जीसी-एमएस थर्मल डेकोर्पशन सैंपलिंग के लिए हेडस्पेस अस्थिर संग्रह तकनीक का उपयोग करके पुष्प खुशबू वोलेटाइल्स का रैपिड कलेक्शन
Summary
यहां, हम एक गैर विनाशकारी नमूना प्रक्रिया का उपयोग कर, फूल खिलने से पुष्प खुशबू volatiles इकट्ठा करने के लिए एक प्रोटोकॉल पेश करते हैं ।
Abstract
कई फूल परिवारों की सुगंध का नमूना लिया गया है और volatiles का विश्लेषण किया गया है । सुगंध बनाने वाले यौगिकों को जानना उन फूलों के संरक्षण के लिए एक महत्वपूर्ण कदम हो सकता है जो खतरे में हैं या खतरे में हैं। क्योंकि परागणकों को आकर्षित करने के लिए पुष्प सुगंध महत्वपूर्ण है, इस विधि का उपयोग परागण को बेहतर ढंग से समझने या बढ़ाने के लिए किया जा सकता है। हम पुष्प सुगंध वोलेटाइल्स इकट्ठा करने के लिए पोर्टेबल चारकोल एयर फिल्टर और वैक्यूम का उपयोग करके एक प्रोटोकॉल पेश करते हैं, जिसका विश्लेषण जीसी-एमएस द्वारा किया जाता है। इस विधि का उपयोग करके, सुगंध वोलेटाइल्स को एक मशीन के साथ गैर-विनाशकारी विधि का उपयोग करके नमूना लिया जा सकता है जिसे आसानी से ले जाया जाता है। यह पद्धति एक तेजी से नमूना प्रक्रिया का उपयोग करती है, नमूना समय को 2-3 घंटे से लगभग 10 मिनट तक काटती है। जीसी-एमएस का उपयोग करके, प्रामाणिक मानकों के आधार पर सुगंध यौगिकों को व्यक्तिगत रूप से पहचाना जा सकता है। सामग्री सेटअप से लेकर डेटा आउटपुट एकत्र करने तक सुगंध और नियंत्रण डेटा एकत्र करने के लिए उपयोग किए जाने वाले चरणों को प्रस्तुत किया जाता है।
Introduction
फूल आम तौर पर परागणकों को आकर्षित करने के लिए उपयोग की जाने वाले सुगंध का उत्पादन करते हैं। ये सुगंध कई रासायनिक यौगिकों से बनी होती हैं , जो एक साथ पुष्प मिश्रण1,2,3के रूप में कार्य करती हैं । इन सुगंध के बिना, फूल परागणकों का उपयोग करके अपनी आनुवंशिक जानकारी पर पारित होने की संभावना कम होगी। पुष्प खुशबू कई फूल संयंत्र परिवारों में प्रलेखित किया गया है, ऑर्किडेसी के साथ अधिक आम परिवारों में से एक जा रहा है4का अध्ययन किया । परागण में पुष्प सुगंध की भूमिका को समझने के लिए, दिन के विभिन्न समयों पर फूलों से उत्सर्जित किए जा रहे रासायनिक यौगिकों को इकट्ठा करने और विश्लेषण करना महत्वपूर्ण है और कई दिनों के दौरान सप्ताहों के दौरान फूल खिलता खुला होता है, क्योंकि सुगंध समय के साथ भिन्न हो सकती है5।
हीथ और मानुकेन6द्वारा इस प्रकार के नमूने के लिए एक प्रारंभिक प्रोटोकॉल विकसित किया गया था । उनके नमूने के तरीकों का लक्ष्य नमूना (जैसे, पौधों, कीड़ों) का अध्ययन किया जा रहा है पर तनाव को कम करना था। इससे पहले के कागजात में प्रलेखित किया गया था कि सुगंध एकत्र करने के लिए खिलने वाले फूलों को हटाने जैसे पौधे के लिए विनाशकारी प्रक्रियाओं की आवश्यकता थी। कैनसिनो और डैपर7,8 द्वारा हाल ही में पुष्प खुशबूप्रकाशनों नेइसी तरह के तरीकों का उपयोग किया। इस अध्ययन ने फूलों को कांच के कक्षों में डाल दिया और उनके ऊपर शुद्ध हवा पारित की; फिर कक्ष से सुगंध यौगिकों को स्पष्ट पाश्चर पिपेट में असुरक्षित बहुलक एडोरबेंट्स पर अवशोषित किया गया था। सुगंध इस अध्ययन के दौरान कम से कम दो घंटे के लिए एकत्र किए गए थे। सैलर एट अल9 दक्षिण फ्लोरिडा में एक एपिफाइटिक आर्किड पर पुष्प खुशबू अध्ययन किया, बहुत मूल अध्ययन10की तरह । फिर, इस अध्ययन के लिए फूलों की आवश्यकता के लिए दो घंटे से अधिक के लिए नमूना के लिए खुशबू volatiles इकट्ठा, खुशबू के साथ असुरक्षित बहुलक adsorbent पर एकत्र । यहां कागज एक गैर विनाशकारी विधि है कि बहुत जल्दी नमूना के लिए अनुमति देता है, केवल 10 मिनट तक चलने