إنشاء ملامسة Colonic في الفئران
Summary
تسرب أناستوموتيك أو انهيار بعد الجراحة سبب رئيسي للوفيات والمراضة بعد العملية الجراحية. لدينا الجراحة لخلق ملامسة colonic طريقة موثوقة واستنساخه لدراسة آليات الشفاء من أناستوموسيس.
Abstract
أناستوموسيس المعوية تتم عادة في العمليات الانتخابية والناشئة على حد سواء. وحتى مع ذلك، تسرب أناستوموتيك مضاعفات شديدة يخشى العمليات الجراحية colonic ويمكن أن يحدث في تصل إلى 26% أناستوموسيس الجراحية، مع معدل الوفيات التي تصل إلى 39 في المائة للمرضى الذين يعانون من تسرب من هذا القبيل. حاليا، لا يزال هناك ندرة في البيانات تفاصيل الآليات الخلوية للشفاء أناستوموتيك. وضع استراتيجيات وقائية وأساليب العلاج لتسرب أناستوموتيك يمكن أن تكون إلى حد كبير بوتينتياتيد بفهم أفضل للشفاء أناستوموتيك المناسبة.
مورين نموذج مثالي كما أظهرت الدراسات السابقة أن ملامسة مورين هو الأكثر سريرياً مماثلة للحالة البشرية مقارنة بنماذج حيوانية أخرى. نحن نقدم نموذجا مورين استنساخه بسهولة من ملامسة colonic في الفئران التي ستسمح لمزيد التوضيح للشفاء أناستوموتيك.
Introduction
مضاعفات شديدة يخشى من ملامسة الجراحية من الأمعاء هو انهيار أناستوموتيك أو تسرب. تسرب أناستوموتيك، الذي يسبب تسرب محتويات إينترالومينال في تجويف البطن، وهو يهدد الحياة ويمكن أن تؤدي بسرعة إلى الانتان داخل البطن؛ صدمة أسعار تتفاوت من 0.3% إلى 5.5% بعد أناستوموسيس الأمعاء، وترتفع إلى بين 0.5% و 26%1،أناستوموسيس colonic2. يمكن أن تكون معدلات الوفيات بعد تسرب يصل إلى 39% بسبب بداية سريعة للانتان والتقدم السريع للموت بعد تلوث إينترابدومينال3. حاليا تستند استراتيجيات وقائية وطرائق العلاج الفيزيولوجيا المرضية التي ليست مفهومة تماما.
حاليا، شفاء أناستوموتيك هو غالباً مقارنة بشفاء الجروح الجلدية درس على نطاق واسع، مما يبرهن على أنه رسالة بفاكس فقيرة نسبيا. الشفاء يحدث في سلسلة من المراحل المتداخلة، بدءاً بالمرحلة الأولى متخلفة. خلال أيام 0-4 بعد إنشاء مفاغره معوية، يعرف استجابة التهابات حادة أن يزيل جرح الحطام الخلوية مرحلة انتقالية. المقبل، على مدى أيام 3-4، يجسد انتشار الليفية وإنتاج الكولاجين في مرحلة فيبروفاسيا. وأخيراً، بعد يوم 10، المعروف فترة طويلة من إعادة عرض الكولاجين مرحلة النضج. من المهم أن نلاحظ أن قوة أناستوموتيك منخفضة جداً، ويعتمد على دعم خارجية من دبابيس توضع جراحيا أو خياطة حتى الكولاجين هو المودعة4. فهم الدور وتوقيت كل طبقة جدار الأمعاء يلعب في التئام الجروح أناستوموتيك والمشاركة في أنواع الخلايا الملتهبة بوساطة مثل الضامة، فضلا عن توضيح علامات بديلة للتنبؤ بالفشل أناستوموتيك أو يمكن النجاح يقلل كثيرا من الاعتلال والوفيات، ونفقات الرعاية الصحية في أعقاب عمليات القولون5.
