والهدف من هذا البروتوكول هو التفصيل نهج ثبت لاعداد عينات جسيمات متناهي plasmonic ولأداء الطيفية الجسيمات واحد عليها مع تباين التداخل التفاضلي (DIC) المجهر.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
أداء الطيفي علي جسيمات نانويه Plasmonic مع القائم علي انتقال Nomarski نوع التداخل التفاضلي التباين المجهر
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
المجهر التفاضلي التباين (DIC) هو أداه التصوير القوية التي تستخدم الأكثر شيوعا لتصوير الأجسام المجهرية باستخدام ضوء المدى المرئي. والغرض من هذا البروتوكول هو التفصيل طريقه ثبت لاعداد عينات جسيمات متناهي plasmonic وأداء الطيفية الجسيمات واحد عليها مع المجهر DIC. ويجب اتباع العديد من الخطوات الهامه بعناية من أجل اجراء تجارب طيفيه قابله للتكرار. أولا ، يمكن حفر المعالم في الركيزة العينة ، والتي تساعد في تحديد مكان سطح العينة وفي تتبع المنطقة من الفائدة اثناء التجارب. بعد ذلك ، يجب تنظيف الركيزة بشكل صحيح من الحطام والملوثات التي يمكن ان تعيق أو تحجب فحص العينة. بمجرد ان يتم اعداد عينه بشكل صحيح ، يجب محاذاة المسار البصري لمجهر ، وذلك باستخدام كولر الاضاءه. مع معيار Nomarski نمط DIC المجهر ، قد يكون من الضروري دوران العينة ، لا سيما عندما الجسيمات النانويه plasmonic تظهر الخصائص البصرية التي تعتمد علي الاتجاه. لان المجهر DIC لديه اثنين من حقول الاستقطاب المتعامد المتاصله ، ونمط التباين DIC تعتمد علي الطول الموجي يكشف عن اتجاه جسيمات نانويه plasmonic علي شكل قضيب. وأخيرا ، يجب الاضطلاع بعناية بعمليات الحصول علي البيانات وتحليل البيانات. من الشائع ان تمثل بيانات الطيف الطيفي المستندة إلى DIC كقيمه تباين ، ولكن من الممكن أيضا تقديمها كبيانات كثافة. في هذه المظاهرة من DIC لطيفي الجسيمات واحد ، والتركيز علي جسيمات نانويه الذهب علي شكل كرويه وقضيب.
المقدمة
ومنذ الثمانينات ، ينظر إلى المجهر التفاضلي المتباين للتداخل (DIC) إلى حد كبير علي انه طريقه تصوير مهمة محجوزه للأجسام المجهرية داخل العلوم البيولوجية. مهما, اثناء تطويره في الخمسينات والستينات, كان نويت هو كتقنية ل [متريلس] علم1. مع التطورات الاخيره في العلوم المادية المتعلقة بالجسيمات النانويه plasmonic ، وقد تم زيادة الاهتمام في توصيف المواد مع المجهر البصري مكان.
العديد من التقنيات البصرية هي بالتاكيد متاحه لتوصيف نانوماتيريال (علي سبيل المثال ، الحقل المظلم ، برايت فيلد ، الاستقطاب الضوء ، فلوري ، الخ). الحقل المظلم هو شعبيه علي نطاق واسع في البحوث الجسيمات متناهية ، ولكنه يعتمد فقط علي جمع مبعثر ويوفر معلومات مح....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. اعداد العينة مع الشرائح المجهر الزجاج القياسية
- اعداد الشرائح المجهر الزجاجي لترسب عينه.
ملاحظه: في بعض الحالات ، قد يكون من الأنسب لتخزين الزجاج في الماء فائق النقاء بدلا من الايثانول. ومع ذلك ، تخزين في الماء أو الهواء يجعل الزجاج مسعور مع مرور الوقت.- للحصول علي أفضل النتائج ، وشراء الزجاج أو الكوارتز الشرائح المجهر وتغطيه الزجاج.
- باستخدام قلم خربشه ، ضع علامة خدش ضحلة وقصيرة علي وسط كل زلة غطاء زجاجي.
