Summary

En rotte Model af Orthotopic levertransplantation ved hjælp af en roman magnetiske anastomose teknik for Suprahepatic Vena Cava genopbygning

Published: March 19, 2018
doi:

Summary

Rekonstruktion af suprahepatic vena cava (SHVC) er fortsat et vanskeligt skridt i rotte orthotopic lever transplantation. I denne artikel viser vi en trinvis protokol for SHVC genopbygning i rotter med en teknik, Roman magnetiske anastomose.

Abstract

Den rotte model af orthotopic lever transplantation (OLT) er afgørende for transplantation forskning. Det er en meget sofistikeret dyremodel og kræver en stejl indlæringskurve. Indførelsen af manchetten teknik til anastomose af Vena (PV) og infrahepatic vena cava (IHVC) har væsentligt forenklet hårtransplantation procedure i rotter. Men på grund af den korte forreste væg af modtagernes suprahepatic vena cava (SHVC), manchet teknik er meget vanskeligt at bruge til genopbygning af SHVC. De fleste forskere på dette område stadig bruge hånd-Sutur teknik for SHVC genopbygning, hvilket gør det flaskehals skridt i rotte orthotopic lever transplantation. Den magnetiske anastomose teknik (dvs, magnamosis) er en metode til at forbinde to fartøjer, som anvender den tiltrækkende kraft mellem to magneter. Vores seneste undersøgelse har vist, at den magnetiske anastomose teknik er overlegen i forhold til hånd-Sutur teknik for SHVC genopbygning i rotter. I denne artikel viser vi en trinvis protokol for SHVC genopbygning i rotter brug af roman magnetiske anastomose teknik. I denne model, blev genopbygningen af PV og IHVC udført af standard manchet teknikken, mens genopbygningen af galdegang (BD) blev udført af en stent teknik. Den hepatiske re arterialization blev ikke udført. Den magnetiske anastomose teknik lettere meget SHVC genopbygning og væsentligt forkortet anphepatic fasen. Efter en rimelig indlæringskurve, kan selv forskere uden avanceret microsurgical færdigheder producere pålidelige og reproducerbare resultater ved hjælp af denne rotte model af OLT.

Introduction

Den rotte model af orthotopic lever transplantation (OLT) er afgørende for transplantation forskning1,2. Den første rotte OLT blev beskrevet af Lee et al. i 19733. I denne model, blev alle fartøjer rekonstrueret af hånd-Sutur teknik. Hånd-Sutur teknik kræver avancerede microsurgical færdigheder, som væsentligt begrænser dets udnyttelse. Siden da, er blevet rapporteret forskellige ændringer til den originale protokol af rotte OLT. Blandt dem, manchet teknik til anastomose af Vena (PV) og infrahepatic vena cava (IHVC) rapporteret af Kamada et al. i 1979 er betragtes som en væsentlig forbedring til denne model, da det væsentligt forenklet genopbygning procedurer4 . Men på grund af den korte forreste væg af modtagernes suprahepatic vena cava (SHVC), manchet teknik er meget vanskeligt at bruge til genopbygning af SHVC. De fleste forskere på dette område stadig bruge hånd-Sutur teknik for SHVC genopbygning, hvilket gør det flaskehals skridt i rotte OLT5,6,7.

Den magnetiske anastomose teknik (dvs, magnamosis) er en metode til at forbinde to skibe eller andre rørformede strukturer ved hjælp af den tiltrækkende kraft mellem to magneter8,9,10,11. Den magnetiske kraft gradvist komprimerer og bygger om vævet ind i en stærk, sutureless anastomose12,13. Denne komprimering anastomose har vist sig for at være effektive i mennesker14,15. Vi har designet et par magnetiske ringe specielt til anastomose af SHVC i rotter. Vores seneste undersøgelse har vist, at den magnetiske anastomose teknik er overlegen i forhold til hånd-Sutur teknik for SHVC genopbygning i rotte OLT16. Formålet med denne artikel er at give en detaljeret, trinvis protokol for SHVC genopbygning i rotter brug af roman magnetiske anastomose teknik.

Protocol

Protokollen blev gennemført i overensstemmelse med retningslinjerne for pleje og anvendelse af forsøgsdyr og blev godkendt af Udvalget om etik af dyr eksperimenter af Xi’an Jiaotong Universitet, Xi’an, Shaanxi-provinsen, Kina. Bemærk: Ingen af procedurerne i denne protokol blev udført under en kirurgisk mikroskop. 1. Præoperativ forberedelse Design og form af de magnetiske ringe (figur 1) Samle den magnetiske anas…

Representative Results

Efter ca. 10 forsøg, blev magnetiske anastomose teknik for SHVC genopbygning med held beherskes af en forsker, der ikke havde nogen forudgående microsurgical uddannelse. Genopbygningen af SHVC tog mindre end 2 min. Anhepatic fasen for de modtagende rotter var ca 10 min. Ingen blodprop, blødning eller angiostegnosis blev observeret på webstedet SHVC Anastomotiske 1, 5 og 30 dage efter reperfusion. Den ringere vena cavography blev udført på 2 uger efter transplantation. Som vist i <st…

