Summary

Un modello del ratto di orthotopic del trapianto del fegato usando una tecnica novella dell'anastomosi magnetico per la ricostruzione della Vena Cava Suprahepatic

Published: March 19, 2018
doi:

Summary

La ricostruzione della vena cava suprahepatic (SHVC) rimane un passo difficile nel trapianto orthotopic del fegato del ratto. In questo articolo, vi mostriamo un protocollo passo-passo per la ricostruzione di SHVC in ratti facendo uso di una tecnica di anastomosi magnetico romanzo.

Abstract

Modello del ratto di trapianto orthotopic del fegato (OLT) è essenziale per la ricerca di trapianto. È un modello animale molto sofisticato e richiede una curva di apprendimento ripida. L’introduzione della tecnica polsino per anastomosi della vena portale (PV) e infrahepatic della vena cava (IHVC) ha notevolmente semplificato la procedura di trapianto in ratti. Tuttavia, a causa della breve parete anteriore della vena cava (SHVC) per i destinatari suprahepatic, la tecnica di polsino è molto difficile da utilizzare per la ricostruzione della SHVC. Maggior parte dei ricercatori in questo campo ancora utilizza la tecnica di sutura a mano per ricostruzione SHVC, che lo rende il passo di collo di bottiglia nel trapianto orthotopic del fegato del ratto. La tecnica di anastomosi magnetico (cioè, magnamosis) è un metodo di connessione due pescherecci che utilizzano la forza di attrazione tra due magneti. Il nostro studio recente ha dimostrato che la tecnica di anastomosi magnetico è superiore per la tecnica di sutura a mano per la ricostruzione di SHVC in ratti. In questo articolo, vi mostriamo un protocollo passo-passo per la ricostruzione di SHVC in ratti utilizzando la tecnica di anastomosi magnetico romanzo. In questo modello, la ricostruzione del PV e IHVC è stata effettuata con la tecnica del bracciale standard, mentre la ricostruzione del dotto biliare (BD) è stata effettuata mediante una tecnica di stent. Il re-arterialization epatico non è stato eseguito. La tecnica di anastomosi magnetico ha reso più facile ricostruzione SHVC e accorciata significativamente la fase di anphepatic. Dopo una curva di apprendimento ragionevole, anche ricercatori senza competenze avanzate di microsurgical possono produrre risultati affidabili e riproducibili utilizzando questo modello del ratto di OLT.

Introduction

Modello del ratto di trapianto orthotopic del fegato (OLT) è essenziale per trapianto ricerca1,2. Il primo ratto OLT è stato descritto da Lee et al. 1973,3. In tale modello, tutte le navi sono state ricostruite mediante la tecnica di sutura a mano. La tecnica di sutura a mano richiede competenze avanzate microsurgical, che limita notevolmente la sua utilizzazione. Da allora, varie modifiche al protocollo originale del ratto OLT sono state segnalate. Fra loro, la tecnica di polsino per anastomosi della vena portale (PV) e infrahepatic della vena cava (IHVC) segnalato da Kamada et nel 1979 è considerata un importante miglioramento per questo modello, come esso notevolmente semplificato le procedure di ricostruzione4 . Tuttavia, a causa della breve parete anteriore della vena cava (SHVC) per i destinatari suprahepatic, la tecnica di polsino è molto difficile da utilizzare per la ricostruzione della SHVC. Maggior parte dei ricercatori in questo campo ancora utilizza la tecnica di sutura a mano per ricostruzione SHVC, che lo rende il passo di collo di bottiglia nel ratto OLT5,6,7.

