מינהל הארגון הישיר כדי לשפר את הסוכן הסלקטיבי התצהיר בתוך הריאה של העכבר
Summary
Intratracheal (IT) המינהל של סוכנים ניסיוניים בעכברים לעתים קרובות מביא משלוח אסימטרי הריאות המרוחק. בדוח זה, אנו מתארים גישה ישירה בלתי-מרורונצ’יאל (ליברות) כדי לאגור כל ריאה בעכברים חיים שאינם מבצעית. גישה זו יכולה לשמש באופן סלקטיבי לניהול סוכנים לריאה אחת או להתאים כדי לשפר את מסירת הסוכן הסימטרי לשתי הריאות.
Abstract
Intratracheal (IT) המינהל של סוכנים ניסיוניים היא טכניקה חיונית במודלים murine של מחלות ריאות מפוזר, כגון פיברוזיס ריאתי ליאומיצין. עם זאת, הפצה של סוכנים מנוהל intratracheally לריאות העכבר הקטן הוא אסימטרי לעתים קרובות, עם הריכוזים של הריאה בתוך הריאות הגדילה את הריאה הקטנה (אבל נגיש באותה מידה) שמאל של העכבר. המתואר בדו ח זה הוא הרומן הבלתי מטרורוציאל (ליברות) הגישה לצינורית השמאלית ו/או הימנית של עכברים חיים שאינם מבצעית. הוא גם הוכיח כיצד גישה זו יכולה לשמש לניהול באופן סלקטיבי סוכנים לריאה אחת או מותאם (באמצעות משלוח מותאם מינון מסירה) כדי לשפר את הסימטריה הימנית השמאלית של משלוח הריאות של סוכני ניסיוני, ובכך לשפר את המודלים של לפזר מחלות ריאות כגון פיברוזיס של הריאות ליאומיצין המושרה.
Introduction
מינהל ריאתי ישיר של סוכני ניסיוני בעכברים מאפשר לימוד של תגובות החיסון לריאות, פציעה בריאה חריפה, פיברוזיס ריאות. מינהל ריאתי ישיר מבוצע בדרך כלל באמצעות intratracheal (זה), כמתואר בעבר1,2,3. עם זאת, גישה זו אינה סלקטיבית, להשפיע על שתי הריאות בצורה לא ממוקדת לעתים קרובות אסימטרית. מידול ניסיוני של פגיעה בריאה עשוי להועיל מהיכולת באופן סלקטיבי היעד ריאה ספציפית אחת, ומאפשר להשתמש בריאה הצלעות בתור שליטה. לעומת זאת, דוגמנות מדויקת של מחלות ריאה מפוזר האדם היתרונות של התפלגות סימטרית של סוכני ניסיוני על הריאה הדו כימומה.
המטרה הכוללת של דו ח זה היא לתאר שיטה למסירה סלקטיבית של סוכנים ניסיוניים לריאה השמאלית או הימנית של העכבר (איור 1). הגישה הזאת לניהול הארגון מאפשרת טיפול חד צדדי בריאות העכבר וניתן להתאים בקלות כדי להבטיח משלוח שווה של סוכן לברוצ הגזע הדו. על-ידי שימוש בניהול ה-, כדי לספק מינונים גדולים יותר של סוכני ניסוי לריאה הימנית הגדולה יותר ולאמצעי אחסון קטנים יותר לריאה השמאלית הקטנה יותר (כלומר, מנהל מינון מותאם במינון), הפגינו בדו ח זה שיפור בהומוגניות של הריאות משלוח של סוכני ניסיוני, אופטימיזציה של המודל של פגיעה ריאה מפוזר בעכברים. ככזה, דו ח זה עשוי להכיל ערך לחוקרים המבקשים לנהל באופן חד-צדדי סוכנים ניסיוניים לעכברים או לשפר את הסימטריה של התצהיר בשתי הריאות.
Protocol
Representative Results
Discussion
פגיעה בריאה כבר מעוצבת באופן קלאסי במכרסמים באמצעות מינהל IT של סוכנים מזיק כגון BLM6. עם זאת, מינהל IT מסוג זה מוביל לפציעה בלתי אחידה, ומשקף את האופי הלא ממוקד של משלוח ריאות עם גישה זו7. מגבלות אלה של פגיעה בריאות מידול הם אתגרים לימודיים מול כאשר מנסים את משלוח ה-IT ש?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו ממומנת על ידי מענק NHLBI HL125371 כדי E.P.S. ועל ידי משרד ההגנה (CDMRP) מענק W81XWH-17-1-0051 ל Y.Y.
Materials
| 22 G shielded IV Catheter | BD | 381423 | |
| Bleomycin | Enzo life sciences | BML-AP302-0010 | |
| Compact Mini rodent anesthesia machine | DRE Veterinary | 9280 | |
| Evans blue dye | Sigma-Aldrich | E2129 | |
| FITC-dextran | Sigma-Aldrich | FD150 | |
| Isoflurane | Piramal Critical Care | NDC | |
| LED-30W Fiber Optic Dual Gooseneck Lights Microscope Illuminator | AmScope | LED-30W | |
| Low temperature cautery with fine tip | Bovie | AA02 | |
| Precisionglide needle, 18G x 1" | BD | 305195 | Beveled tip, 12 mm in length |
| Xylazine | AKORN | NDC 59399-110-20 | |
| Zatamine | VetOne | NDC 13985-702-10 | Ketamine |
References
- MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. An improved simple method of mouse lung intubation. Journal of Applied Physiology. 106 (3), 984-987 (2009).
- Thomas, J. L., et al. Endotracheal intubation in mice via direct laryngoscopy using an otoscope. Journal of Visualized Experiments. (86), (2014).
- Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice. Journal of Visualized Experiments. (108), 53771 (2016).
- McGovern, T. K., Robichaud, A., Fereydoonzad, L., Schuessler, T. F., Martin, J. G. Evaluation of respiratory system mechanics in mice using the forced oscillation technique. Journal of Visualized Experiments. (75), e50172 (2013).
- Halbower, A. C., Mason, R. J., Abman, S. H., Tuder, R. M. Agarose infiltration improves morphology of cryostat sections of lung. Laboratory Investigation. 71 (1), 149-153 (1994).
- Thrall, R. S., McCormick, J. R., Jack, R. M., McReynolds, R. A., Ward, P. A. Bleomycin-induced pulmonary fibrosis in the rat: inhibition by indomethacin. American Journal of Pathology. 95 (1), 117-130 (1979).
- Matute-Bello, G., Frevert, C. W., Martin, T. R. Animal models of acute lung injury. American Journal of Physiology Lung Cellular and Molecular Physiology. 295 (3), L379-L399 (2008).
- Del Sorbo, L., et al. Intratracheal Administration of Small Interfering RNA Targeting Fas Reduces Lung Ischemia-Reperfusion Injury. Criticial Care Medicine. 44 (8), e604-e613 (2016).
- McLemore, T. L., et al. Novel intrapulmonary model for orthotopic propagation of human lung cancers in athymic nude mice. Cancer Research. 47 (19), 5132-5140 (1987).
- Vertrees, R. A., et al. Development of a human to murine orthotopic xenotransplanted lung cancer model. Journal of Investigative Surgery. 13 (6), 349-358 (2000).