Discussion

Mange kliniske skrider frem i levertransplantation kan henføres til dyreforsøg. Rotte OLT er en udbredt og godt accepterede model i forskning af orgel bevarelse, transplantation immunologi, fysiologi og patologi. Men det er også en meget kompliceret procedure og kræver avancerede microsurgical færdighed. Trods mange forbedringer i proceduren af rotte OLT forblev SHVC anastomose et udfordrende skridt. I denne artikel vil beskrive vi en roman magnetiske anastomose teknik for SHVC genopbygning i rotte OLT. Anvendelsen …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dette arbejde blev støttet af tilskud fra den Ministeriet for uddannelse Innovation Team udvikling Program i Kina (nr. IRT16R57), National Natural Science Foundation i Kina (nr. 81470896), og en forskning fond for unge Talent rekruttering planer af Xi’an Jiaotong Universitet (RW).

Materials

Anesthesia Machine Harvard  tabletop Animal anaesthesia
PLX7000B HF Mobile Digital C-arm System Perlong Medical PLX7000B It is mainly used for the angiography and photography of various operations
Syringe Pump Mindray BeneFusion SP5 intravenous infusion
Isoflurane RWD life Science Co. anesthetic:for the induction and maintenanceof anesthesia
iohexol Shanghai General Pharmaceutical Co  intravascular contrast media  
heparin sodium injection SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD   prevent the formation of thrombosis 
cefuroxime  Glaxo Operations UK Limited  an antibiotic
buprenorphine  TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltd an analgesic
curved microforceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. W40350 surgical tool
hemostatic forceps(straight) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31010 surgical tool
hemostatic forceps(curved) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31020 surgical tool
Satinsky clamp Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC050 surgical tool
needle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J32010 surgical tool
microneedle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WBA040 surgical tool
notched forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J42010 surgical tool
tissue forceps(with hook) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J41010 surgical tool
tissue scissor Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00040 surgical tool
surgical scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00030 surgical tool
micro scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. MR-S121T surgical tool
microvessel clips Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC240 surgical tool
straight microforceps(titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC010 surgical tool
curved microforceps  (titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC020 surgical tool

References

  1. Aller, M. A., et al. A half century (1961-2011) of applying microsurgery to experimental liver research. World journal of hepatology. 4, 199-208 (2012).
  2. Aller, M. A., et al. The value of microsurgery in liver research. Liver international : official journal of the International Association for the Study of the Liver. 29, 1132-1140 (2009).
  3. Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. A technique for orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation. 16, 664-669 (1973).
  4. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  5. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2012).
  6. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. Journal of visualized experiments : JoVE. , e4376 (2013).
  7. Liu, X., He, C., Huang, T., Gu, J. Development of a New Technique for Reconstruction of Hepatic Artery during Liver Transplantation in Sprague-Dawley Rat. PloS one. 10, e0145662 (2015).
  8. Jamshidi, R., Stephenson, J. T., Clay, J. G., Pichakron, K. O., Harrison, M. R. Magnamosis: magnetic compression anastomosis with comparison to suture and staple techniques. Journal of pediatric surgery. 44, 222-228 (2009).
  9. Pichakron, K. O., et al. Magnamosis II: Magnetic compression anastomosis for minimally invasive gastrojejunostomy and jejunojejunostomy. Journal of the American College of Surgeons. 212, 42-49 (2011).
  10. Gonzales, K. D., et al. Magnamosis III: delivery of a magnetic compression anastomosis device using minimally invasive endoscopic techniques. Journal of pediatric surgery. 47, 1291-1295 (2012).
  11. Wall, J., et al. MAGNAMOSIS IV: magnetic compression anastomosis for minimally invasive colorectal surgery. Endoscopy. 45, 643-648 (2013).
  12. Xue, F., et al. Choledochojejunostomy with an innovative magnetic compressive anastomosis: How to determine optimal pressure?. World journal of gastroenterology. 22, 2326-2335 (2016).
  13. Yan, X., et al. Portacaval shunt established in six dogs using magnetic compression technique. PloS one. 8, e76873 (2013).
  14. Dorman, R. M., Vali, K., Harmon, C. M., Zaritzky, M., Bass, K. D. Repair of esophageal atresia with proximal fistula using endoscopic magnetic compression anastomosis (magnamosis) after staged lengthening. Pediatric surgery international. 32, 525-528 (2016).
  15. Russell, K. W., Rollins, M. D., Feola, G. P., Scaife, E. R. Magnamosis: a novel technique for the management of rectal atresia. BMJ case reports. , (2014).
  16. Shi, Y., et al. Magnetic ring anastomosis of suprahepatic vena cava: novel technique for liver transplantation in rat. Transplant international : official journal of the European Society for Organ Transplantation. 28, 89-94 (2015).

Play Video

Cite This Article
Yang, L., Lu, J., Wang, Y., Zhang, M., Shi, Y., Wei, S., Liu, P., Wu, Z., Lv, Y., Wu, R. A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction. J. Vis. Exp. (133), e56933, doi:10.3791/56933 (2018).

View Video