प्रस्तुत करता है । इसके अलावा, ग्लास चैंबर ओवन बेकिंग बैग का उपयोग करने के बजाय उपयोग किया जाता है, जो कक्ष के अधिक लचीले आंदोलन के लिए अनुमति देता है और फूलों को नुकसान की संभावना को कम करता है। ये बैग कई आकारों में आते हैं जो बैग के आकार का चयन करने का विकल्प देते हैं जो नमूने या आसपास की सामग्री को नुकसान पहुंचाए बिना आसानी से व्यक्तिगत नमूनों को फिट कर देगा। इस अध्ययन में उपयोग किया जाने वाला एडोबेंट टेनेक्स असुरक्षित बहुलक एसोर्बेंट था। यह Porapak से अलग है, क्योंकि नमूना थर्मल विश्लेषण के लिए जीसी-एमएस कॉलम पर desorbed किया जा सकता है, एक रासायनिक विलायक के उपयोग को नष्ट करने ।
इस अध्ययन में विधियां फूलों द्वारा उत्पादित सुगंध वोलेटाइल्स का नमूना लेने का एक तरीका प्रदान करती हैं और इसका उपयोग अन्य नमूनों से भी, जैसे कीट फेरोमोन, या मशरूम वोलेटाइल्स के नमूने के लिए किया जा सकता है। सैंपलिंग के लिए कम समय का मतलब है कि सैंपल पर कम तनाव होता है और कम समय में कई सैंपल इकट्ठा करने की क्षमता होती है। उदाहरण के लिए, सैलर एट अल9में, फूल रात में केवल सुगंधित था, इसलिए हर रात केवल दो या तीन नमूने एकत्र किए जा सकते थे। यहां विधि के साथ एक ही फूल से 15-20 मिनट के अंतराल पर पूरी रात नमूने लिए जा सकते थे। इसके अतिरिक्त, कांच कक्षों के बजाय बैग का उपयोग करके, हेडस्पेस को लुप्तप्राय या धमकी दी गई पौधों की प्रजातियों पर सीटू संग्रह के लिए क्षेत्र में नमूने के लिए आसान निलंबित किया जा सकता है। यहां प्रस्तुत विधि का उपयोग करके, हम जमीन से 1.5 से 2 मीटर ऊपर फूलों का नमूना लेने में सक्षम थे। ये विधियां प्रयोगशाला और क्षेत्र में सुगंध संग्रह के लिए अविश्वसनीय रूप से उपयोगी हैं, और शोधकर्ताओं को एक नमूना तकनीक प्रदान करती है जो नमूने के लिए तेज और गैर-विनाशकारी है।
Protocol
Representative Results
Discussion
हालांकि इस तकनीक को अपनी नमूना गति और पोर्टेबिलिटी के लिए अविश्वसनीय रूप से मूल्यवान है, एक सीमा यह एपिफाइटिक प्रजातियों के लिए उपयोग कर रहा है, या उन पेड़ों पर बढ़ रही है और जमीन से नहीं । मूल अध्ययन<sup class…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यूएसडीए-एआरएस अनुसंधान परियोजना संख्या संख्या 6036-22000-028-00डी । इस प्रकाशन में व्यापार, फर्म या निगम के नाम का उपयोग पाठक की जानकारी और सुविधा के लिए है। इस तरह के उपयोग के लिए संयुक्त राज्य अमेरिका के कृषि विभाग या किसी भी उत्पाद या सेवा के कृषि अनुसंधान सेवा द्वारा एक आधिकारिक समर्थन या अनुमोदन का गठन नहीं करता है कि उपयुक्त हो सकता है दूसरों के बहिष्कार के लिए । इसके अतिरिक्त, आर्किड बायोलॉजी (2017) में फ्लोरिडा जीव विज्ञान विभाग-लुईस और वरिना वॉन फैलोशिप विश्वविद्यालय, और फ्लोरिडा विश्वविद्यालय ग्रेजुएट रिसर्च फेलोशिप (2014-2018) ने भी धन प्रदान किया। हम इस वीडियो के फिल्मांकन के दौरान इस्तेमाल किए जाने वाले आर्किड प्लांट के लिए स्टेटसन यूनिवर्सिटी से सिंडी बेनिंगटन को भी धन्यवाद देते हैं ।
Materials
| Bulkhead Union | Cole-Palmer | UX-06390-10 | |
| FEP tubing | Cole-Palmer | UX-06407-60 | |
| Gas Chromatography | Hewlett Packard | 6890 | |
| Glass Wool, Silanized | Sigma-Aldrich | 20411 | |
| Inlet liner | Agilent | 5062-3587 | |
| Mass Spectrometer | Hewlett Packard | 5973 | |
| Reynolds oven bag | Reynolds Consumer Products | Turkey size | |
| Tenax Porous Polymer Adsorbent | Sigma-Aldrich | 11982 |
References
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