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Artigo de método

Modelo Osteomyocutaneous Heterotopic modificado da aleta do Hindmembro no rato para a pesquisa de Allotransplante composta Vascularized translacional

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DOI:

10.3791/59458

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26 de abril de 2019

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Neste artigo

Resumo

O allograft composto vascularized oferece benefícios Life-alterando aos receptores da transplantação, mas as causas biológicas da rejeição da corrupção e do vasculopatia permanecem mal compreendidas. O modelo cirúrgico do roedor apresentado aqui apresenta um modelo de transplante reprodutível e clinicamente relevante, permitindo que os pesquisadores avaliem eventos de rejeição e potenciais estratégias terapêuticas para prevenir sua ocorrência.

Resumo

O allotransplante composto vascularized (VCA) é um campo relativamente novo na cirurgia reconstrutiva. As realizações clínicas na VCA humana incluem transplantações da mão e da cara e, mais recentemente, parede abdominal, útero, e transplantes urogenital. Os resultados funcionais excederam as expectativas iniciais, e a maioria dos destinatários desfruta de uma melhor qualidade de vida. Entretanto, como a experiência clínica se acumula, a rejeição crônica e as complicações da imunossupressão devem ser abordadas. Em muitos casos onde os enxertos falharam, a patologia causativa tem sido vasculopatia isquêmica. Os mecanismos biológicos da rejeição aguda e crônica associados à VCA, especialmente vasculopatia isquêmica, são importantes áreas de pesquisa. No entanto, devido ao pequeno número de pacientes com VCA, a avaliação dos mecanismos propostos é melhor abordada em um modelo experimental. Vários grupos usaram modelos animais para abordar algumas das questões não resolvidas relevantes na rejeição de VCA e vasculopatia. Vários modelos de modelos envolvendo uma variedade de espécies são descritos na literatura. Aqui nós apresentamos um modelo reprodutível da aleta osteomyocutaneous do hindtopic do membro de VCA no rato que pode ser utilizada para a pesquisa translacional de VCA. Este modelo permite a avaliação seriada do enxerto, incluindo biópsias e diferentes modalidades de imagem, mantendo um baixo nível de morbidade.

Introdução

A cirurgia reconstrutiva para a perda catastrófica do tecido da amputação, de ferimentos da explosão, de malignidades, e de defeitos congenitais é limitada pela disponibilidade do tecido do paciente e da morbosidade adicional causada no local doador. Em alguns casos, como vítimas de queimadura ou amputados quadrilaterais, o tecido viável para a reconstrução não está disponível do paciente. Em 1964, o primeiro transplante de mão moderno foi realizado no Equador. Quando este era um sucesso técnico, o imunossupressão disponível na altura era insuficiente para impedir a rejeição, e a corrupção foi perdida em menos de 3 semanas1. Em 1998 e 1999, os ....

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Protocolo

Todas as cirurgias animais foram realizadas de acordo com os protocolos aprovados pela Comissão de cuidados e uso de animais institucionais da Universidade de Louisville (protocolo aprovado pelo IACUC 18198) e o guia dos institutos nacionais de saúde (NIH) para o cuidado e uso de Animais de laboratório10. Brown-Noruega masculino quatro-mês-velho (RT1. An) e 4-mês-velho masculino Lewis (rt1. Al) ratos foram utilizados como doador VCA e receptores, respectivamente.

1. colheita do allograft do doador

  1. Sedate o animal doador usando isoflurano vaporizado aplicado através de uma câma....

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Resultados

O modelo osteomyocutaneous do retalho do hindtopic do membro de VCA do rato permite a sobrevivência a longo prazo do allograft o immunosuppression. O modelo é confiável, reprodutível e simples de executar. A aleta é bem escondida na área do virilha e constitui a morbosidade e o incómodo mínimos ao animal. A apresentação cutânea é uma manifestação clínica da sobrevida e rejeição do aloenxerto (Figura 1). O projeto da aleta permite a monitoração clínica bruta e cria uma oportunidade para vária.......

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Discussão

No desenvolvimento deste modelo de VCA, foram consideradas várias questões-chave. Primeiro, foi importante incluir osso intacto (tíbia e fíbula), medula óssea e pele no enxerto. Quando os transplantes clínicos da mão dos doadores adultos não transferirem quantidades significativas de medula ativamente hematopoiéticas, os estudos do papel do Niche da medula são espelhados melhor usando um osso intacto, vascularizado um pouco do que um osso longo cortado, que resulte em fibrose da medula exposta. Além disso, o projeto oste.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pelo gabinete do secretário adjunto de defesa para os assuntos de saúde através do programa de pesquisa médica Congressionally dirigido o prêmio não. W81XWH-13-2-0057. Opiniões, interpretações, conclusões e recomendações são as dos autores e não são necessariamente endossadas pelo departamento de defesa.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
AcepromazinaHenry Schein5700850
Adventícia TesourasASSI 
Grampo de Aproximação (Duplo)ASSIABB2V, ABB22V
Grampo de Aproximação (único)FST00398-02
Grampo de Aplicação de FórcepsASSI CAF4
Tesoura de DissecaçãoASSISDS18R8
Agulha de Descarga Sódio de HeparinaSAI
HeparinaSagent25021-400-30
IsofluranoPatterson Veterinário14043-704-06
JoalheirosBipolar ASSI103000BPS03
Pinça de Joalheiros #3FST11231-30
Cetamina HCl 100 mg/mLZoetis043-304Licença DEA necessária
Solução de Ringer com lactatoHospira0409-7953-03
Solução de Ringer com lactato + 5% de dextroseHospira0409-7953-09
MeloxicamHenry Schein11695-6925-2
Micro fórcepsASSI Porta-agulha micro JFAL3
ASSIB138
Prograf (Tacrolimus) 5 mg/mLAstellas0469-3016-01
Sutura, 10-0 ProleneEthiconW2790ou 10-0 Ethilon (2830)
Sutura, 4-0 Revestido VicrylEthiconJ714D
Pinça Dilatadora de VasoASSID5AZ
XilazinaVetOne13985-612-50
SAS15R8 Sagent 25021-400-30 G

Referências

  1. Gilbert Fernandez, J. J., Febres-Cordero, R. G., Simpson, R. L. The Untold Story of the First Hand Transplant: Dedicated to the Memory of one of the Great Minds of the Ecuadorian Medical Community and the World. Journal of Reconstructive Microsurgery. , (2018).
  2. Dubernard, J. M., et al.

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Reimpressões e permissões

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