व्यक्त कर रहे हैं, और विभिन्न उपकला और neuroectodermal म?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम centro grandi strumenti università dell ‘ insubria, fondazione comunitaria डेल वारेसोत्तो, fondazione डेल मोंटे डि लोम्बार्डिया, और fondazione अन्ना Villa ई फेलीस rusconi द्वारा समर्थित किया गया था ।
Materials
| RecoverAll Total Nucleic Acid Isolation | Applied Biosystem | AM1975 | |
| High-Capacity cDNA Reverse Transcription Kit | Applied Biosystem | 4368814 | |
| TaqMan Universal PCR Master Mix, no AmpErase UNG | Applied Biosystem | 4326614 | |
| ABI Prism 7000 | Applied Biosystem | 270001857 | |
| ACTB probe | Applied Biosystem | Out of production. Sequence protected by copyright | |
| OTX1 probe | Applied Biosystem | Out of production. Sequence protected by copyright | |
| OTX2 probe | Applied Biosystem | Out of production. Sequence protected by copyright | |
| Acqueous Hydrogen Peroxide | Merk | 1072090250 | |
| Citrate Buffer | Sigma-Aldrich | 20276292 | |
| Triton | Sigma-Aldrich | 101473728 | |
| Tris | Merk | 108382 | |
| NaCl | Merk | 106404 | |
| Goat Anti-OTX2 Antibody | Vector Laboratories | Out of production. Catalog number not available | |
| Rabbit Anti-Goat Antibody | Vector Laboratories | BA5000 | |
| ABC-Peroxidase Complex | Vector Laboratories | PK6100 | |
| 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrocloride (DAB) | Sigma-Aldrich | D5905 | |
| Harris Hematoxylin | Bioptica | 0506004/L | |
| Pertek | Kaltek SRL | 1560 | |
| BioClear | Bioptica | W01030799 |
References
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