Summary

쥐에 있는 이경 가시화 및 행동 박수 깜짝 반응을 사용하여 확인을 가진 전도성 청력 손실의 간단한 외과 유도

Published: October 26, 2019
doi:

Summary

여기에서, 우리는 박수 에 의하여 이경 시각화 및 행동 평가를 통해 외과 고막 천자 및 검증을 통해 복제 전도성 청력 손실 유도를 확립하는 프로토콜을 제시합니다.

Abstract

전도성 난청 (CHL)은 인간에 있는 널리 퍼진 청각 손상입니다. 프로토콜의 목표는 설치류에서 CHL을 유도하기위한 간단한 수술 절차를 설명하는 것입니다. 이 프로토콜은 고막 천자에 의한 CHL을 보여줍니다. CHL 수술의 검증은 박수 깜짝 반응에 의한 이경 검사 및 행동 평가에 의해, 복제 및 신뢰성 모두, 그리고 난청이 발생했음을 입증하는 간단한 방법이다. 간단한 CHL 절차는 청력 손실 연구에서 다른 추구에 대한 재현성과 유연성으로 인해 유리합니다. 외과 적 접근법에 의한 CHL 유도의 한계는 청력 검사에서 외과 적 수술 및 자신감을 수행하는 학습 곡선과 관련이 있습니다. CHL에 의한 청각 장애를 유도하면 청력 손실의 신경 증상과 행동 결과를 쉽게 연구 할 수 있습니다.

Introduction

어린이와 성인의 난청 유병률은 각각 약 19.5%1% 및 15.2%2입니다. 그러나, 이상한 청력 검열을 가진 모든 신생아의 대략 39.3%는 질병 통제 센터에 의해 보고된 대로 구제 처리를 수신하지 않습니다3. 난청은 널리 연구된 상태이며, 설치류는 정상적인 청력 및 청력 관련 장애를 연구하는 견고한 모델입니다4,5,6,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15. 전도성 청력 손실 (CHL)과 같은 청력 장애는 청각 피질4에서단기 시냅스 우울증의 증가로 이어지며, 이는 주파수 변조 감지 임계값과 관련된 얕은 심리 측정 경사를 초래합니다. 5.외과적 제거/변위에 의한 전도성 난청 모델, 고막(TM) 천자 또는 귀마개가 용이하게 사용가능하며 난청 모델5,14의 신속한 유도를 허용한다. ,15,16,17,18. 본 프로토콜 및 방법의 목적은 설치류에서 간단하고 재현 가능한 CHL 모델을 입증하는 것입니다.

본 프로토콜은 저렴하며(모든 도구에서 미화 300달러) 다른 연구 활동을 쉽게 수정할 수 있습니다. 쥐는 중이 해부학19,20,21,22,23,외과 접근법24,중이염25의모델의 상세한 평가를받았습니다. 26,27 및 TM 천공 재생16,17, 18,28,29,30,공부하기에 이상적인 모델만들기 청력 손실. 여기에서, 간단한 CHL 유도 절차는 쥐에 있는 박수 깜짝 반응으로 이경 및 행동 평가에 의하여 확인으로 기술되고, 그 때 청력 감소의 추가 후유증을 탐구하기 위하여 이용될 수 있습니다. CHL 절차는 TM의 외과 적 천자에 의해 유도됩니다. CHL 절차의 검증은 TM의 부재를 결정하기 위해 이경 시각화에 의해 수행된다. 행동 평가는 높은 데시벨 (dB) 음압 수준 (SPL) 손 박수에 의해 수행된다. 이 방법은 이전에 다양한 설치류에 적용되었습니다. 그것은 복제하기 쉽고, 강력한 심리측정 차이와 신경생리반응의변화를 일으킨다4,5,16,17,18.

Protocol

본 연구 및 절차는 홍콩 시립 대학, 홍콩 대학 및 홍콩 특별 행정구 보건부의 동물 연구 윤리 위원회의 승인을 받았습니다. 1. 동물 2 개월의 스프라그 – Dawley (SD) 쥐를 사용합니다 (N = 90, 200-250 g).참고 : 설치류는 홍콩 대학의 공인 실험실 동물 단위에 의해 제공되었다. 실험실 동물 연구 실에서 일정한 25 °C 온도와 60-70 % 습도에서 쥐를 유지합니다. 음식…

Representative Results

간단한 CHL 절차는 90 마리의 쥐에 수행되었고이 그룹 2에서 상당한 출혈이 있었고 2는 행동 박수 에 의해 평가된 대로 다음날 청력 손실이 없었습니다. 이 네 마리의 쥐는 버려졌다. 쥐는 합병증으로 인해 논의의 이유에 의해 설명 된 대로 폐기되어야한다. TM 천자 및/또는 malleus 변위/제거를 유도(그림 2B)행동 표현 (즉, CHL – 큰 소리로 dB SPL 깜짝 놀라게?…

Discussion

우리는 쥐에 있는 이경 비주얼리제이션 및 행동 박수 깜짝 반응을 사용하여 확인을 가진 CHL의 간단한 외과 감응을 기술합니다. 여기에서 우리는 쥐에 방법을 설명하고 이전에이 방법은 gerbils 및 마우스에 적용되었습니다. 이 방법은 다른 설치류에 쉽게 채택 될 수 있습니다. CHL의 유도는 청각 피질 변경 및 정신 물리학 행동 사실 인정에 명시되는 청력 손실의 미묘한 양식의 연구 결과를<sup class="xr…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 작품은 홍콩 연구 보조금 위원회, 초기 경력 계획, 프로젝트 #21201217 C. L.에 의해 부분적으로 지원되었다, 프로젝트 뇌 매핑 청각 및 소음 공해 연구에 응용 프로그램과 전기 생리학을 안내. 우리는 포스그라도 엔 시엔시아스 Biomédicas, Universidad Nacional Autónoma 드 멕시코 (UNAM)의 인스티투토 드 Neurobiología, 대학원 펠로우십에 대한 콘세조 Nacional 드 시엔시아 y Tecnología (CONACyT) 멕시코 에 FAM Manno.

Materials

Latex, polyvinyl or nitrile gloves AMMEX Use unpowdered gloves 8-mil
Micro spring scissors (see Fig. 1b) RWD Life Science S11035-08 8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice
Otoscope mini 3000 HEINE  D-008.70.120M Standard LED otoscope will suffice
Rat or mouse JAX labs Any small rodent 
Small rodent cage Tecniplast 1284L Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodent are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2

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Manno, F. A. M., Manno, S. H. C., Ma, V., Barrios, F. A., Cho, W. C., Cheng, S. H., Lau, C. Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat. J. Vis. Exp. (152), e57993, doi:10.3791/57993 (2019).

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