Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Fare Submandibular bezi Retroductal nanopartikül enjeksiyon

10.2K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/57521

⸱

3 Mayıs 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  , 

Bu makalede

Özet

Anlayış Tükürük bezi Biyoloji ve roman therapeutics gelişimi için yerel ilaç dağıtım submandibular bezleri için ilgilendirir. Biz teslim doğruluk ve deneysel tekrarlanabilirlik artırmak için tasarlanmış bir güncel ve ayrıntılı retroductal enjeksiyon Protokolü mevcut. Burada sunulan polimer nano tanecikleri teslimini uygulamasıdır.

Özet

Tükürük bezi therapeutics iki ortak hedefleri vardır önleme ve tedavi de takip doku disfonksiyon otoimmün veya radyasyon yaralanma. Yerel olarak biyoaktif bileşikler tükürük bezleri sunarak, daha fazla doku konsantrasyonları güvenli bir şekilde karşı sistemik yönetim elde edilebilir. Ayrıca, hedef doku malzeme ekstra salgı birikimi etkileri önemli ölçüde azaltılabilir. Bu bağlamda, retroductal enjeksiyon Tükürük bezi Biyoloji ve patofizyolojisi soruşturma için yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir. Büyüme faktörleri, Primer hücre, adenoviral Vektörler ve küçük molekül uyuşturucu Retroductal İdaresi yaralanma ayarında bezi işlevi desteklemek için gösterilmiştir. Biz daha önce bezi işlevi ışınlama takip korumak için bir retroductally enjekte nanopartikül-siRNA strateji etkinliğini göstermiştir. Burada, Nanomalzemeler fare submandibular bezi Wharton'ın kanal aracılığıyla yönetmek için son derece etkili ve tekrarlanabilir bir yöntem ayrıntılı (şekil 1). Biz ağız boşluğu erişim açıklar ve daha fazla olarak kullanılan prosedür boyunca kalite kontrolleri gözlemleri ile cannulate Wharton'ın kanal için gereken adımları özetlemektedir.

Giriş

Tükürük bezi disfonksiyon Sjoegren Sendromu, fonksiyonel salgı dokusu ve indüklenen radyasyon hyposalivation (RIH), baş ve boyun kanser radyoterapi1ortak bir sequella bir otoimmün aracılı kaybı da dahil olmak üzere pek çok etiologies vardır. Her iki koşul nedeniyle tükürük fonksiyon kaybı bireylerin oral ve sistemik enfeksiyon, diş çürüğü, sindirim ve yutma bozukluğu, konuşma bozukluğu ve Majör depresyon1,2,3açmaları. Sonuç olarak, yaşam kalitesini önemli ölçüde, için tedavi4yerine belirtiler palliation sınırlı müdahaleler ile u....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Aşağıda verilen tüm vivo içinde yordamlar hayvan kaynakları, Rochester Üniversitesi, Rochester, NY Üniversitesi Komitesi tarafından kabul edildi.

1. hazırlık

  1. 32 G kafa içi kateter boru ile tel iç metin kullanılarak, eğimli bir sokak, yaklaşık 45 ° uzun eksen oluşturmak üzere hortumunun 3 cm kesme. Tel en az 1 cm boru daha uzun olduğunu doğrulayın.
  2. PSMA nanopartikül çözüm (şekil 1) 50 µL veya diğer enjeksiyon malzemesi Hamilton şırınga yükleyin. Enjeksiyon sırasında barotrauma olasılığını azaltmak için çıkarmak belgili tanımlık tenkıye stylet ile kateter boru takın ve ölü cilt sınırd....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Retroductal enjeksiyon NPs fare SMG (şekil 1) yönetmek için kullanılabilir. Burada, biz 50 µg PSMA NPs Texas kırmızı fluorophore ile etiketli teslim.

Fare uygun yerleştirme facile erişim ve görselleştirme (şekil 2A-B) ağız tabanının sağlar. Submandibular papilla iki etli çıkıntılar dil altında tanımlanır. Cannulation (şekil 2C

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Retroductal enjeksiyon Tükürük bezi için yerelleştirilmiş ilaç dağıtım için önemlidir. Bu teknik Sjogren sendromu ve RIH9,10,28dahil olmak üzere koşullar terapötik ajanlar eleme içinde uygulama alanı vardır. Retroductal enjeksiyon yoluyla SMG içine doğrudan ilaç dağıtım bağışıklık harekete geçirmek11de dahil olmak üzere kapalı-hedef etkileri azaltmak için potansiyel sistemik yönetiminde önemli bir avantaj.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar ifşa gerek yok.

Teşekkürler

Bu yayında bildirilen araştırma diş Ulusal Enstitüsü ve Fasiyal araştırma (NIDCR) ve ulusal sağlık Enstitüleri Ödülü numarası R56 DE025098, UG3 DE027695 ve F30 CA206296 altında Ulusal Kanser Enstitüsü (ncı) tarafından desteklenmiştir. İçeriği yalnızca yazarlar sorumludur ve mutlaka Ulusal Sağlık Enstitüleri resmi görüşlerini temsil etmiyor. Bu eser de NSF DMR 1206219 ve IADR yenilik Oral bakım Ödülü (2016) tarafından desteklenmiştir.

IVIS deneyler yapmakta yardımını Jayne Gavrity teşekkür etmek istiyorum. Karen Bentley onun giriş ve EM yerine yardım için teşekkür etmek istiyorum. Pei-Lun Weng IHC ile yaptığı yardım için teşekkür etmek istiy....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Pilokarpin hidroklorürSigma AldrichP6503Pilokarpin
Öğrenci Vannas Bahar MakasıGüzel Bilim Araçları91500-9Trakeostomi için Bahar Makası
Steril Salin SolüsyonuMedlineRDI30296HSaline
Dumont #7 ForsepsGüzel Bilim Araçları11274-20Kavisli Forseps
Dumont #5 ForsepsGüzel Bilim Araçları11251-10Düz Forseps
Standart Desen ForsepsGüzel Bilim Araçları11000-12Künt Forseps
İnce Makas - Tungsten KarbürGüzel Bilim Araçları14568-09Diseksiyon Makası
Mikrohematokrit Heparinize Kılcal TüplerFisher Scientific22362566Kılcal tüpler
Kayganlaştırıcı Göz MerhemiYenilemeN/AYenileme Lacri-Lube
Keçi poliklonal anti-Nkcc1Santa Cruz BiotechSC-21545Nkcc1 Antikor
DAPI (4 ',6-Diamidino-2-Fenilindol, Dihidroklorür)Thermo Fisher ScientificD1306DAPI
GraphPad PrizmaGraphPadver6.0İstatistiksel Yazılım
Pamuk uçlu aplikatörMedlineMDS202000Göz merhemi için aplikatör
0.5cc İnsülin Şırıngası, 29G x 1/2 "BD7629İntraperitoneal enjeksiyon için Şırınga

Kaynaklar

  1. Miranda-Rius, J., Brunet-Llobet, L., Lahor-Soler, E., Farre, M. Salivary Secretory Disorders, Inducing Drugs, and Clinical Management. International Journal Of Medical Sciences. 12 (10), 811-824 (2015).
  2. Acauan, M. D., Figueiredo, M. A. Z., Cherubini, K., Gomes, A. P. N., Salum, F. G.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Retroduktal EnjeksiyonWharton Kanalı KanülasyonuNanopartikül İletimiMurin ModelTükürük Bezi TedavisiDuktal PunksiyonIn Vivo GörüntülemeFloresan GörüntülemeAkış Sitometrisi