نموذج مورين ثبت في دراسات سابقة مفيدة في محاكاة ملامسة الإنسان6. وفي حين توجد أمثلة شعبية ومجربة ومدروسة من طراز أناستوموتيك colonic مورين، ولا سيما الطريقة الموضحة كومن et al. 7، لصالح هذه النماذج اللفائفيه أو تصاعدي كولوكولونيك تقنيات أناستوموتيك8. وقد أثبتت الدراسات السابقة للمرضى البشر اختلاف كبير في معدلات التسرب بين اللفائفيه وكولوكولونيك وأناستوموسيس القولون والمستقيم، تسليط الضوء على الحاجة إلى المزيد من النماذج التجريبية في مختلف المواقع التشريحية. أساليب إضافية، وتستخدم شعبيا تهدف إلى تطوير نموذج الذي يقوم عمدا تسرب أناستوموتيك بدلاً من توضيح الآليات الخلوية اللازمة للجرح أناستوموتيك الطبيعي شفاء9. نماذج الفئران حاولت في الماضي ولكن لديها معدلات ديهيسسينسي أناستوموتيك و/أو علامات تسرب (أي تشكيل الخراج) أقل بكثير من البشر والفئران6،7. بالإضافة إلى ذلك، تتوفر خطوط تجريبية أكثر وراثيا في الفئران من الفئران. وهذا يجعل من نموذج الفئران أقل فائدة لطراز أناستوموتيك. وبالإضافة إلى ذلك، كان الخنزير والكلاب نماذج التحقيق السريرية أقل من6،النموذجي موريني7.
ونحن نقترح إجراء آمنة وبسيطة من الناحية التقنية، واستنساخه بسهولة وسرعة لإنشاء أناستوموسيس colonic في نموذج مورين ينبغي تسهيل التحقيق في إليه التبليغ من الجرح أناستوموتيك الشفاء10 .
Protocol
Representative Results
Discussion
وهناك العديد من الخطوات الرئيسية لضمان النجاح والحد من معدلات الاعتلال/الوفيات المرتبطة بهذا الإجراء. أولاً، ضمان المعالجة الدقيقة للأنسجة المعوية والعناية لمنع الإصابة الجر عند الدورية الأحشاء لفضح القولون. التوتر لا مبرر له في الأمعاء أو مساريق يمكن الإصابة نخر الأمعاء الأمعاء أو الم…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
لا شيء
Materials
| C57BL6/J mice | Jackson Labs | #00664 | |
| Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 50033 | |
| Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorphine 0.3 mg/ml | Reckitt Benckiser Pharma Inc | NDC 12496-0757-5 | |
| 1 cc insulin syringe, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Chloraprep Shampoo | Medline | APL82287 | |
| Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
| BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
| Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37 °C prior to use |
| 10 ml syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
| 4-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", PS-2 needle | Henry Schein | 6546037 | |
| Blue monofilament suture 24” BV-1 needle | Henry Schein | 8305H | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
| Cole-Parmer Microscissors, Standard Grade, Straight, 4". | Cole- Parmer | EW-10818-06 | |
| Medline Sterile lubricating jelly | Medline | MDS032273H |
References
- Murrell, Z. A., Stamos, M. J. Reoperation for anastomotic failure. Clinics in colon and rectal surgery. 19, 213-216 (2006).
- Shaban, F., Carney, K., McGarry, K., Holtham, S. Perforated Diverticulitis: To Anastomose or Not to Anastomose? A Systematic Review and Meta-Analysis. International journal of surgery (London, England). , (2018).
- Chambers, W. M., Mortensen, N. J. Postoperative leakage and abscess formation after colorectal surgery. Best practice, research. Clinical gastroenterology. 18, 865-880 (2004).
- Ashkanani, F., Krukowski, Z. H. Surgery – Oxford International Edition. Intestinal Anastomosis. 20, 104-107 (2002).
- Raptis, D., Pramateftakis, M. G., Kanellos, I. Our 20-year experience with experimental colonic anastomotic healing. Journal of medicine and life. 11, 5-14 (2018).
- Pommergaard, H. C., Rosenberg, J., Schumacher-Petersen, C., Achiam, M. P. Choosing the best animal species to mimic clinical colon anastomotic leakage in humans: a qualitative systematic review. European surgical research. Europaische chirurgische Forschung. Recherches chirurgicales europeennes. 47, 173-181 (2011).
- Komen, N., et al. Colorectal anastomotic leakage: a new experimental model. The Journal of surgical research. 155, 7-12 (2009).
- Perry, T., Borowiec, A., Dicken, B., Fedorak, R., Madsen, K. Murine ileocolic bowel resection with primary anastomosis. Journal of visualized experiments : JoVE. , e52106 (2014).
- Pommergaard, H. C., Achiam, M. P., Rosenberg, J. Colon anastomotic leakage: improving the mouse model. Surgery today. 44, 933-939 (2014).
- Bosmans, J. W. A. M., Jongen, A. C. H. M., Bouvy, N. D., Derikx, J. P. M. Colorectal anastomotic healing: why the biological processes that lead to anastomotic leakage should be revealed prior to conducting intervention studies. BMC Gastroenterology. 15, 180 (2015).