- تنظيف جميع الزجاج المجهر ، حتى لو تم شراؤها "قبل تنظيفها" ، لأزاله شظايا الزجاج ، والغبار ، ومسحوق ، وبقايا العضوية ، وأي ملوثات أخرى تؤثر علي جوده التصوير أو ترسب عينه.
ملاحظه: هذه الطريقة التنظيف أدناه يعمل بشكل جيد لأ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
عند العمل مع العينات التي هي كبيره بما يكفي ان ينظر اليها مع العين المجردة ، ووضع المعالم علي الركيزة الزجاجية ليست مطلوبه عاده. ومع ذلك ، عند العمل مع المواد النانويه أو عند الحاجة إلى دوران العينة ، يمكن ان توفر المعالم طريقه سهله لتحديد موقع العينة وتمييزها وتتبع اتجاهها. علي الرغم من انه يمكن استخدام تقنيات أكثر تطورا لترك المعالم علي ركائز الزجاج17، خدش الزجاج مع القلم سكريبينج هو طريقه اقتصاديه وبسيطه التي تعمل في العديد من الحالات. ومن المهم تجنب فحص مناطق ا.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
عند التصوير مع المجهر DIC ، فمن المهم لتحسين المكونات البصرية قبل جمع البيانات. حتى التعديلات الطفيفة علي المستقطب في منتصف التجربة يمكن ان تؤدي إلى تاثيرات كبيره علي البيانات النهائية6. وعلاوة علي ذلك ، تتطلب مواد مختلفه إعدادات الاستقطاب مختلفه. علي الرغم من انه تم استخدام احجام الخطوات الكبيرة هنا لإثبات تاثير زاوية الاستقطاب ، في تجربه فعليه ، فانه من الضروري تحسين اعداد الاستقطاب داخل 1 °-2 درجه من اعداد التباين الأمثل. وينبغي أيضا تسجيل الاعداد المستقطب للرجوع اليها في المستقبل. ومن المستحسن.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
وليس لدي صاحب البلاغ ما يكشف عنه.
شكر وتقدير
الدكتور أنتوني س. ستندر يرغب في الاعتراف بالدعم الفني من خلال معهد الظواهر الكمية (NQPI) في جامعه أوهايو. وقد أتيحت هذه المادة من خلال بدء التمويل المقدم للدكتور ستندر من جامعه أوهايو.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| Contrad 70 | Decon Labs، Inc. | 1002 | لتنظيف زجاج المجهر ، متوفر من خلال العديد من موردي المواد الكيميائية |
| الإيثانول | فيشر العلمي | A962-4 | لتنظيف وتخزين زجاج |
| زلات غطاء المجهر الزجاجي | تيد بيلا | 260148 | |
| شرائح المجهر الزجاجي | تيد بيلا | 26007 | |
| قضبان نانو ذهبية | Nanopartz | DIAM-SPR-25-650 | |
| الكرات النانوية الذهبية (80 نانومتر) | Sigma Aldrich | 742023-25ML | |
| ImageJ | NIH | N / A | برنامج مجاني متاح لتحليل البيانات من |
| NIJ طلاء الأظافر | علوم المجهر الإلكتروني | 72180 | |
| نيكون Ti-E مجهر | نيكون | N / A | |
| غاز النيتروجين | غاز | الهواء N / A | |
| ORCA فلاش 4.0 V2 + كاميرا رقمية sCMOS | قلم الكتابة 77054098 | ||
| Amazon | N / A | العديد من الخيارات المتاحة عبر الإنترنت بأقل من 10 دولارات. ليس من الضروري شراء نسخة باهظة الثمن. | |
| عالي النقاء | 18 ميغا أوم |
المراجع
- Pluta, M. Ch 7: Differential Interference Contrast in. Advanced Light Microscopy. 2, Elsevier. 146-197 (1989).
- Stender, A. S., Wang, G., Sun, W., Fang, N. Influence of Gold Nanorod Geometry on Optical Response. ACS Nano. 4 (12), 7667-7675 (2010).
- Stender, A. S., et al.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
