In dit artikel presenteren we een in vitro en in situ protocol om een peesspleet van maximaal 1,5 cm te herstellen door deze te vullen met gemanipuleerd collageentransplantaat. Dit werd uitgevoerd door een aangepaste hechttechniek te ontwikkelen om de mechanische belasting te nemen totdat het transplantaat in het gastheerweefsel rijpt.
Chirurgisch beheer van grote peesdefecten met peestransplantaten is een uitdaging, omdat er een eindig aantal plaatsen is waar donoren gemakkelijk kunnen worden geïdentificeerd en gebruikt. Momenteel wordt deze leemte opgevuld met peesauto-, allo-, xeno- of kunstmatige grafts, maar klinische methoden om ze te beveiligen zijn niet noodzakelijkerwijs vertaalbaar naar dieren vanwege de schaal. Om nieuwe biomaterialen te evalueren of een peestransplantaat bestaande uit collageen type 1 te bestuderen, hebben we een aangepaste hechttechniek ontwikkeld om de gemanipuleerde pees in lijn te houden met de peepunten. Mechanische eigenschappen van deze grafts zijn inferieur aan de inheemse pees. Om gemanipuleerde pees op te nemen in klinisch relevante modellen van belast herstel, werd een strategie aangenomen om het weefsel gemanipuleerde peestransplantaat te ontlasten en de rijping en integratie van de gemanipuleerde pees in vivo mogelijk te maken totdat een mechanisch gezonde neopees werd gevormd. We beschrijven deze techniek met behulp van de integratie van het collageen type 1 weefsel gemanipuleerde pees construct.
Peesruptuur kan optreden als gevolg van extrinsieke factoren zoals traumatische scheuren of overmatige belasting van de pees. Door de externe trekkrachten die op een peesreparatie worden geplaatst, ontstaat er onvermijdelijk een opening bij de meeste peeshersteltechnieken. Momenteel worden peesdefecten/gaten opgevuld met auto-, allo-, xeno- of kunstmatige grafts, maar hun beschikbaarheid is eindig en de donorplaats is een bron van morbiditeit.
De weefselmanipulatiebenadering om peestransplantaat te fabriceren uit een natuurlijk polymeer zoals collageen heeft het onderscheidende voordeel dat het biocompatibel is en vitale extracellulaire matrix (ECM) componenten kan leveren die celintegratie vergemakkelijken. Door een gebrek aan fibrillaire uitlijning zijn de mechanische eigenschappen van de gemanipuleerde pees (ET) echter inferieur aan de inheemse pees. Om de mechanische eigenschappen van het zwakkere collageen te verhogen, zijn veel methoden gebruikt, zoals fysieke cross-linking onder vacuüm, UV-straling en dehydrothermale behandelingen1. Ook door chemische cross-linking met riboflavine verhoogden enzymatische en niet-enzymatische methoden de collageendichtheid en de Young’s modulus van het collageen in vitro2,3. Door het toevoegen van cross-linking middelen wordt de biocompatibiliteit van het collageen echter aangetast, aangezien studies een verandering van 33% in mechanische eigenschappen en 40% verlies van levensvatbaarheid van de cel hebben aangetoond3,4,5. Geleidelijke opbouw van uitlijning en mechanische sterkte kan worden verkregen door cyclische belasting6; dit kan echter efficiënt worden verkregen in vivo7.
Om ET in vivo te integreren en kracht te verkrijgen zonder de noodzaak van chemische verandering, zou een benadering zijn om een stabiliserende hechttechniek te gebruiken om het zwakkere construct op zijn plaats te houden. De meeste peesreparaties zijn afhankelijk van het hechtontwerp om peesuiteinden bij elkaar te houden; daarom zou aanpassing van deze bestaande technieken een logische oplossing kunnen bieden8,9.
Tot de jaren 1980 werden 2-streng reparaties veel gebruikt, maar recente chirurgische literatuur beschrijft het gebruik van 4 strengen, 6 strengen of zelfs 8 strengen in reparatie10,11. In 1985 beschreef Savage 6-strengs hechttechnieken met 6 ankerpunten, en het was aanzienlijk sterker dan de Bunnell-hechttechniek die 4 strengen 12gebruikt. Ook zijn 8-streng reparaties 43% sterker dan andere strengen in kadaver- en in situ-modellen, maar deze reparaties worden niet op grote schaal toegepast omdat het technisch moeilijk wordt om de reparaties nauwkeurig te reproduceren13,14,15,16. Daarom heeft een groter aantal kernnaadstregen betrekking op een evenredige toename van de biomechanische eigenschappen van de gerepareerde pees. Er is echter een verlies van levensvatbaarheid van de cel rond de hechtpunten en trauma door overmatig hechten kan ten koste gaan van de pees, wat de peesgenezing in gevaar kan brengen17. Hechttechnieken moeten zorgen voor een sterk geometrisch herstel dat evenwichtig en relatief inelastisch is om pees gapping na reparatie te minimaliseren. Bovendien moeten de locatie van de hechtdraad en de knopen strategisch worden geplaatst om ervoor te zorgen dat ze het glijden, de bloedtoevoer en de genezing niet verstoren totdat voldoende kracht is verkregen10,18.
Om de haalbaarheid vast te stellen om zwakkere ET-transplantaten of ander transplantaatmateriaal tussen gescheurde pezen te beveiligen, hebben we een nieuwe hechttechniek ontwikkeld die het transplantaat kan ontlasten, zodat het kan rijpen en geleidelijk in vivo in het gastheerweefsel kan integreren.
In deze studie werd tissue engineered type I collageentransplantaten gekozen als peestransplantaat omdat collageen een natuurlijk polymeer is en wordt gebruikt als biomateriaal voor verschillende tissue engineering-toepassingen27,28. Ook vormt collageen 60% van de droge massa van pees, waarvan 95% type 1 collageen 21,29,30,31,</sup…
The authors have nothing to disclose.
De auteurs willen de UCL bedanken voor de financiering van dit project.
Rat tail type 1 Collagen | First Link, Birmingham, UK | 60-30-810 | |
prolene sutures 6-0 | Ethicon Ltd, Edinburgh, U.K. | EP8726H | |
prolene sutures 3-0 | Ethicon Ltd, Edinburgh, U.K. | D8911 | |
Whatman filter paper | SIGMA-ALDRICH | WHA10010155 | |
Gibco DMEM, high glucose | Thermo Fisher Scientific | 11574486 | |
Nylon mesh | Plastok (Meshes and Filtration) Ltd. | NA |