La tecnica di anastomosi magnetico (cioè, magnamosis) è un metodo di connessione due navi o altre strutture tubolari utilizzando la forza di attrazione tra due magneti8,9,10,11. La forza magnetica gradualmente comprime e rimodella il tessuto in un forte, sutureless anastomosi12,13. Questa anastomosi di compressione ha dimostrato di essere efficace in esseri umani14,15. Abbiamo progettato un paio di anelli magnetici in particolare per l’anastomosi di SHVC in ratti. Il nostro studio recente ha dimostrato che la tecnica di anastomosi magnetico è superiore per la tecnica di sutura a mano per la ricostruzione di SHVC nel ratto OLT16. Lo scopo di questo articolo è quello di fornire un protocollo dettagliate per ricostruzione SHVC in ratti utilizzando la tecnica di anastomosi magnetico romanzo.

Protocol

Il protocollo è stato effettuato in conformità con le linee guida per la cura e l’uso di animali da laboratorio ed è stato approvato dal Comitato per l’etica di esperimenti di animale di Xi ‘ an Jiaotong University, Xi ‘ an, provincia dello Shaanxi, Cina. Nota: Nessuna delle procedure in questo protocollo è stata effettuata sotto un microscopio chirurgico. 1. preparazione preoperatoria Il Design e la forma degli anelli magnetici (F…

Representative Results

Dopo circa 10 tentativi, la tecnica di anastomosi magnetico per SHVC ricostruzione è stata masterizzata correttamente da un ricercatore che non aveva alcuna preparazione preventiva microsurgical. La ricostruzione della SHVC ha preso meno di 2 min. La fase anhepatic per i ratti destinatari era circa 10 min. Nessuna trombosi, sanguinamento o angiostegnosis è stata osservata al sito anastomotic SHVC 1, 5 e 30 giorni dopo riperfusione. La cavografia della vena inferiore è stato effettuato …

Discussion

Molti clinici progredisce nel trapianto del fegato possono essere attribuiti a studi sugli animali. Ratto OLT è un modello ampiamente usato e ben accettato nella ricerca di conservazione di organi, immunologia del trapianto, fisiologia e patologia. Tuttavia, è anche una procedura molto complicata e richiede abilità avanzate di microsurgical. Nonostante molti miglioramenti nella procedura di ratto OLT, l’anastomosi SHVC rimase un passo impegnativo. In questo articolo, descriviamo una tecnica novella anastomosi magnetic…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questo lavoro è stato sostenuto da sovvenzioni dal Ministero dell’educazione innovazione Team sviluppo programma della Cina (No. IRT16R57), Fondazione nazionale di scienze naturali della Cina (No. 81470896) e una ricerca di fondi per giovani talenti reclutamento piani di Xi ‘ an Jiaotong University (RW).

Materials

Anesthesia Machine Harvard  tabletop Animal anaesthesia
PLX7000B HF Mobile Digital C-arm System Perlong Medical PLX7000B It is mainly used for the angiography and photography of various operations
Syringe Pump Mindray BeneFusion SP5 intravenous infusion
Isoflurane RWD life Science Co. anesthetic:for the induction and maintenanceof anesthesia
iohexol Shanghai General Pharmaceutical Co  intravascular contrast media  
heparin sodium injection SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD   prevent the formation of thrombosis 
cefuroxime  Glaxo Operations UK Limited  an antibiotic
buprenorphine  TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltd an analgesic
curved microforceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. W40350 surgical tool
hemostatic forceps(straight) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31010 surgical tool
hemostatic forceps(curved) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31020 surgical tool
Satinsky clamp Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC050 surgical tool
needle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J32010 surgical tool
microneedle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WBA040 surgical tool
notched forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J42010 surgical tool
tissue forceps(with hook) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J41010 surgical tool
tissue scissor Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00040 surgical tool
surgical scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00030 surgical tool
micro scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. MR-S121T surgical tool
microvessel clips Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC240 surgical tool
straight microforceps(titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC010 surgical tool
curved microforceps  (titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC020 surgical tool

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Yang, L., Lu, J., Wang, Y., Zhang, M., Shi, Y., Wei, S., Liu, P., Wu, Z., Lv, Y., Wu, R. A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction. J. Vis. Exp. (133), e56933, doi:10.3791/56933 (2018).

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